研究草鱼鱼种通过不同参数条件下（分为工况一、工况二、工况三、工况四）的射流式鱼泵后分别恢复０、０．５、１、６、２４ｈ，和过泵前相比其血清皮质醇（ＣＯＲ）、血糖（ＧＬＵ）、乳酸脱氢酶（ＬＤｈ）、总胆固醇（ＴＣ）、谷草转氨酶（ＡＳＴ）、谷丙转氨酶（ＡＬＴ）、肌酐（ＣＲＥＡ）以及呼吸频率（ＲＥＳｐｉＲＡＴＯＲｙ ＲＡＴＥ）的变化情况，从应激和组织损伤的角度分析了该泵４个工况对试验草鱼的影响。结果发现，各工况试验草鱼血清ＣＯＲ、ＬＤｈ、ＡＳＴ、ＡＬＴ、ＣＲＥＡ以及呼吸频率均呈现先升高后降低的变化规律，各工况试验草鱼血糖呈现先降低后升高的趋势，而各工况试验草鱼血清ＴＣ基本无变化。此外，各工况均出现掉鳞的．．．

在基础饲料中添加0.5%的壳聚糖,采用3种不同的投喂方式(方式A:连续投喂基础饲料,对照组;方式B:连续投喂添加0.5%壳聚糖的饲料,连续组;方式C:先投喂0.5%壳聚糖饲料再投喂基础饲料且每15天间隔投喂,不连续组)饲喂初始体重(19.46±0.04)g的草鱼60d后,对草鱼进行饥饿胁迫处理[各投喂方式分为投喂组(feeding,F)和饥饿组(starvation,S)],以生长、一氧化氮(nitrogenoxide,NO)含量和溶菌酶(lysozyme,LSZ)活性为指标考察壳聚糖不同投喂方式对草鱼抗饥饿胁迫处理的能力。结果显示,(1)连续组和不连续组60d时草鱼增长率和增重率显著高于对照...

为探讨亚硝态氮胁迫对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)非特异性免疫性能的影响,将草鱼(0.15±0.05 g)分别暴露在0 mg/L、0.2 mg/L、0.4 mg/L、0.8 mg/L、1.0 mg/L、2.0 mg/L、4.0 mg/L和8.0 mg/L的亚硝态氮溶液中,分别在暴露后0 d、1 d、4 d、7 d测定草鱼体内补体C3和C4含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力、谷胱甘肽(GSH)含量以及γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)活性。结果表明,亚硝态氮胁迫对草鱼非特异性免疫性能产生了消极影响,其胁迫效应随着暴露浓度的不同而表现出不同的特性。当暴露浓度低于1.0...

在实验室条件下利用放养密度和放养时间构建组间差异,模拟养殖过程中草鱼所面临的拥挤胁迫。胁迫第7、14、30、60d后采样测量免疫指标。结果表明,高密度组(80g·L-1)的血清溶菌酶活性在胁迫后开始升高,并于14d时达峰值,以后逐渐下降,呈倒"U"型趋势。血清杀菌活性随放养密度的剧增而锐减(P<0.005)。白细胞比容在各组间未显示明显差异。而在30d和60d所测的高密度组草鱼的头肾巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数结果显示,高密度组低于对照组(P<0.05)。60d后用嗜水气单胞菌进行攻毒实验,高密度组死亡率高达75.0%,中密度组也达到了63.6%,而对照组只有25.0%。同期所测的脾脏脏器系数...

探究急性温度胁迫下缢蛏(Sinonovacula constricta)的氧化应激响应及生理代谢变化，评价缢蛏适应气候变化的能力。本实验将暂养净化后的缢蛏分为7组，分别在4℃、10℃、15℃、20℃（对照）、25℃、30℃、35℃的水浴下温度胁迫6h后，缓慢回复至对照组温度（20℃），检测各组缢蛏鳃及消化腺组织中SOD活性、POD活性、CAT活性、T-AOC能力和MDA含量、GSH含量、H_(2)O_(2)含量。结果表明：各指标在经过6h，4、10、30、35℃的胁迫后均发生显著变化（P<0.05）；相较低温胁迫，在高温胁迫下的SOD、POD、MDA、GSH等指标都有更显著的变化（P<0.05）；在24h温度回复后，4℃低温组和35℃高温组的各指标均不能恢复到对照组水平。研究表明，低温和高温胁迫均会引起缢蛏鳃和消化腺中抗氧化系统的失衡，导致活性氧的显著变化；SOD、CAT、POD和GSH在机体应对温度胁迫导致的氧化损伤中起到不同的作用；在极端环境温度变化超过缢蛏的耐受极限，达到致死温度时，机体的抗氧化调节系统失衡，会造成不可修复的氧化损伤，影响其正常的生理活动。

将草鱼肾细胞(CIK)在28℃条件下培养24h后,分别置于28(对照)、32、36和40℃的条件下暴露2h,测定不同温度处理组的细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、细胞周期的改变、细胞内多泛素化蛋白水平以及caspase-3和bcl-2的表达变化;置于28(对照)、32、36和40℃的条件下暴露12h,测定不同温度处理组的细胞活力。试验结果表明,热应激引起细胞活力显著下降,导致CIK细胞的LDH漏出率显著上升,多泛素化蛋白表达量显著增加,bcl-2的表达量显著下调和caspase-3的表达量显著上调,G0/G1期细胞显著减少。急性热应激可能会引起CIK的细胞膜通透性和蛋白质表达量的变化,从而诱导细...

分别评价了捕捞对草食性（草鱼）、杂食性（银鲫）和肉食性（青鱼）鲤科鱼类血液指标（血浆史质醇、葡萄糖和乳酸浓度）、肝糖原含量和两种肝脏糖酵解酶（己糖激酶和丙酮酸激酶）活性的影响。结果显示：草鱼、银鲫和青鱼捕捞后血浆史质醇、葡萄糖和乳酸浓度均显著升高；草鱼和青鱼捕捞后２ ｈ时肝糖原含量呈下降趋势，但银鲫捕捞前、后肝糖原含量未出现显著变化；捕捞前、后青鱼血糖浓度显著高于草鱼和银鲫。银鲫肝糖原含量显著高于草鱼和青鱼，其捕捞后血浆葡萄糖和乳酸浓度增加幅度较小，这意味着捕捞后银鲫应激反应强度相对较低。草鱼和银鲫捕捞后肝脏己糖激酶和丙酮酸激酶活性未发生显著变化，青鱼捕捞后２ ｈ己糖激酶活性显著下降，这意味着．．．

为研究黄芩多糖对高脂日粮草鱼(Ctenopharyngodon idella)生长、氧化损伤的影响，实验选取450尾健康草鱼随机分为5组，每组设置3个重复，分别投喂基础饲料(ND)、高脂饲料(HFD)以及补充了0.02%、0.05%、0.125%黄芩多糖的高脂饲料(HFD+SBP),养殖草鱼4周后，取样采集生长、肠道消化酶活性、血液生化、肝脏抗氧化以及肝脏组织病理数据。结果显示：在生长方面，黄芩多糖能抑制脂肪酶活性，显著增强α-淀粉酶和胰蛋白酶活性；显著降低血液总胆固醇(TCHO)和低密度脂蛋白(LDL)水平；从而在一定程度上改善高脂引起的肝体比(HSI)、饲料系数(FCR)升高以及增重率(WGR)降低。在氧化损伤方面，黄芩多糖能提高肝脏谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性，显著降低肝脏丙二醛(MDA)含量；从而缓解了高脂诱导的脂肪变性等肝脏损伤，显著降低了血浆谷丙转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果表明，长期摄入高脂饲料会导致草鱼生长性能下降，引起肝脏氧化损伤；添加黄芩多糖能缓解高脂日粮对草鱼生长、健康造成的不利影响，最适添加量为0.05%。

泛素-蛋白酶体系统(theubiquitin-proteasomesystem,UPS)是细胞内调节蛋白质代谢的重要系统。在水温(17.0±0.5)℃下,将草鱼(Ctenopharyngodon idellus)暴露于100 kg/m2的养殖密度条件进行急性拥挤胁迫。在胁迫0 h、1 h、6 h、12 h、24 h和48 h以及取消胁迫后(养殖密度10 kg/m2)的6 h和168 h采集血清和背部肌肉样品,检测血清皮质醇水平、肌肉质构特性以及nrf2、hsp70和UPS相关基因表达,并定量测定了肌肉组织泛素化蛋白水平。结果表明,拥挤胁迫导致血清皮质醇含量显著上升,肌肉硬度和凝聚性显著性下降,以上各指标在取消胁迫后168 h恢复到对照水平,弹性、胶黏性、咀嚼性和回复性在恢复168h时反而高于对照组水平; hsp70和nrf2的表达量在胁迫48 h时显著高于对照组,后期恢复到对照水平;肌肉ub、psma2、psmc1、mafbx和chip的mRNA表达量在胁迫过程中显著性上升,胁迫后恢复168 h,还是表现出较高的表达量;处理组泛素化蛋白水平在胁迫6 h和12 h时显著升高,在恢复168 h时显著降低。研究表明,急性拥挤胁迫使草鱼产生明显的应激反应,对肌肉质构特性产生了显著性影响,同时提高了肌肉UPS的活性。经过168h的恢复,鱼体逐渐恢复到正常生理水平,但机体UPS活性仍呈现出被激活状态。急性拥挤胁迫对草鱼生理功能和肌肉质构特性的有害影响是可逆的,建议恢复时间大于168 h以帮助鱼体重新建立UPS的稳态。

探讨了低盐度胁迫对点带石斑鱼幼鱼消化酶、抗应激酶及幼鱼存活率影响。实验设计了28.23、22.56、17.57、12.67和7.71等5个盐度梯度,实验鱼共40尾(体重20±2.32g),先放入盐度为28.23的水体中驯化10d,然后按以上梯度逐级淡化,在每个盐度梯度维持3d后取样,测定消化酶和抗应激酶等指标,并观察其活动和存活状况。结果表明,胃和肠的蛋白酶、淀粉酶活力随盐度梯度的下降显著降低(P<0.05);肝脏、肌肉和肾脏的SOD活力随盐度梯度下降呈上升趋势,肝脏、肌肉和肾脏的CAT和GSH-Px活力随盐度梯度下降呈降低趋势;鱼的活动能力从盐度梯度为17.57时开始下降,12.67时即出现...

实验选取平均体质量(31.86±1.47)g的草鱼,随机分为2个实验组,对照组(CG)和饥饿组(SG),每组3个平行,饥饿处理15、30、45和60 d,测定饥饿对鱼体的生长、肌肉生化组成、血液生化指标以及蛋白质代谢的影响。结果表明:饥饿组肥满度、脏体比、肝体比显著低于对照组。随着饥饿时间的延长,草鱼肌肉中的水分含量逐渐增加,脂肪和蛋白质含量呈现降低趋势,脂肪含量在4个时期没有明显的差异(P>0.05),水分和蛋白质含量分别呈现差异性增加和降低的趋势。血清总蛋白在饥饿15 d时与对照组没有明显的差异(P>0.05),其后3个时期对照组显著高于饥饿组(P<0.05),但饥饿组后3个时期趋于稳定。...

为了阐明草鱼呼肠孤病毒（grass carp reovirus， GCRV）的感染机制，实验深入探究VP56（是II型和III型（GCRV-II/III）特有的纤维蛋白）与宿主细胞蛋白的相互作用。实验首先使用免疫共沉淀（co-immunoprecipitation， co-IP），发现VP56与细胞内定位于内质网的分子伴侣蛋白葡萄糖调节蛋白78（glucose regulated protein 78 ku， GRP78）发生相互作用。而后，VP56与GRP78的互作通过基于远红色荧光蛋白mNeptune的双分子荧光互补系统（bimolecular fluorescence complementation， BiFC）得到验证。在VP56稳定表达的草鱼肾细胞系（C. idella kidney， CIK）中，相比于稳定表达空载质粒的CIK细胞，内质网形态发生巨大变化，产生肿胀、扩张、脱粒等现象，说明VP56激活内质网应激。通过对内质网应激下游转录因子的mRNA水平检测，发现VP56激活活化转录因子6（activating transcription factor 6， ATF6）介导的信号转导途径，激活非折叠蛋白反应。结果表明，GCRV-II感染过程中，破坏了细胞稳态，激活内质网应激。本研究为GCRV感染机制和抗GCRV病毒研究提供了新的思路，揭示了一种新的病毒逃逸机制，有助于淡水养殖产业中草鱼出血病的防控。

为探讨不同流速对草鱼幼鱼甲状腺激素代谢的影响,本试验以草鱼(Ctenopharyngodon idellus)幼鱼为对象,设置0、0.5、1和1.5 bl/s四个流速对其进行运动训练10周,训练结束后测定了鱼体血清皮质醇、葡萄糖、甲状腺激素(THs)和促甲状腺激素(TSH)含量,及肝脏脱碘酶(ID1、ID2、ID3)含量和甲状腺激素代谢相关基因的表达水平。结果显示:流速提高草鱼幼鱼的生长速度,未显著改变血清皮质醇和葡萄糖的含量,但显著降低甲状腺素(T4)和三碘甲腺原氨酸(T3)含量,显著升高TSH和脱碘酶(ID1、ID2)含量及甲状腺激素代谢相关基因(ttr、tr-α和tr-β)表达水平。结果表明,不同流速的运动训练影响草鱼幼鱼体内THs的合成、转运和代谢各过程,促进T3和T4的转化,进而改变甲状腺激素代谢水平,并促进鱼体生长。

【目的】磷是植物生长发育所必需的大量营养元素,研究无机磷酸盐(inorganic phosphate,Pi)胁迫下羊草的响应,筛选不同浓度Pi胁迫下的内参基因,并分析Pi响应相关基因的表达,为羊草Pi胁迫响应的分子机制研究提供基础数据。【方法】以羊草幼苗为材料,进行不同浓度Pi处理培养,对羊草的株高和根长进行检测,利用钒钼黄比色法检测羊草植株中Pi的含量。根据羊草转录组数据选取7个候选内参基因,从NCBI核酸序列数据库选取1个候选内参基因,对羊草不同处理材料进行总RNA提取和cDNA合成,利用qRT-PCR对候选内参基因的表达进行检测,并通过geNorm、NormFinder和Bestkeeper软件对其稳定性进行评估。根据筛选获得的较稳定内参基因,对Pi响应基因的qRT-PCR检测数据进行相对定量分析。【结果】表型观测结果显示,无论是低Pi还是高Pi胁迫都使得羊草的生长减缓;株高对低Pi或缺Pi胁迫较为敏感,根长对高Pi胁迫较为敏感;并随着处理浓度的增加羊草中Pi的含量也增加。qRT-PCR溶解曲线分析显示8个候选内参基因均具有单一的溶解峰,基因表达谱分析表明8个候选内参基因的CT值范围是17.16—26.61,其中,LcGAPDH的表达丰度最高为17.16—20.22,Lc18SrRNA的表达丰度最低为23.28—26.61,CT值变异系数最小的为LcARPT(2.09%),最大的为LcTUA(6.8%)。综合geNorm、NormFinder和Bestkeeper稳定性排名,通过计算几何平均数,获得8个候选内参基因综合稳定性排名,其中排名靠前的3个基因分别为Lc18SrRNA、LcCAP和LcEF1α,排名最后的2个基因为LcTUA和LcTUB。分别以Lc18SrRNA、LcCAP和LcEF1α作为内参基因,qRT-PCR相对定量表达分析结果显示,与对照相比,LcPHO1-2的表达受低Pi或者缺Pi诱导;LcPAP2的表达受高Pi诱导;而LcPAP27的表达同时受低Pi和高Pi下调。【结论】低Pi和高Pi胁迫均使羊草生长受阻,羊草地上组织与地下组织对Pi胁迫响应的模式不同。筛选出3个表达较为稳定的内参基因Lc18SrRNA、LcCAP和LcEF1α。LcPHO1-2和LcPAP2分别参与了羊草对低Pi和高Pi的应答响应,LcPAP27同时参与了羊草对低Pi和高Pi的响应进程。