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该文探讨了卡那霉素、G418、羧苄青霉素和头孢霉素4种抗生素对银白杨不同培养阶段外植体生长、分化或生根的影响,确立了由农杆菌介导的银白杨遗传转化研究中抗生素种类和转化体的筛选浓度.结果表明:在叶片转化筛选阶段,卡那霉素和G418的适宜浓度分别为15和10mgL,羧苄青霉素和头孢霉素的适宜浓度为200～600mgL和200～400mgL;在抗性芽生根培养时,卡那霉素和G418浓度分别为20～25mgL和15～20mgL,羧苄青霉素和头孢霉素浓度为200～800mgL和200～600mgL.头孢霉素或羧苄青霉素的抑菌效果因农杆菌菌株的不同而存在差异,羧苄青霉素对农杆菌LBA4404抑制效果好,头孢...

关键词：银白杨抗生素遗传转化

籼稻品种93-11遗传转化中抗生素适宜剂量的筛选

[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版) [作者] 黄碧光范永立刘美顺

为优化农杆菌介导转化体系,研究了两种常用抑菌剂头孢霉素(cef)和羧苄青霉素(cb)的抑菌效果和对籼稻品种93-11成熟胚培养的影响,并进一步研究选择剂潮霉素(hyg)对愈伤诱导、分化和种子萌发生根的影响,确定其作为选择剂的有效浓度.对cb和cef共设置12种质量浓度处理,各处理都能完全抑制农杆菌的生长,同时对愈伤的诱导和生长没有不良影响,但是有些处理使愈伤的分化率下降.150、250 mg.L-1cb的单独作用,400、500 mg.L-1cef的单独作用,以及cb为100mg.L-1时,300、400、500 mg.L-1cef的3种互作处理都不影响愈伤的分化率;但cef高达600 mg....

关键词：籼稻93-11 遗传转化抗生素头孢霉素羧苄青霉素潮霉素

1Dx5在新冬26小麦中的遗传转化及分析

[期刊] 华北农学报 [作者] 王翠芳杨坤曾卫军祝长青

为了对转１Ｄｘ５基因小麦的Ｔ１进行遗传分析，将优质高分子量麦谷蛋白亚基（ＨＭＷ－ＧＳ）基因１Ｄｘ５转入新疆耐盐小麦品种新冬２６，在蛋白质水平上经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测，有３７粒小麦种子１Ｄｘ５基因表达。经过继代培育，得到３７个Ｔ１转基因株系，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析Ｔ１转基因小麦籽粒的ＨＭＷ－ＧＳ组成，结果表明：在蛋白质水平，ＨＭＷ－ＧＳ的组成在Ｔ１小麦种子中有３种表型：表型Ⅰ，外源１Ｄｘ５基因没有表达；表型Ⅱ，外源１Ｄｘ５基因表达；表型Ⅲ，内源１Ｄｘ２基因没有表达。这３种表型出现的概率分别约为３４．３％，４５．９％和１９．８％。该研究成功获得了新的ＨＭＷ－ＧＳ组成的小麦，为选育优质小麦提供分子依据．．．

关键词：小麦优质 SDS-PAGE HMW-GS

农杆菌介导遗传转化敏感基因型小麦的筛选鉴定

[期刊] 华北农学报 [作者] 郭志江丁在松王金明赵明

敏感型受体小麦品种鉴定的匮乏制约了农杆菌介导小麦的发展。以Gus基因检测及PCR检测为方法,对68个品种的成熟胚愈伤检测Gus基因表达,对8个品种的幼胚转化植株进行PCR检测,结果表明:受体材料扬麦10、师栾02-1、石家庄5号、周麦18、山东01-35、泰山008、Y9-63、邯郸3475经PCR检测,检测到目标基因,为农杆菌侵染敏感型受体材料;扬麦10、师栾02-1侵染后,Gus基因能够表达,且以恢复培养14 d的侵染效果最好,Gus基因表达的愈伤数量增加与蓝斑体积增大,可作为体系优化的受体材料。

关键词：农杆菌敏感基因型小麦 Gus基因检测 PCR检测

青稞Hva1-hv基因对小麦的遗传转化研究

[期刊] 西南农业学报 [作者] 李景良易玲李林龙海邓光兵潘志芬余懋群

本研究通过根癌农杆菌介导,将克隆自强抗旱青稞品种的LEA3蛋白编码基因Hva1-hv转化到小麦品种Bobwhite中。经除草剂草丁膦筛选和分子检测,鉴定出4个稳定遗传的转基因小麦株系。结果表明,在干旱胁迫条件下,经T2代植株的RT-PCR分析表明,目的基因能在转基因植物中正常表达。采用离体叶片失水率作为衡量植物抗旱能力的指标,发现干旱胁迫条件下,4个T2代转基因小麦株系的离体叶片失水率较受体材料显著降低,证明转基因植株的抗干旱胁迫能力强于受体材料。本研究结果初步显示,Hva1-hv基因在抗旱小麦品种培育方面具有潜在应用价值。

关键词： HVa1-hv 干旱青稞小麦转基因

潮霉素浓度和农杆菌浸泡时间对黄瓜外植体再生的影响

[期刊] 沈阳农业大学学报 [作者] 王学斌司龙亭孟茜李坤

选用再生能力较强的黄瓜自交系M8为试验材料,在再生体系建立的基础之上,采用根癌农杆菌介导法将转化酶抑制子基因转入黄瓜中。将农杆菌菌液浸泡过的子叶节分别接种在浓度梯度为1mg.L-1到10 mg.L-1的选择培养基上,研究子叶节对潮霉素的耐受性和敏感度。使用农杆菌菌液浸泡5,10,15,20min,分别接种到筛选培养基上,研究浸泡时间对转化效率的影响。结果表明:HygB的选择压浓度为6mg.L-1,侵染时间为15min时,再生频率最高,为18.9%。经PCR检测表明转化酶抑制子基因已经整合到黄瓜基因组中,转化率为2.0%。

关键词：黄瓜根癌农杆菌遗传转化优化转化酶抑制子

甘薯对潮霉素及除草剂的敏感性研究

[期刊] 西南农业学报 [作者] 李倩张聪吴洁蒲志刚王大一阎文昭邓科君张勇郑雪莲

为了研究不同品种甘薯在潮霉素以及basta选择下的耐受性,为甘薯的遗传转化提供依据,本试验选取了四川省常用甘薯栽培品种(材料),川薯164与西成薯007,以叶片为外植体,分别接种于含有6-BA、NAA及不同浓度梯度的潮霉素及basta的培养基上,统计分析得出不同基因型甘薯的最适抗性压。结果表明,川薯164与西成薯007叶片抗hyg的最适选择压分别为20~30,15~20 mg/L,川薯164与西成薯007叶片抗basta的最适选择压均为1.0 mg/L。

关键词：甘薯敏感性潮霉素 Basta 愈伤组织褐变

根癌农杆菌介导小麦成熟胚的遗传转化研究

[期刊] 华北农学报 [作者] 郭丽谷俊涛龙素霞郭程瑾肖凯

以小麦成熟胚为转化受体,采用农杆菌介导的遗传转化技术,建立了小麦的转基因株系。结果表明,建立的小麦遗传转化和植株再生体系,在选择压下由侵染的小麦成熟胚中,获得的抗性愈伤组织频率为57.50%,愈伤组织分化频率为8.58%,植株分化比例为0.83%。对再生植株中报告基因Gus的PCR检测结果表明,供试3株小麦的PCR均为阳性。与未进行遗传转化的对照植株相比,再生植株的Gus活性明显提高。表明再生的供试植株均为转基因植株。因此,本研究建立的小麦成熟胚遗传转化和再生体系,为今后小麦的高频转基因系的获得提供了参考依据。

关键词：小麦(Triticum aestivum L.) 成熟胚遗传转化分子鉴定

蓝粒小麦籽粒色素遗传研究

[期刊] 华北农学报 [作者] 兰素缺李杏普刘玉平

利用不同来源的蓝粒小麦与白粒小麦杂交,进行色素遗传分析。研究结果表明,来源于偃麦草的D87065和D87089的籽粒色素基因由2对互补基因控制;来源于黑麦的92-1由2对互补基因控制;来源不明确的7083L-16由1对基因控制。

关键词：蓝粒小麦籽粒色素遗传

小麦春化基因的遗传效应研究

[期刊] 华北农学报 [作者] 孙果忠游光霞武淑祯张秀英王海波肖世和

为了解小麦春化基因Vrn-1的遗传效应,以15个不同类型的小麦品种为试材,研究了不同春化处理对小麦发育进程的影响,并采用分子标记鉴定了上述品种的Vrn-1等位基因组成。结果表明,不同Vrn-1等位基因组合的小麦品种抽穗期存在很大差异;3个显性Vrn-1等位基因的遗传效应表现为Vrn-A1>Vrn-D1>Vrn-B1;春化基因具有累加效应,显性Vrn-1基因的存在使基因型呈现春性特征,不携带任何显性Vrn-1基因的基因型则表现为冬性。因此,采用春化基因分子标记可以很好地预测品种的冬春性。

关键词：小麦春化基因遗传效应

利用CRISPR/Cas9技术敲除转基因水稻中的潮霉素标记基因

[期刊] 西南农业学报 [作者] 彭梅芳甘凤潘春梅宋健兰范晓丽陈克贵

【目的】在植物转基因研究中,使用选择标记基因(Selectable Marker Gene, SMG)使得转化子的筛选更准确便利,但存在SMG的转基因植株可能对人类健康及生态环境造成潜在危害,这也限制了转基因植物商业化的应用前景。因此去除转基因植物中的SMG十分必要。【方法】本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,针对水稻转基因中常用的SMG潮霉素抗性基因(hygromycin phosphotransferase II,hptII)设计构建了编辑载体,利用农杆菌(LBA4404)介导的遗传转化方法转化水稻日本晴,得到转化植株,再将转化植株与带有hptII基因的植株进行杂交。【结果】通过遗传转化及分子鉴定,本研究得到了18株可用于编辑hptII基因的转化植株,进一步对转化植株与带有hptII基因的植株杂交的F_1代进行检测,经PCR检测及测序验证表明,在杂交F_1代植株中,hptII基因的DNA确有编辑发生,包括碱基缺失、替换以及插入等,使得hptII基因不能成功转录。【结论】利用CRISPR/Cas9技术,成功获得了删除hptII基因的转基因水稻。这为植物转基因研究实现无选择标记基因(marker-free)奠定了基础。

关键词：水稻遗传转化潮霉素抗性基因无选择标记基因 CRISPR/Cas9

小麦新品种周麦23号的遗传构成分析及其特异引物筛选

[期刊] 中国农业科学 [作者] 邹少奎殷贵鸿唐建卫韩玉林李楠楠李顺成黄峰王丽娜张倩高艳

【目的】探讨亲本对黄淮麦区小麦新品种周麦23号的遗传贡献和周麦23号的遗传构成并筛选出其特异引物,用于检测周麦23号的品种真实性。【方法】利用覆盖小麦21条染色体的340个SSR标记对周麦23号及其亲本周麦13号、新麦9号进行简单重复序列(SSR)标记分析,解析亲本的遗传物质在周麦23号中传递频率和遗传贡献率。同时可以筛选到若干个周麦23号不同于任一亲本的引物,利用周麦23号的姊妹系、衍生品种对这些特异标记进行二次筛选,最终选择1-2个周麦23号的特异引物,并利用黄淮麦区的主推品种周麦22号、济麦22、矮抗58、郑麦366等14份材料对最终筛选的特异引物进行验证。【结果】双亲周麦13号和新麦9...

关键词：普通小麦周麦23号遗传构成特异引物

粗山羊草在小麦遗传育种中的应用研究进展

[期刊] 中国农业大学学报 [作者] 郎杰张海泉杨虹

小麦是世界上第二大粮食作物,对我国粮食供给起到举足轻重的作用。但目前高产、抗病及抗逆性强的小麦品种较少,使小麦的生产受到一定制约。挖掘优异遗传资源,培育高产、优质、抗逆性强的小麦品种是小麦育种的重要任务。粗山羊草是小麦D基因组的供体,蕴含着大量抗病、抗虫、抗逆和改良小麦品质的基因。为挖掘其优异基因用于小麦育种,丰富小麦的遗传资源,对小麦育种工作起到推动或借鉴作用,对粗山羊草在分子水平和抗病、抗虫、抗逆方面的研究进展进行综述,介绍了在储藏蛋白方面的研究情况,以及粗山羊草在小麦育种上的应用。

关键词：粗山羊草遗传资源抗病基因储藏蛋白小麦育种

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