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[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
吴蔚 陈晓 张鹏 郑斯旻 吴文 郭金贺 徐朗莱 芮琪
目的]探明小麦叶片衰老过程中一种降解1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(ribulose1,5-bisphosphatecarboxylase/oxygenase,Rubisco)大亚基蛋白酶的生化特性。[方法]通过天然梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳后切胶回收的方法获得Rubisco全酶。目的蛋白酶的分离采用离子交换层析、非完全变性十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和切胶回收蛋白等方法,并采用含明胶的聚丙烯酰胺凝胶电泳对其生化特性(主要是最适pH、最适温度、热稳定性、蛋白酶类型等)进行了研究。[结果] 1)切胶回收的Rubisco全酶样品中存在降解大亚基的蛋白酶。2)在mono-Q离子交换层析条件下,...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
吴蔚 陈晓 张鹏 郑斯旻 吴文 郭金贺 徐朗莱 芮琪
[目的]探明小麦叶片衰老过程中1种降解1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(ribulose 1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase,Rubisco)大亚基蛋白酶的生化特性。[方法]通过天然梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳后切胶回收的方法获得Rubisco全酶,采用离子交换层析、非完全变性十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和切胶回收蛋白等方法分离目的蛋白酶,并采用含明胶的聚丙烯酰胺凝胶电泳研究其生化特性(主要是最适p H、最适温度、热稳定性、蛋白酶类型等)。[结果]切胶回收的Rubisco全酶样品中存在降解大亚基的蛋白酶。在Mono-Q离子交换层析条件下,该蛋白酶与R...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
李红兵 康振生
【目的】建立一种小麦叶片蛋白质组分析时去除全蛋白提取物中高丰度蛋白Rubisco酶的方法,为富集低丰度蛋白,提高双向电泳灵敏度提供技术支持。【方法】采用分离技术,以铭贤169小麦苗期叶片为材料,使用不同浓度(1,2,5,10 mmol/L)的肌醇六磷酸钠,结合二水氯化钙在不同温度(4,20,37℃)去除小麦叶片蛋白中的Rubi-sco酶,筛选去除小麦叶片蛋白Rubisco酶的最佳条件,并采用一维凝胶电泳(1-DE)、Western blot方法检测去除Rubisco酶的有效性,用二维凝胶电泳(2-DE)评估该方法对样品在二维凝胶上分辨率的影响。【结果】在37℃条件下,采用10 mmol/L肌醇...
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
李冰峰 权静 顾浩 王益明
为探讨均四甲苯的微生物处理方法,研究了本实验室筛选的蛋白酶生产菌J6对均四甲苯的降解特性。将J6接入装有50mL发酵液的250mL摇瓶中,发酵液中均四甲苯含量为50g.L-1。将摇瓶置于30℃,180r.min-1的摇床中培养,分析均四甲苯对微生物生长进程的影响,以及微生物生长过程中均四甲苯的含量变化。结果表明:该菌在含有均四甲苯的培养基中能稳定生长,且比不含均四甲苯的培养基具有更长时间的稳定生长期(在实验室条件下长达200h);对发酵液的分析表明,该菌在发酵11h后,发酵液中均四甲苯的含量迅速降至0.746g.L-1,24h内降解率达91.6%。可见,J6菌能有效降解均四甲苯,有望将该菌用于...
关键词：
均四甲苯 蛋白酶生产菌 废水处理 降解
[期刊] 中国农业科学
[作者]
李云河 张永军 吴孔明 原国辉 郭予元
采用ELISA 方法研究了Bt 棉花叶片中Cry1Ac 杀虫蛋白在不同环境条件空气介质中和土壤介质中的降解规律。结果表明,不同环境下Bt 杀虫蛋白降解趋势有明显差异。不同温湿度及光照条件的空气介质中,Bt 杀虫蛋白的降解速度一般在初期较快,经过短暂的缓慢降解阶段后进入相对稳定状态(含量50 ng·g-1左右)。高温低湿条件下,Bt 杀虫蛋白降解较快,达到稳定水平的时间短。Bt 杀虫蛋白在光照和非光照环境下的的降解动态没有显著性差异。自然条件下Cry1Ac 蛋白在土壤介质中初始阶段降解迅速,30 d 后降解了85%左右。随着冬季的到来,杀虫蛋白降解趋于缓慢。次年春天后,杀虫蛋白的降解加快,至4 ...
关键词：
转Bt基因棉花 Bt杀虫蛋白 降解动态
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
柯野 谢天涵 梅颖诗 张敏 黄湘 屈奇奇
从羽毛废弃物的排水沟污泥中采集污泥样品,通过富集培养、分离、纯化、发酵筛选,获得一株降解羽毛效果最佳的RM菌株.对该菌株进行形态特征、16S rDNA序列以及生理生化试验初步鉴定RM菌株为Deinococcus actinosclerus.该菌株在4%羽毛含量条件下,培养7 d后对羽毛的降解率高达60%,且羽毛水解产物含有多种氨基酸,如丝氨酸、天冬氨酸.RM菌株产生的胞外蛋白酶以丝氨酸蛋白酶为主,也含有天冬氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶.粗酶液最适反应温度为45℃,最适pH为10.0;金属离子Cu~(2+)、Mg~(2+)能够提高蛋白酶活性,而Ca~(2+)、Ni~(2+)、Zn~(2+)及蛋白酶抑制剂苯甲基磺酰氟、乙二胺四乙酸、亮抑蛋白酶肽对酶活性有抑制作用.通过以上结果可知,RM菌株对羽毛的高效降解具有较高的潜在应用价值.
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
徐杏连 姜微波 林琳
利用凝胶电泳技术分析芥菜叶片组织蛋白酶活性,结果显示:采后芥菜叶片中含有4个较强的蛋白酶活性条带(A、B、C、D),其中蛋白酶D的活性最强,A、C次之,B的活性在贮藏2~6 d的叶片中才能观测到。蛋白酶D的活性占总蛋白降解活性的50%以上,其最适反应温度为50~60℃,在pH 6~10的条件下均有很强的活性。
关键词：
芥菜叶片 衰老 蛋白酶 凝胶电泳
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
芮琪 张列峰 徐朗莱
研究了小麦叶片内1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(Rub isco,EC 4.1.1.39)大亚基(LSU)由53 000裂解为50 000的反应。结果显示,成熟叶片的粗提液在pH 5.5的条件下反应后能检测到50 000的裂解产物,而暗诱导衰老叶片的粗提液在pH 7.5的条件下也能发现LSU的这一降解。分别从成熟叶片和衰老叶片中提取叶绿体,以其裂解液为反应体系研究LSU由53 000裂解为50 000这步反应的细胞器定位。结果显示,衰老叶片中的叶绿体裂解液在pH 7.5时反应1 h后能检测到50 000降解产物,而成熟叶片叶绿体裂解液在pH 5.5和pH 7.5的条件下反应后均未检测到LS...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
王晓媛 陈晨 赵江哲 芮琪 张列峰 汪瑾 徐朗莱
采用30%~50%饱和度的硫酸铵沉淀、凝胶层析脱盐及聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳,再通过直接切胶后用回收槽电洗脱回收的方法,从暗诱导衰老小麦叶片中分离得到了1种耐热的蛋白水解酶。该酶具有良好的热稳定性,且表现出相当宽的pH稳定范围。该酶的最适温度为50℃,最适pH为8。分离得到的酶液在0~60℃处理1 h后,酶活性无明显变化,70℃处理1 h后仍有部分活性。酸性蛋白酶抑制剂、金属蛋白酶抑制剂和半胱氨酸蛋白酶抑制剂都不能抑制该蛋白水解酶的活性,但丝氨酸蛋白酶抑制剂能部分抑制该酶的活性。
[期刊] 华北农学报
[作者]
王亚娟 王长有 刘新伦 张宏 吉万全
为了发掘蕴藏于人工合成小麦中的优异种质资源,以138份人工合成小麦为材料,对其农艺性状、白粉病抗性、条锈病抗性和高分子量麦谷蛋白亚基进行了研究。根据农艺性状的鉴定结果,筛选出千粒重≥50 g、穗长≥12cm、穗粒数≥40粒和株高≤80 cm的种质分别为87份、24份、26份和19份。根据抗病性鉴定结果,筛选出抗白粉病种质27份,占总数的19.5%,其中免疫、高抗和中抗种质分别为21份、2份和4份;筛选出抗条锈病种质55份,占总数的39.9%,其中免疫、高抗和中抗材料分别为28份、12份和15份;其中10份人工合成兼抗白粉病和条锈病。SDS-PAGE分析表明,在Glu-A1位点上存在5种变异类型...
[期刊] 华北农学报
[作者]
张艳敏 郭北海 温之雨 蒋春志 李辉
对通过辐射诱变获得的 32 3个无性系进行了SDS PAGE电泳分析 ,结果表明 ,小麦储藏蛋白变异几率随愈伤辐射剂量的增强而增加 ,但是随辐射剂量的增加 ,愈伤存活率、绿苗再生率也随之剧烈降低。同时分析了麦谷蛋白变异类型及其与植株形态变异的关系 ,提出了小麦幼胚愈伤组织辐射诱变的适宜剂量
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
李立群 李学军 王辉 王成社
对2002年国家黄淮南片区试参试小麦品系的蛋白质、湿面筋、沉降值和稳定时间等品质性状进行了测定,并运用SDS-PAGE分析了参试品系的高分子量(HMW)麦谷蛋白亚基组成及其与品质性状的关系。结果表明,在26个参试品系中,仅内乡188、郑农16达到强筋小麦标准;5+10亚基频率有所提高(53.8%),但具5+10亚基的品种间品质具有高度不稳定性,在品质改良中仅靠转育5+10亚基是不够的,要注重亚基组合的选育,其中以1,7+8,5+10和1,7+9,5+10亚基组合对品质的贡献最大,以14+15,5+10亚基组合对品质的贡献最小。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
孙学永 马传喜 王维 司红起 冯春
麦谷蛋白亚基组成类型是决定小麦加工品质的重要内在因素,改进小麦品种的亚基构成已成为品质育种的重要依据之一,因而鉴定优质亚基的类型对品质育种具有重要的意义。本研究采用郑麦9023/安农9267、皖麦19/安农9267/皖麦19、#445/陕225//安农91168/繁3/皖麦19的F5代株系,烟农19/安农9914、烟农19/安农9916的F3代株系,烟农19/安农9914的F4株系组成9个群体,共1 562个株系,分别检测HMW-GS、LMW-GS的组成,测定了和面图参数和SDS沉降值,分析了麦谷蛋白亚基等位基因对品质性状的影响。结果表明,在Glu-A1位点,1亚基的SDS沉降值显著高于N亚基...
关键词：
普通小麦 麦谷蛋白等位基因亚基 面筋品质
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
颜品勋 冯仰廉 莫放 杨雅芳
用纤维素酶－胃蛋白酶法测定了苜蓿干草、红三叶草、豆腐渣、啤酒糟、高粱青贮、羊草、雀麦草、羊茅的蛋白质降解率（％）分别为88．28，78．83，79．11，75．87，74．26，59．37，82．16和84．90。与瘤胃尼龙袋法测定值（Y）的回归关系为Y＝－34．27＋1．29X（r＝0．72，P＜0．05）。纤维素酶－胃蛋白酶法的培养条件为：40℃水浴培养，纤维素酶最适酶量为75mg（pH4．5，柠檬酸盐缓冲液），胃蛋白酶用量为160IU（pH1．4的KCl－HCl缓冲液）。
[期刊] 华北农学报
[作者]
闫旭东 卢少源 李宗智
利用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和改良的ＡＰＡＧＥ方法分析了１１２４份不同来源普通小麦材料的高分子量麦谷蛋白亚基和麦醇溶蛋白谱带的组成。根据多元线性回归分析筛选出ｇｌｉ４２．３，６２．７，３９．６（２），１１．４，２３．０，ｇｌｕ５＋１０等蛋白谱带对以沉降值为代表的烘烤品质起增效作用。Ｇｌｉ１，Ｇｌｉ２和Ｇｌｕ１三位点对烘烤品质以加性效应为主。品种间品质性状变异的２８％～４３％由两种蛋白组份的差异所决定，而一种蛋白组份只能决定１２．３％～３１．０％。研究结果表明，在后代选育中要立足于优中选优，避免非优质谱带组合的出现。按高效谱带做第一次分类效果最好。此外对两项生化技术在品质育种中的应用进行了讨论。
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