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[期刊] 西南农业学报
[作者]
王帅 贾琦珍 陈根元 王连群 张玲
研究小花棘豆中毒对家兔睾丸生精细胞凋亡的影响,进一步探讨小花棘豆的中毒机理。将24只雄性家兔随机分为对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,试验组分别按照Ⅰ组15%(苦马豆素含量30 mg/kg)、Ⅱ组30%(苦马豆素含量60 mg/kg)、Ⅲ组45%(苦马豆素含量90 mg/kg)的比例添加小花棘豆,对照组仅饲喂苜蓿干草,试验期70 d。分别于攻毒后第14、35、70天每次每组随机采集2只家兔的睾丸,通过TUNEL法定位,Hoechst 33258荧光染色细胞核,流式细胞仪测定细胞凋亡率和细胞周期。从第35天开始,试
[期刊] 西南农业学报
[作者]
王帅 陈根元 张玲 吴书奇 胡建军 马春晖
将24只家兔随机分为对照组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组,3个试验组分别按照每千克体重5、10、20 g的剂量饲喂小花棘豆,至家兔出现死亡为止。试验前和试验期间每7 d取血,检测家兔血常规指标的变化。结果显示,经过70 d的试验,与正常对照相比,试验组家兔血液中嗜酸性粒细胞数(EOS)、嗜碱性粒细胞数(BASO)、红细胞数(RBC)、红细胞压积(HCT)、血红蛋白(HGB)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、血小板数量(PLT)、大型血小板比率(P-LCR)、血小板平均体积(MPV)、血小板压积(PCT)含量显著下降;白细胞数(WBC)、淋巴细胞数(LYM)和嗜中性粒细胞数(NEU)在试验初...
关键词：
小花棘豆 中毒 家兔 血常规
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
王帅 陈根元 贾琦珍 张玲 马春晖
【目的】探讨小花棘豆中毒对家兔丘脑－垂体－性腺轴α－甘露糖苷酶（ＡＭＡ）的影响，揭示小花棘豆的毒性作用机理。【方法】将２４只家兔随机分为对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组，对照组饲喂青干草，试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别饲喂添加１５％，３０％和４５％小花棘豆全草的混合饲料（其苦马豆素含量分别为３０，６０和９０Ｍｇ／ｋｇ），分别于攻毒后第１４，３５和７０天时每组随机采集２只家兔的丘脑、垂体和性腺，检测ＡＭＡ在家兔丘脑－垂体－性腺轴中的分布、活性及其基因ＭＲＮＡ的表达量。【结果】ＡＭＡ在家兔丘脑、垂体和性腺中均有分布，小花棘豆中毒可导致家兔丘脑－垂体－性腺轴ＡＭＡ活性和分布明显下降。试验组及对照组家兔丘脑－垂体－性腺．．．
[期刊] 西南农业学报
[作者]
王帅 陈根元 贾琦珍 邓利 张玲
为了探讨小花棘豆对家兔卵巢α－甘露糖苷酶（ＡＭＡ）的影响，进一步揭示小花棘豆的毒性作用机理。将２４只雌性家兔随机分为４组，即对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组。将小花棘豆全草粉碎后，按Ⅰ组添加１５％（含苦马豆素３０ Ｍｇ／ｋｇ）、Ⅱ组添加３０％（含苦马豆素６０ Ｍｇ／ｋｇ）、Ⅲ组添加４５％（含苦马豆素９０ Ｍｇ／ｋｇ）的比例制作混合饲料，饲喂至典型临床症状出现为止。攻毒后第１４、３５、７０天每次每组随机采集２只家兔的卵巢，检测家兔卵巢ＡＭＡ活性及表达的变化。试验组及对照组家兔卵巢高尔基体α－甘露糖苷酶Ⅱ（ＡＭＡ１）和溶酶体α－甘露糖苷酶（ＡＭＡ２）均有表达，但各试验组表达转录水平与对照组差异显著，试验Ⅰ．．．
[期刊] 华北农学报
[作者]
尹荣焕 白文林 方和春 王健民 潘树德 刘宝山 刘金玲 姜卓
按毒理学方法给小鼠灌喂不同剂量喹乙醇,采用原位末端标记法检测该药物饲料添加剂对生精细胞凋亡作用的影响。结果表明:各试验组小鼠生精细胞凋亡指数较正常组和阴性对照组均有所增加,在不同时间,高剂量组均表现差异显著(p<0.05)或极显著(p
关键词：
喹乙醇 生精细胞 凋亡
[期刊] 华北农学报
[作者]
王帅 贾琦珍 张玲 瞿胜 陈根元
为探讨小花棘豆中毒对雄性大鼠下丘脑－垂体－睾丸轴α－甘露糖苷酶（ＡＭＡ）的影响，进一步揭示小花棘豆的毒性作用机理。将１４４只雄性大鼠随机分为４组，即对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组。将小花棘豆全草粉碎后，按Ⅰ组添加１５％（含苦马豆素３０ Ｍｇ／ｋｇ）、Ⅱ组添加３０％（含苦马豆素６０ Ｍｇ／ｋｇ）、Ⅲ组添加４５％（含苦马豆素９０ Ｍｇ／ｋｇ）的比例制作混合饲料，饲喂至典型中毒症状出现为止。攻毒后每７ ｄ每组随机采集４只大鼠的下丘脑、垂体和睾丸，检测其ＡＭＡ活性及表达的变化。结果表明，试验组及对照组大鼠下丘脑－垂体－睾丸轴高尔基体α－甘露糖苷酶Ⅱ（ＡＭＡ１）和溶酶体α－甘露糖苷酶（ＡＭＡ２）均有表达，但各．．．
[期刊] 华北农学报
[作者]
王宪军 向华 张旭梅 任玉鹏 朱江江
旨在探究羊口疮病毒ORFV118蛋白对山羊睾丸支持细胞周期、凋亡以及诱导机体免疫应答相关的4种细胞因子(IL-1β、IL-6、IFN-γ和TNF-α)表达水平的影响。在ORFV118基因克隆基础上，成功构建真核表达载体pEGFP-ORFV118;将pEGFP-ORFV118转染山羊睾丸支持细胞，Western Blot鉴定ORFV118蛋白表达的正确性；流式细胞仪检测ORFV118基因对细胞周期及凋亡的影响；RT-qPCR检测细胞周期相关基因CDK2和P21、凋亡相关基因Bax、Bcl-2、Caspase3、Caspase7、P53和BCL2L11的mRNA的表达水平，并利用RT-qPCR和ELISA方法检测免疫相关的细胞因子表达的变化。结果显示，成功扩增ORFV118基因，全长为309 bp。ORFV118蛋白的表达阻滞了细胞的DNA合成期(S期),促进了DNA合成后期(G2/M期)且下调基因CDK2的mRNA表达水平；可抑制细胞的凋亡作用，且下调促凋亡基因Caspase3、Caspase7、SOCS2的mRNA表达水平；对细胞因子IL-1β和IFN-γ呈不同程度的抑制作用，而对IL-6和TNF-α呈促进作用。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
王霞 邬静
以原代分离培养仔猪睾丸支持细胞为模型,经含不同浓度(0、2.5、5、10、20、40、80、160μmol/L)乙酸棉酚或40μmol/L乙酸棉酚加800μmol/L的乙酰半胱氨酸(NAC)的培养基培养24 h后,检测细胞增殖率、细胞内活性氧(ROS)水平和丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性、培养基中乳酸脱氢酶(LDH)活性及细胞凋亡情况,研究棉酚对仔猪睾丸支持细胞的氧化应激及细胞凋亡的影响。结果显示:棉酚呈浓度依赖性抑制仔猪睾丸支持细胞增殖率,棉酚浓度大于等于10μmol/L时,细胞增殖率极显著降低;棉酚造成细胞内ROS水平显著升高、SOD活性显著降低、MDA含量升高及培养基中LDH活性升高;NAC显著抑制棉酚诱导的细胞内ROS水平升高、细胞增殖抑制及细胞凋亡。表明棉酚能诱导仔猪睾丸支持细胞凋亡,这可能与过量ROS生成而造成细胞氧化应激有关。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
贺亮 黄冬维 程广龙 罗超 杨永新 赵小伟 王小飞 齐元霞 赵辉玲 邓治邦
为研究褪黑激素对皖系长毛兔毛囊细胞凋亡的影响及相关机制,选择60只皖系长毛兔,随机均分成4组,1组不埋植褪黑激素(对照),另3组每只兔按25 mg(低剂量组)、40 mg(中剂量组)和55 mg(高剂量组)分别埋植褪黑激素,饲养70 d后,进行组织病理学观察和RNA的转录组高通量测序及q PCR表达分析。结果表明:通过组织切片观察,证实55 mg褪黑激素处理能有效抑制毛囊细胞凋亡,维持细胞正常形态;通过对高剂量组和对照组测序,得到25个差异表达基因,其中有14个基因上调,11个基因下调,涉及通路包括嗜T细胞病毒感染、坏死性凋亡、甲状腺癌、铁死亡、I型糖尿病和胰岛素信号通路,其中坏死性凋亡、铁死亡通路与长毛兔毛囊凋亡相关;选取4个与凋亡相关的差异表达基因进行荧光定量验证,得到新基因MSTRG.3561表达显著上调,SLC25A5表达下调,但差异无统计学意义。
[期刊] 水产学报
[作者]
庞敏 屈佩 高春蕾 王宗灵 张镱
通过MTT分析、光学显微镜观察、Hoechst33342染色质荧光染色、DNA琼脂糖凝胶电泳、罗丹明123染色及钙离子激光扫描显微镜检测等手段,分析了虾夷扇贝毒素(yessotoxin,YTX)对Hela细胞的毒性作用。通过实验发现,正常Hela细胞与不同浓度YTX共孵育24 h后,一定浓度的YTX能对Hela细胞产生毒性作用,使其发生明显凋亡特征,如形态变化、染色质凝缩、DNA片段化以及线粒体膜电位降低。此外,YTX还能造成Hela细胞内胞质钙离子升高。这种毒性作用可能是YTX通过对胞内钙离子浓度的影响进而诱导发生的。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
霍道坦 陶勇 王勇 权青 田宁宁 成志军 章孝荣
为研究猪卵母细胞发生早期卵巢上细胞的凋亡情况,制作妊娠33、40、46、54、61 d母猪胎儿卵巢的石蜡切片,并进行荧光染色。结果发现,母猪妊娠到33 d时,胎猪卵巢上即可见原始生殖细胞和卵原细胞的凋亡,随着妊娠时间的延长,凋亡也逐渐增加,妊娠33、40、46、54和61 d母猪胎儿卵巢上卵原细胞的凋亡率分别为3.13%、4.32%、5.50%、9.43%和11.10%,同时,颗粒细胞的凋亡率则分别为8.89%、12.45%、14.74%、17.96%和22.81%。结果说明,在猪胎儿卵母细胞发生早期,即开始发生了卵原细胞和颗粒细胞的凋亡,且有逐渐增加的趋势。
关键词：
胎儿 猪 卵巢 卵原细胞 凋亡
[期刊] 西南农业学报
[作者]
谭成明 房慧伶 胡庭俊
为探讨山豆根多糖对地塞米松诱导的小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞凋亡的影响,通过腹腔注射地塞米松建立小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞凋亡模型,并采用琼脂糖凝胶电泳、透射电子显微镜和流式细胞术进行观察和检测。结果表明,除空白对照组外,其余各组的琼脂糖凝胶电泳图均出现梯状条带,而且透射电子显微镜观察凋亡对照组和不同剂量山豆根多糖组均可见典型的凋亡特征,胸腺和脾脏淋巴细胞的胞核染色质凝聚呈半月形、C形及凋亡小体,可见巨噬细胞吞噬凋亡小体。流式细胞仪分析显示,不同剂量山豆根多糖组凋亡率与凋亡对照组凋亡率比较有显著性差异(P
关键词：
山豆根多糖 小鼠 淋巴细胞 细胞凋亡
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
赵金坤 梁宏伟 邹桂伟 王焕岭 李忠
【目的】通过磷脂结合蛋白Ｖ／碘化丙啶（Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ／Ｐｉ）流式细胞分析法和原位末端脱氧核苷酸转移酶标记（ＴＵｎｅＬ）法检测低氧胁迫下鲢肝、脑细胞的凋亡情况。【方法】将鲢分成对照组和低氧处理组，对照组正常饲养，低氧处理组用保鲜膜将水箱上口封住进行低氧处理，分别在鲢浮头期以及死亡期取其肝、脑组织，同时取对照组鲢肝、脑组织，采用Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ／Ｐｉ流式细胞分析法和ＴＵｎｅＬ法检测其细胞凋亡情况。【结果】Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ／Ｐｉ流式细胞仪分析结果表明，在鲢肝脏中细胞凋亡率依次是对照组８．８５％、低氧处理组浮头期２２．０６％、低氧处理组死亡期２２．９１％；脑中细胞凋亡率依次是对照组８．１８％、．．．
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
王磊 宿红艳 王媛 穆春华 赵志文
采用热激处理烟草愈伤组织诱导细胞凋亡的产生,通过对处理烟草基因组的DNA电泳分析,力求找出促进凋亡产生的最佳温度及时间,以期为深入研究逆境条件下植物细胞程序性死亡提供一理想模型.结果表明:在53℃下处理烟草细胞2.25 h后,再经25℃恢复培养10 h能观察到较清晰的DNA梯状条带,此时烟草细胞进入凋亡状态.
关键词：
细胞凋亡 烟草 温度 热激 DNA梯形带
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
李若楠 康瑞芬 沈丹 戴鹏远 唐倩 李春梅
[目的]本试验以猪空肠上皮细胞（IPEC-J2）为模型，探讨谷氨酰胺（Gln）对呕吐毒素（DON）诱导的IPEC-J2细胞凋亡和炎症的影响。[方法]通过MTT方法测定细胞活力来选择适宜的Gln浓度，以不添加Gln和DON的细胞为空白对照组，试验组分别为0.75 mmol·L~(-1) Gln组，2.0 μg·mL~(-1) DON组和2.0 μg·mL~(-1) DON+0.75 mmol·L~(-1) Gln组，处理24 h后测定各组细胞凋亡率、活性氧自由基（ROS）及细胞凋亡和炎症相关基因和蛋白的表达水平。[结果]与对照组相比，DON处理24 h显著升高细胞的凋亡比例和ROS含量(ROS荧光密度/细胞总数)（P<0.01）；与DON组相比，DON+Gln组显著降低细胞的凋亡比例和ROS含量（P<0.01）。与对照组相比，DON组上调了IPEC-J2细胞白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL–6）、环氧合酶2（COX–2）及肿瘤坏死因子α（TNF-α）炎症相关基因和Caspase-3及Caspase-8凋亡相关基因的表达水平；与DON组相比，DON+Gln组下调了IPEC-J2细胞IL-1β、COX–2、Caspase-3、Caspase-8、BAK和Bcl-2基因的表达水平。蛋白免疫荧光结果显示，与对照组相比，DON组上调IPEC-J2细胞Caspase-3，核转录因子κB（NF-κB）和磷酸化核转录因子κB（phospho-NF-κB）蛋白的表达，而添加Gln后（DON+Gln组）下调了相关蛋白的表达。[结论]Gln通过清除DON诱导的IPEC-J2细胞中过量的ROS和调节炎症和凋亡相关基因及蛋白的表达量来缓解由DON引起的肠道上皮细胞损伤。
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