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[期刊] 华北农学报  [作者] 程增书  高志强  方仁  
从小麦CK89、102、113的花药和花冬的约穗诱导愈伤组织的继代培养中,选择致密颗粒型愈伤组织,转入附加2,4-D2~4mg/L改良MS固体培养基上进行继代培养,6~10周后形成生长迅速的胚性愈伤组织,这种愈伤组织分离原生质体得率为1~3.7×107个/g。原生质体于PCM2培养基上琼脂糖包埋培养,3~5天出现第一次细胞分裂,7~14天进行第二、第三次细胞分裂,两周后形成大量细胞团,细胞分裂频率达20.3%~73.3%,4~6周后形成肉眼可见愈伤组织。供试4个基因型中,CK89、102和花冬均形成再生愈伤组织,仅113形成多细胞团。愈伤组织增殖分化实验尚在进行中。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 史永忠  万蜀渊  薛光荣  
草莓花药愈伤组织经5次继代培养,生长旺盛,质地松软,可用于原生质体的分离。在含0.1%PectolyaseY-23,0.5%纤维素酶(OnozukaR-10),0.5%离析酶(MacerozymeR-l0)的混合酶液中酶解13h,原生质体的产量为1.47×10 ̄6/gFW,活性67.35%。原生质体采用液体浅层和琼脂糖包埋培养,获得了肉眼可见的多细胞团。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 文峰  肖诗鑫  聂扬眉  马秋香  张鹏  郭文武  
【目的】建立有效的木薯原生质体再生体系,为原生质体融合以及原生质体转化等研究奠定技术基础。【方法】酶解木薯品种TMS60444的脆性胚性愈伤组织(FEC)的悬浮系,分离原生质体的产量最高达3.5×106个/g,FDA检测其活性约90%。用TM2G培养基以液体浅层法分别在5×105个/mL和2×105个/mL密度下培养,培养过程中前30 d用0.3 mol.L-1TM2G新鲜培养基每10 d更换1次,此后每10 d用0.25 mol.L-1TM2G新鲜培养基更换。原生质体培养45 d后即可挑出1—2 mm大小的愈伤组织分别在MSN培养基上分化胚、CMM上促胚成熟、CEM上茎伸长、MS上生根。【结...
[期刊] 中南林业科技大学学报  [作者] 李昌珠  王丽华  陈建华  蒋丽娟  李培旺  张良波  
为获得高质量的原生质体,给光皮树转化系统的建立奠定基础,以光皮树花药愈伤组织为材料,研究了愈伤组织结构、酶液组合、酶解时间及渗透压对原生质体分离效果及活力的影响,从而确定适合光皮树花药愈伤组织原生质体最佳分离条件。结果表明:淡黄绿色、疏松的愈伤组织在CPW+2%纤维素酶R-10+0.3%蜗牛酶+0.25%果胶酶Y-23+13%甘露醇+0.6/L MES的酶解液中,黑暗条件下振荡酶解10 h,原生质体产量达到3.19×106个/g,具活力的原生质体为73.48%。
[期刊] 湖南农业大学学报  [作者] 胡家金  甘霖  熊兴耀  肖浪涛  张秋明  
由美味猕猴桃东山峰 79- 0 9品种诱导产生的 4种类型愈伤组织 ,其分离原生质体的效果不同 :A型愈伤组织分离的原生质体数量多 ,但活力较低 ;B型愈伤组织分离的原生质体不仅数量较多 ,而且活力也高 ;C型愈伤组织分离的原生质体数量少 ,但活力高 ;D型愈伤组织分离的原生质体数量较多 ,但活力低
[期刊] 华北农学报  [作者] 龙素霞  赵芳华  许振龙  肖凯  
以4个冬小麦品种的成熟胚为外植体,研究了温度预处理、愈伤组织诱导培养基中2,4-D浓度和分化培养基激素种类及其配比对小麦成熟胚愈伤组织形成和分化的影响。结果表明,与室温25℃相比,低温4℃预处理能明显改善愈伤组织的形成率。适宜愈伤组织形成的诱导培养基中2,4-D浓度以4 mg/L为宜,分化培养基中含有1 mg/LKT+2 mg/L 6-BA较仅含有1 mg/L KT或2 mg/L 6-BA能明显促进愈伤组织的分化。相同培养条件下,不同品种间的愈伤组织形成和再生能力存在较大差异。因此,进行低温种子预处理、愈伤组织诱导过程中采用适宜的2,4-D浓度,以及分化过程中采用适宜的激素组合是冬小麦高频愈伤...
[期刊] 西南农业学报  [作者] 程在全  王芳  宋令荣  普双有  黄兴奇  
在从小麦种子体细胞诱导产生愈伤组织的组培试验中,以 M S培养基配方为基础,适当减少 N 素含量和氨基酸含量成为 M S P培养基,小麦种子经1 个月的低温(4℃) 处理, 接种时种子的腹沟朝上, 在有光照条件下 (12h 光照/d), 多数小麦材料产生的胚性愈伤组织诱导率可显著提高,最高达866% 。具有 A A B B D D染色体组型的小麦愈伤组织诱导率比具有 A A B B染色体组型的小麦高。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 曹清波  余毓君  
愈伤组织内的细胞表现了结构与功能的统一,整块愈伤由不同层次的细胞组成。分生细胞中心的活动使愈伤组织细胞增多,管状分子成为分生细胞中心与培养基之间的输导通道,分生细胞中心与培养基、或几个邻近分生细胞中心以大薄壁细胞相连接。内生胚状体位于愈伤组织内部空腔内,由壁木质化的细胞与母体隔开。
[期刊] 北京林业大学学报  [作者] 胡海英  赵亚美  阎晓磊  王华芳  
香花槐是集绿化、固土、饲料等于一体的多用途林木,其细胞培养则是充分利用该树种优良特性的生物工程技术基础.该文以香花槐叶片为外植体,研究愈伤组织诱导和细胞悬浮培养的技术体系.结果表明,愈伤组织诱导最适培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L.愈伤组织生长符合S型曲线,在固体培养基上,培养7 d进入指数生长期,到28 d,愈伤组织鲜重从1.329 3 g增长到10.763 7 g.悬浮培养的细胞,最大生长量为鲜重8.496 g或干重0.474 g.S型生长曲线分析表明,细胞生长迟滞期为3.6 d,最大生长量为14.6 g.
[期刊] 华北农学报  [作者] 郭向云  尹钧  余桂荣  宋丽  
以14个小麦品种为试验材料,研究不同浓度维生素B1和分化前的干燥处理对小麦幼胚愈伤组织诱导、分化过程的影响。结果表明,小麦幼胚愈伤组织的分化率在不同基因型之间差异显著,其中最高的为郑新992(71 9%);在愈伤组织诱导、继代以及分化培养的MS培养基中添加维生素B1(盐酸硫胺素)10mg/L有利于小麦幼胚胚性愈伤组织的发生,同时对促进小麦幼胚愈伤组织的分化也有显著影响;在转入分化培养基前对愈伤组织进行干燥处理(12h)可有效提高其分化频率。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 罗源  陈耀锋  李春莲  余玲  任慧莉  李映梅  
以克新12号、克新13号、东农303和早大白4种马铃薯试管苗茎段为材料,研究各品种的组织培养体系。结果发现,克新13号和克新12号的最适愈伤组织诱导培养基为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2 mg/L 6-BA+1 mg/L 2,4-D;东农303为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D;早大白为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D。用上述最适诱导培养基培养,各品种的愈伤诱导率分别为100%,100%,100%和90%。克新13号愈伤组织分化的最佳培养基为MS+30 g/L蔗糖...
[期刊] 华北农学报  [作者] 严海燕  曹日强  
采用两阶段培养法研究不同培养基、激素的种类、浓度和各种营养成分对愈伤组织生长及紫草素形成的影响。结果表明 ,改良B5培养基为适宜的营养生长培养基。细胞分裂素和生长素均为紫草素形成所必需的。 6 BA 1 0mg·L- 1,IAA 0 1mg·L- 1为较佳配比。生长培养基中CaCl2 浓度为 2 5 0mg·L- 1,MgSO4 为 5 0 0mg·L- 1时 ,愈伤组织生长和紫草素形成均较佳。紫草素形成培养基中CuSO4 为M9浓度的 3倍时 ,紫草素产量较高。紫草素形成培养基中添加VB2及更高的FeSO4 对紫草素产量的提高没有效果。研究过程中优化了紫草细胞培养形成紫草素的方法 ,为建...
[期刊] 林业科学研究  [作者] 阙国宁  诸葛强  
以牡竹属黄竹(DendrocalamusmembranceusMunro)的竹节及无菌苗根颈为外植体,培养于含有5mg/L2,4-D、0.2mg/LKT和200mg/LLH的MS培养基上诱导愈伤组织,然后移至相同成份或不同浓度2,4-D的液体培养基中,进行悬浮培养,以建立分散性良好的悬浮细胞系。利用悬浮细胞和无菌苗叶片经酶解获大量原生质体,其产量分别约为每克鲜重2.5×105个和5×105个,活力均可达80%。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 陈发棣  蒋甲福  郭维明  
以小菊七月红、金莲、七月蜂黄、矮红、盏黄 5个品种的叶片为外植体 ,用MS +2 0mg·L-12 ,4 D +0 2mg·L-16 BA诱导愈伤组织培养基和MS +2 0mg·L-16 BA +0 1mg·L-1NAA分化培养基 ,选出分化能力较强的品种七月红。再以七月红的叶片上部、叶片下部、叶柄、茎段为外植体 ,在不同培养基 (B5、MS)上诱导胚性愈伤组织 ,发现茎段最易诱导出胚性愈伤组织 ,培养基以B5添加 0 5mg·L-12 ,4 D +0 2mg·L-16 BA ,MS添加 1 0mg·L-12 ,4 D +0 2mg·L-16 BA效果较好 ;在添加...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 吴琴生  刘宝  刘大钧  
“中国春”胚性细胞悬浮系经混合酶液处理,可游离出大量原生质体(产量可达3×10~7~4×10~7/ml细胞)。这些原生质体在较简单的 MS 修饰培养基上(液体浅层或低溶点琼脂糖包埋)能够持续分裂,并以较高植板率(45%~47%)形成细胞团。将来自细胞团的微愈伤组织转至分化培养基上能够产生大量绿点;只有少数愈伤组织能够转变为结构紧密的胚性愈伤组织;并由此分化出大量根系和叶片,但未获得完整植株。文中对造成这一现象的可能原因进行了讨论。
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