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[期刊] 华北农学报
[作者]
邓培渊 袁伟 李玉华 王林青 李长看
为了研究触角结合蛋白（ＡｎｔｅｎｎＡｌ ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎｓ，Ａｂｐｓ）的生理功能，利用ｒｔ－ｐＣｒ方法克隆了小菜蛾ｐｘｙｌ Ａｂｐ基因，并在大肠杆菌中表达，纯化的重组蛋白通过荧光竞争结合试验测定其与２９种化合物的结合特性，并运用Ａｕｔｏ ｄｏＣｋ ４．２进行ｐｘｙｌ Ａｂｐ蛋白和化合物的分子对接。结果表明，ｐｘｙｌ Ａｂｐ与异硫氰酸丙烯酯、己醛、己烷、２－己酮、吲哚和β－紫罗兰酮结合，解离常数分别为０．９１，１．８１，１．１７，２．７１，２．７４，１４．９５μｍｏｌ／ｌ；分子对接显示，ｔｙｒ１００与异硫氰酸丙烯酯形成１个氢键。说明ｐｘｙｌ Ａｂｐ参与了小菜蛾识别十字花科蔬菜和虫害．．．
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
钟国华 李苗孟 胡美英 罗倩 胡黎明
应用RT-PCR扩增结合RACE技术克隆获得斜纹夜蛾触角普通气味结合蛋白2(GOBP2)基因Slit-GOBP2全序列。SlitGOBP2的阅读框全长489bp,编码162个氨基酸残基,预测分子质量和等电点分别为18.16ku和5.43。cDNA和氨基酸序列GenBank登录号分别为EF159979和ABM54824。SlitGOBP2氨基酸序列含6个保守的半胱氨酸位点,具有GOBP2的典型特征,与16种鳞翅目昆虫GOBP2同源性为94%～75%;编码蛋白呈酸性,整个分子呈亲水性,在第40～60位和100位以后的氨基酸表现亲脂性,蛋白质二级结构主要由α螺旋构成。氨基酸序列系统进化树分析表明,S...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
周耀振 修伟明 董双林
采用RNA干扰技术,通过腹腔注射法将甜菜夜蛾信息素结合蛋白1(SexigPBP1)双链RNA导入雄蛾体内,48 h后定量PCR检测表明,SexigPBP1的mRNA表达量被敲减90%以上;同时,触角电位(EAG)测定结果表明,注射处理48 h后雄蛾对雌蛾性信息素主组分Z9,E12-14∶Ac的EAG反应降低了约60%,证明SexigPBP1在雄蛾对该组分的感受中起重要作用。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
侯雯 苗春丽 董双林
[目的]小菜蛾是十字花科植物专食性昆虫，以芥子油苷为重要味觉信号来识别寄主植物进行产卵，但小菜蛾对芥子油苷的感受机制缺乏研究。本研究旨在证实芥子油苷对小菜蛾雌蛾产卵的刺激作用，并进一步明确前足跗节和触角在芥子油苷感受中的作用，为深入研究芥子油苷的感受机制奠定基础。[方法]利用小罩笼法并以封口膜为产卵介质，通过测定小菜蛾在芥子油苷（粗提液）处理和对照封口膜间向芥子油苷的产卵偏好性（选择指数），确定芥子油苷对小菜蛾雌蛾产卵的刺激作用；分别以封口膜和植物叶片为产卵介质，通过比较小菜蛾3种不同处理（酸蚀前足跗节、切除触角、切除触角+酸蚀前足跗节），其产卵选择指数和对照雌蛾间的差异，确定前足跗节和触角在小菜蛾感受芥子油苷中的重要性。[结果]芥子油苷（粗提液）对小菜蛾产卵具有显著的刺激作用，且在测试浓度范围（0.01%-5%）内随浓度提高而增强。酸蚀前足跗节和去除触角均显著降低雌蛾对芥子油苷（粗提液）的产卵偏好性，但两种处理间无显著差异；当触角和前足跗节都去除后，产卵偏好性进一步显著降低，其中以植物叶片为产卵介质时选择指数由0.94降低到0.42，以封口膜为产卵介质时由0.59降低到近乎为零。[结论]芥子油苷显著影响小菜蛾雌蛾的产卵偏好性，其中前足跗节和触角发挥重要作用且两者的作用基本相当。
关键词：
小菜蛾 芥子油苷 前足跗节 触角 产卵
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
魏辉 田厚军 陈艺欣 杨广 占志雄 黄玉清
采用电生理方法测定小菜蛾雌、雄成虫对雌蛾性信息素(sex pheromone,SP)两种主要组分顺-11-十六碳烯醛(Z11-16:Ald)和顺-11-十六碳烯乙酸酯(Z11-16:Ac),以及性信息素与寄主植物5种挥发性物质混合物的触角电位反应.结果表明:当供试浓度为20.0 g·L-1时,雄蛾对Z11-16:Ald的EAG反应相对值显著高于Z11-16:Ac.将Z11-16:Ald和Z11-16:Ac按照质量比5∶5和7∶3进行混配,当供试浓度为20.0 g·L-1时,雄蛾对5∶5配比的EAG反应相对值显著高于7∶3配比.部分供试植物挥发性物质能增强小菜蛾对性信息素的EAG反应,但会因植物...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
任珍珍 刘晶晶 柳晓磊 陈永 李珣 胡美英
【目的】探索重叠延伸PCR法在昆虫化学感受蛋白基因点突变上的应用,研究半胱氨酸(Cys32)对小菜蛾(Plutella xylostella)化学感受蛋白1(PlxyCSP1)结合特性的影响。【方法】用计算机软件模拟PlxyCSP1上Cys32突变前后的蛋白三级结构以及与配体化合物的结合情况,确定点突变位点。根据扩增得到的PlxyCSP1序列设计并合成重叠引物,利用重叠延伸PCR法,将PlxyCSP1上的Cys32突变成色氨酸(Trp32),获得突变体PlxyCSP1-M。将突变后的基因与载体pET-32a(+)连接,转化大肠杆菌BL21(DE3)。【结果】分子对接图显示,配体可以顺利进入Pl...
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
陈伟军 尤燕春 仲帆 任娜娜 许贤美 谢苗
克隆和分析了2个小菜蛾的储存蛋白基因——Px AJSP-1和Px BJHSP-2.其中,Px AJSP-1属于芳基贮存蛋白,而Px BJHSP-2属于富甲硫氨酸储存蛋白.进化树分析表明,它们在同一目昆虫中相对保守.利用实时荧光定量PCR分析其表达模式,发现Px AJSP-1和Px BJHSP-2在4龄幼虫和蛹期高表达,且在脂肪体中的表达量远高于其他组织.
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
李晓梅 陈永 李珣 钟国华
利用RT-PCR和RACE技术,以小菜蛾(Plutella xylostella)3龄幼虫的cDNA为模板,克隆获得泛素延伸蛋白基因Px-ubi(GenBank No.FJ527489),核苷酸序列全长537 bp,其中开放阅读框全长387 bp,编码129个氨基酸残基,预测分子质量为16.7 ku,等电点为9.1,与已知真核生物泛素延伸蛋白的同源性为92%～98%。RT-PCR结果显示Px-ubi在小菜蛾不同生长发育时期均有表达,其中卵期、3龄期和预蛹期含量较高,而成虫期含量较低。同源建模显示,Px-ubi的3D结构主要由1个α螺旋、4个β折叠以及β转角和不规则卷曲组成,4个β折叠两两反向平...
关键词：
小菜蛾 泛素 基因 克隆 原核表达
[期刊] 中国农业科学
[作者]
李红亮 张林雅 庄树林 倪翠侠 韩宝瑜 商晗武
【目的】研究中华蜜蜂(Apis cerana cerana)体外重组普通气味结合蛋白AcerASP2与不同气味信息的结合功能和模式。【方法】通过诱导条件的优化和纯化,在获得的重组AcerASP2蛋白基础上,研究竞争性荧光探针1-NPN及不同结构气味信息与蛋白的相互作用关系,并通过同源建模和分子对接解析蛋白与气味信息的结合模式和机理。【结果】通过条件摸索获得了可溶性表达的重组中蜂ASP2蛋白,荧光光谱分析1-NPN与AcerASP2的解离常数K1-NPN为7.38μmol.L-1,结合位点数n为1.0321。在7种气味信息中,4-烯丙基藜芦醚亲和力最强,其IC50和解离常数KD分别达到7.09和...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
徐进 李怡萍 成卫宁 宋月芹 仵均祥 孙会忠 贾晖
【目的】研究甜菜夜蛾触角感器的种类、数量和分布等特征,为解释其生态学习性和对其进行电生理学等方面的研究提供基础资料。【方法】应用电子扫描显微镜,对甜菜夜蛾(Spodoptera exigua(Hübner))成虫触角上的化学感受器进行了观察和研究。【结果】成虫触角上存在着6种感器,即毛形感器、刺形感器、锥形感器、腔锥形感器、腔形感器和耳形感器,其中以毛形感器和耳形感器数目最多。刺形感器又分为长刺形(Ⅰ型)和短刺形(Ⅱ型)两种。甜菜夜蛾的雌成虫触角感器和雄成虫触角感器的种类不同,两性间感器的分布及形态特征也存在一定差异。【结论】甜菜夜蛾触角感器的种类比较多,分布具有一定的规律性。
关键词：
甜菜夜蛾 触角感器 形态特征 扫描电镜
[期刊] 中国农业科学
[作者]
修伟明 董双林 苗慧 穆兰芳
通过比较几种已发表夜蛾科昆虫的信息素结合蛋白(PBP)氨基酸序列,设计合成一对简并性引物,利用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术从甜菜夜蛾(SpodopteraexiguaHübner)雄虫触角扩增得到2个分别为275bp和281bp的cDNA片段SexigPBP1和SexigPBP2,其分别由92个氨基酸残基和94个氨基酸残基组成。通过在GenBank中进行序列的同源性比较,表明这2个序列与已知几种昆虫的PBP氨基酸序列具较高同源性。
关键词：
甜菜夜蛾 信息素结合蛋白基因 序列分析
[期刊] 西南农业学报
[作者]
罗海玲 康红卫 马俊 琚茜茜 张力 史卫东
【目的】分析菜心-小菜蛾互作的生理和蛋白组变化规律,为明确菜心对小菜蛾取食的抗虫信号途径及防御机理提供理论依据。【方法】以四九菜心四叶幼苗为材料,测定菜心叶片接入小菜蛾24 h前后的碳水化合物代谢变化,并应用串联质量标签(tandem mass tag,TMT)标记联合高效液相色谱-质谱/质谱法(LCESI-MS/MS)技术鉴定菜心接入小菜蛾24 h前后的差异蛋白组变化。【结果】菜心接虫后较对照可溶性淀粉积累减少,可溶性蛋白及可溶性糖(包括蔗糖、还原糖)含量增加;本研究共筛选出差异表达蛋白430个(接虫后
[期刊] 林业科学
[作者]
王凯利 傅鹰 周明兵
【目的】SBP家族基因编码的一类转录因子可识别并结合MADS-box基因SQUAMOSA(SQUA)的启动子,参与植物营养生长和生殖生长的调控。系统地鉴定和分析毛竹SBP家族基因,有助于理解SBP家族基因在毛竹营养生长和生殖生长过程中的调控作用,为毛竹SBP家族基因功能分析奠定基础。【方法】利用已公布的毛竹基因组数据,通过生物信息学方法鉴定毛竹SBP家族基因。利用MEGA 6.0、DNAMAN、psRNATarget等生物信息学软件获得毛竹SBP家族基因基本生物学信息。通过实时荧光定量PCR分析SBP家族
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
杨芳 贺鹏 董双林
信息素结合蛋白(PBP)是大量存在于昆虫触角感器中的一类小分子蛋白,它特异性结合并运输性信息素组分到神经树突膜上的气味受体。通过设计简并引物并利用RT-PCR技术,从斜纹夜蛾雄虫触角扩增到1个长171bp的预期cDNA片段,测序后经比对表明是PBP3基因片段,将该基因命名为SlitPBP3。利用RACE技术进一步得到SlitPBP3的cDNA全长序列(GenBank登录号:GU082321),长568bp,编码164个氨基酸,具有PBP的典型序列特征。对基因组DNA的研究显示,该基因由3个外显子和2个内含子构成。2个内含子的位置和斜纹夜蛾的另2个PBP基因相同,具有保守性;其长度分别为124b...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
计成 贺高峰 丁丽敏
通过分析北京红鸡的胴体、羽毛、鸡蛋的氨基酸组成，估计出其维持的氨基酸组成；并采用数学模型方法对不同组份进行加权，在可消化氨基酸的基础上建立了几个不同的氨基酸理想比例模式。经过与NRC模式比较，对北京红鸡理想蛋白模式进行了初步探索。假定模式中赖氨酸为100，则主要的必需氨基酸比例模式为：蛋：胱色：苏：精：异亮：亮：赖=33：23：14：53：100：59：93：100。
关键词：
产蛋种鸡 数学模型 理想蛋白模式
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