搜索文献-EPS

年份: 2024(3109); 2023(4476); 2022(3754); 2021(3372); 2020(2880); 2019(6494); 2018(6354); 2017(10936); 2016(6511); 2015(7370); 2014(7270); 2013(7118); 2012(6856); 2011(6352); 2010(6435); 2009(5581); 2008(5993); 2007(5300); 2006(4812); 2005(4197)

作者: 王(24045); 李(20301); 张(20210); 刘(19126); 陈(13087); 杨(9765); 晓(9153); 赵(7836); 周(7696); 华(7328); 文(7042); 林(6920); 吴(6910); 志(6885); 明(6582); 丽(6293); 伟(6222); 徐(5974); 孙(5963); 黄(5950); 玉(5406); 平(5260); 军(5056); 建(4848); 朱(4754); 郭(4640); 红(4480); 胡(4421); 春(4369); 云(4348)

学科: 济(21537); 经济(21502); 管理(13458); 业(13182); 学(11381); 企(10674); 企业(10674); 方法(8420); 数学(6628); 数学方法(6432); 农(6389); 中国(6032); 业经(5379); 财(5231); 理论(4847); 地方(4792); 农业(4482); 制(4399); 和(4052); 环境(4021); 银(3650); 融(3620); 金融(3618); 银行(3613); 行(3460); 水产(3449); 税(3434); 务(3351); 财务(3332); 财务管理(3326)

机构: 大学(99603); 学院(97809); 研究(42398); 科学(33337); 济(30131); 中国(29812); 经济(29325); 管理(29240); 农(28986); 理学(25385); 所(25228); 理学院(24869); 管理学(23966); 管理学院(23812); 研究所(23744); 农业(23610); 京(22571); 业大(20952); 中心(18302); 室(16802); 江(16251); 实验(15722); 院(15353); 实验室(15202); 范(15005); 省(14935); 财(14861); 农业大学(14846); 师范(14629); 重点(14392)

基金: 项目(70870); 科学(54567); 基金(51460); 家(49450); 国家(49095); 研究(43216); 科学基金(39480); 自然(29746); 自然科(29027); 自然科学(29015); 省(28698); 自然科学基金(28475); 基金项目(27259); 划(25899); 社会(24252); 社会科(22793); 社会科学(22782); 资助(20704); 教育(20033); 重点(17733); 计划(17654); 科技(16251); 编号(15754); 发(15583); 科研(14908); 创(14560); 部(14434); 专项(13934); 创新(13793); 成果(13590)

期刊: 济(33695); 经济(33695); 学报(28609); 农(26248); 研究(25327); 科学(23174); 中国(21778); 大学(19037); 学学(18317); 农业(17745); 教育(10912); 财(10686); 管理(10465); 业(9608); 业大(8735); 版(7507); 农业大学(7345); 技术(6847); 融(6481); 金融(6481); 中国农业(5779); 资源(5692); 林业(5686); 科技(5670); 自然(5509); 经济研究(5066); 财经(4952); 业经(4660); 自然科(4327); 自然科学(4327)

全选本页取消本页

共检索到145257条记录

发布时间倒序

发布时间倒序
相关度优先

文献计量分析

结果分析(前20)
结果分析(前50)
结果分析(前100)
结果分析(前200)
结果分析(前500)

对虾白斑综合征病毒vp28基因的表达及其与血细胞的结合

[期刊] 渔业科学进展 [作者] 陈文博谭珍一刘庆慧侯林黄倢

根据GenBank上WSSV囊膜蛋白基因vp28的序列,设计合成引物,PCR扩增得到vp28基因,成功构建重组表达载体pBAD/gⅡIA-VP28并转化大肠杆菌E.coli。用L-阿拉伯糖在37℃诱导重组基因工程菌,表达产物经SDS-PAGE和Western-blot检测,显示有与预期大小31kDa相符合的目的蛋白。荧光显微镜方法分析显示,表达的VP28可与克氏原螯虾血细胞结合。结果表明,在合适的培养条件下,构建的重组表达载体pBAD/gⅡIA-VP28不仅能够表达vp28基因,而且表达的VP28具有很高的抗原结合活性。

关键词：白斑综合症病毒 vp28 表达活性分析

对虾白斑综合征病毒囊膜蛋白VP28和VP26的毕赤酵母组成型分泌表达

[期刊] 渔业科学进展 [作者] 耿小雪王小霞周怡徐玮张文兵麦康森

近年来，重组ＶＰ２８和ＶＰ２６蛋白作为蛋白亚单位疫苗，在增强对虾抗白斑综合征病毒（ＷＳＳＶ）感染的过程中具有重要作用。本研究根据ＧｅｎＢａｎｋ中ＷＳＳＶ的基因序列设计引物，以ＷＳＳＶ粗提液为模板进行普通ＰＣＲ扩增，得到ＶＰ２８和ＶＰ２６基因，再用引物悬挂法将ｅＣｏＲⅠ和ＸＢａⅠ酶切位点分别添加到ＶＰ２８和ＶＰ２６基因的５端和３端。目的基因经双酶切后插入到表达载体ＰＧａＰＺαａ，转化ＴｏＰ１０大肠杆菌，经博莱霉素（ＺｅｏＣｉｎ）抗性筛选阳性重组酵母表达载体。ａＶＲⅡ酶切线性化之后，电击转化Ｘ－３３毕赤酵母感受态细胞，经ＺｅｏＣｉｎ抗性筛选得到阳性重组酵母。ＳＤＳ－ＰａＧｅ电泳分析重组酵母表．．．

关键词：白斑综合征病毒 VP28 VP26 重组表达毕赤酵母

白斑综合征病毒(WSSV)基因VP28原核表达与检测

[期刊] 上海海洋大学学报 [作者] 张正阳张春莉施定基贾晓会贾睿何培民

VP28是对虾白斑综合征病毒(White Spot Syndrome Virus,WSSV)的囊膜蛋白。将VP28基因序列密码子优化后合成,经限制性内切酶NdeⅠ、XhoⅠ酶切后,按正确的阅读框顺序插入到p ET-28a(+)表达载体上。重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经质粒双酶切、测序鉴定后成功地构建了VP28基因原核表达载体p ET-28a-VP28。转化菌经IPTG诱导,SDS-PAGE显示含有与预期大小一致的约30 ku蛋白带,主要以包涵体形式表达。采用Ni-IDA-Sepharose C

关键词：对虾白斑综合征病毒(WSSV) VP28 大肠杆菌鱼腥藻7120 定量免疫印迹

对虾白斑综合征病毒VP28酵母表面展示

[期刊] 渔业科学进展 [作者] 李新新刘庆慧张秀丽黄倢

以pYD1为载体,制备以酒精酵母为载体的基因工程免疫制剂。参照GenBank中对虾白斑综合征病毒VP28基因序列设计引物,PCR扩增得到预期长度的产物,双酶切插入用于酒精酵母表面展示的穿梭质粒载体pYD1,转化大肠杆菌TOP10,提取阳性质粒转化酒精酵母菌株EBY100,诱导表达后,用免疫荧光检测外源蛋白的表达。结果获得VP28酵母表面展示菌,测得最佳诱导时间为36～48h。以此展示酵母活细胞分设两个浓度组,腹腔注射螯虾,检测其毒性。结果表明,此重组酵母对螯虾是安全的,该研究为下一步对虾用活载体免疫制剂效果的研究奠定了基础。

关键词：对虾白斑综合征病毒 VP28 酵母表面展示安全性

白斑综合征病毒囊膜蛋白vp28基因在毕赤酵母中的表达

[期刊] 水产学报 [作者] 李方叶巧真何建国王莉真

A pair of primers was designed based on the vp28 gene and PCR was performed to amplify the gene from WSSV DNA. Inserting the DNA fragment to the yeast-E.coli shuffle vector pPICZ and the recombinant plasmid (pPICZVP28) that contains the target DNA fragment was obtained in the E.coli strain.The pPICZ...

关键词：白斑综合征病毒囊膜蛋白斑节对虾毕赤酵母

对虾白斑综合征病毒(WSSV)囊膜蛋白VP110部分重组表达及其与对虾鳃细胞膜蛋白结合分析

[期刊] 渔业科学进展 [作者] 张平李晨黄倢梁艳刘庆慧刘莉

将VP110基因的部分序列克隆到pET-28a载体中构建pET28a-vp110b重组质粒并进行原核表达,获得重组表达的蛋白rVP110-B;用rVP110-B注射凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei后,经WSSV感染,实验表明,该蛋白注射使凡纳滨对虾感染WSSV的半数死亡时间比对照组延长了20%。用表达纯化的该重组蛋白制备了兔抗rVP110-B多克隆抗体,该抗体用于凡纳滨对虾鳃细胞膜蛋白与rVP110-B的Far-western分析显示,凡纳滨对虾鳃细胞膜蛋白中除90 kDa左右的血蓝蛋白外,在41.7 kDa存在结合条带,经质谱分析表明这条鳃细胞膜蛋白是肌动蛋白。

关键词： WSSV VP110 原核表达凡纳滨对虾鳃细胞膜蛋白 Far-western

白斑综合征病毒与中国对虾血细胞膜的体外结合实验

[期刊] 水产学报 [作者] 林颖博战文斌邢婧唐小千刘宝良

筛选小分子受体配基或抗受体蛋白的单克隆抗体作为阻断剂,是阻断病毒感染的有效途径。通过差速离心法提取海捕中国对虾血细胞膜,分别利用Dot-Blot和ELISA技术,将血细胞膜包被于硝酸纤维素(NC)膜或酶标板,使地高辛(Digoxigenin,DIG)标记的对虾白斑综合征病毒(WSSV-DIG)与之4℃结合4h,并以碱性磷酸酶标记抗DIG抗体作为探针检测,实验结果皆为阳性,证明体外环境下WSSV能稳定地与血细胞膜结合。通过血细胞膜免疫Balb/c小鼠生产抗中国对虾血细胞多克隆抗体,以该多抗37℃孵育血细胞膜1h,然后使WSSV-DIG与血细胞膜结合并检测。在Dot-Blot实验中,阻断组发色明显...

关键词：白斑综合征病毒血细胞膜受体蛋白阻断剂

中国明对虾caspase2基因克隆及其在抗白斑综合征病毒中的表达分析

[期刊] 水产学报 [作者] 邓康裕史晓丽张莹雪孟宪红孔杰罗坤栾生

采用ＲＡＣＥ技术克隆获得中国明对虾ＣＡｓｐＡｓＥ２基因ＣＤＮＡ序列全长，并对该序列进行分析。结果显示，中国明对虾ＣＡｓｐＡｓＥ２基因全长为１５１７ｂｐ，开放阅读框长９２４ｂｐ，５＇非编码区长７８ｂｐ，３＇非编码区长５１５ｂｐ，命名为ＦＣＣＡｓｐ２。推测该基因编码３０７个氨基酸，预测分子量为３４．２１ｋｕ，理论等电点为７．６２。同源性和系统进化分析发现，ＦＣＣＡｓｐ２基因与凡纳滨对虾ＣＡｓｐＡｓＥ２和斑节对虾ＣＡｓｐＡｓＥ的相似性分别为８８％和８０％，与其他节肢动物ＣＡｓｐＡｓＥ家族基因聚为一类。荧光定量ＲＴ－ｐＣＲ结果显示，ＦＣＣＡｓｐ２基因在肝胰腺中的相对表达量最高，在肌肉中表达量．．．

关键词：中国明对虾 caspase2基因基因克隆组织表达 WSSV感染

对虾白斑综合征病毒囊膜蛋白VP110在中国明对虾鳃细胞中结合蛋白的鉴定与特性

[期刊] 中国水产科学 [作者] 赵建梅唐小千战文斌

为了鉴定对虾白斑病综合征病毒(WSSV)囊膜蛋白VP110在中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)鳃细胞中的结合蛋白,运用pET-32(a)+载体构建了1段含RGD模体的截短VP110原核重组表达质粒,转化大肠杆菌诱导表达后获得分子量为41 kD的截短重组VP110蛋白(rVP110)。以rVP110作为诱饵蛋白,运用pull-down实验结合蛋白质谱分析鉴定rVP110结合蛋白,结果显示,中国明对虾鳃细胞中的肌动蛋白和精氨酸激酶(arginine kinase,AK)与rVP110具有结合作用。利用PCR扩增中国明对虾AK编码基因,将其与表达载体pGEX-4T-1连接...

关键词： WSSV 囊膜蛋白VP110 结合蛋白精氨酸激酶中国明对虾克氏原螯虾

转vp28蓝藻口服剂对凡纳滨对虾抗白斑综合征病毒能力及免疫反应的影响

[期刊] 水产学报 [作者] 郭媛媛殷嵘施定基周园何培民吴倩萍庄旻敏韦章良贾睿

为探讨转vp28蓝藻(Anabaena sp.PCC7120)口服剂对凡纳滨对虾抗白斑综合征病毒能力及其相应的免疫反应,本研究将此口服剂免疫幼虾7 d,再分别通过投喂攻毒和浸泡攻毒,测定其存活率及相应的免疫指标。投喂攻毒和浸泡攻毒的实验组存活率分别为78.8%和83.19%,表明该口服剂能显著增强对虾抗白斑综合征病毒的能力。蓝藻口服剂免疫对虾的酶活性检测结果显示,超氧化物歧化酶(SOD)、酚氧化酶(PO)、过氧化氢酶(CAT)和碱性磷酸酶(AKP)活性在免疫后2 h均有上升趋势,且在48或96 h达到最高

关键词：凡纳滨对虾白斑综合征病毒转vp28蓝藻口服剂免疫反应

对虾白斑综合征病毒wsv477基因的克隆表达与时相分析

[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版) [作者] 韩芳王志勇巫旗生王晓清

将对虾白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)的功能基因wsv477克隆到原核表达载体PGEX-4T-2中,并转化大肠杆菌BL21,37℃条件下诱导了WSV477蛋白的表达,并以纯化的融合蛋白作为抗原,免疫小鼠获得了多克隆抗体.该基因开放阅读框共624个核苷酸,编码208个氨基酸,GST融合蛋白相对分子质量为49000,抗体滴度为1:10000.RT-PCR和Western blot分析表明,该基因在病毒感染4h后开始转录,6h后开始表达,是WSSV感染的早期基因.

关键词：对虾白斑综合征病毒 wsv477基因时相分析

低剂量对虾白斑综合征病毒粗提液对斑节对虾体内潜伏期病毒及血细胞的影响

[期刊] 水产学报 [作者] 张涛郭志勋黄建华杨丽诗温为庚杨其彬江世贵

利用含3×103、6×102、2×102copies/mL的对虾白斑综合征病毒(white spot syndromevirus,WSSV)粗提液和PBS液人工注射感染携带病毒量约1×105copies/g的斑节对虾,通过实时定量PCR法、显微镜观察法研究了感染后斑节对虾发病死亡率、肌肉内WSSV含量及总血淋巴细胞数和不同种类血细胞的比例组成变化。结果表明,3种浓度下斑节对虾累积死亡率分别为93.33%±2.89%、56.67%±5.77%和45.00%±5.00%,对照组没有发生死亡。注射3×103copies/mL的浓度组,在注射后30 min时,对虾肌肉内的病毒含量达到最低值(3.54×...

关键词：斑节对虾白斑综合征病毒低剂量感染死亡率实时定量PCR 血淋巴细胞

罗氏沼虾白斑综合征病毒囊膜蛋白VP28基因的克隆及分析

[期刊] 淡水渔业 [作者] 王晓兰贡成良薛宇醒曹广力魏育红陈辉许雅香张伟明薛仁宇

根据已公布的罗氏沼虾白斑综合征病毒(WSSV)囊膜蛋白VP28基因序列设计一对特异性引物,从疑似患白斑病毒病的罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)中提取总DNA,并以此为模板,经PCR扩增、克隆并测序后将该片段通过GenBank比对,证实为WSSV的VP28基因;与20个已公布的WSSV VP28进行同源性比较,结果显示:从中国对虾、斑节对虾、南美白对虾、日本对虾、波纹龙虾提取的病毒株聚为一类,印度对虾WSSV VP28为另一类,罗氏沼虾WSSV VP28又单独为一类。根据测序结果推测VP28蛋白的二级结构在氨基酸的7～29区间可能为跨膜螺旋区,且该区域高度保守。

关键词： VP28基因克隆序列分析蛋白质二级结构

白斑综合征病毒囊膜蛋白VP19及VP28的研究进展

[期刊] 水产学报 [作者] 贾睿朱婵庄旻敏廖圣瑜施定基何培民

自二十世纪90年代,白斑综合征病毒(WSSV)就因其暴发范围广、致死率高得到了广泛的关注。研究主要集中在确定该病毒蛋白的结构及功能,以及利用其囊膜蛋白制备亚单位疫苗、研发DNA疫苗等来提高对虾抵抗白斑综合征病毒的能力,尽管免疫防治目前在实验室阶段已取得了显著的保护效果,但因其给药方式局限以及成本较高等因素一直没有应用于实际生产中。VP19和VP28是白斑综合征病毒主要的囊膜蛋白,在WSSV感染对虾的过程中起着非常重要的作用。本文从WSSV的基因组学、VP19和VP28的蛋白质结构及其在免疫防治中的应用等方面概述了VP19和VP28的研究进展,包括蛋白亚单位疫苗、DNA疫苗、RNA疫苗以及相关抗体的研究。在总结了不同类型疫苗的保护效果后发现,VP19和VP28的双价疫苗的保护率较高,为今后制定有效的WSSV控制方法提供了参考。

关键词：对虾白斑综合征病毒 VP19 VP28 囊膜蛋白疫苗

中国明对虾FBA基因克隆及其在白斑综合征病毒感染中的表达及功能分析

[期刊] 渔业科学进展 [作者] 史晓丽孟宪红孔杰栾生罗坤曹宝祥曹家旺陈宝龙

醛缩酶(FBA)是糖酵解和糖异生中的关键酶,参与多种生物过程。本研究采用RACE技术,克隆获得中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)FBA基因(Fc FBA)的全长c DNA序列,并对其进行生物信息学分析。结果显示,中国明对虾Fc FBA基因的c DNA全长为2496 bp,其中,ORF长1098 bp,5~′UTR长79 bp,3~′UTR长1319 bp。完整的阅读框编码365个氨基酸,分子量为39.8 k Da,预测的理论等电点为6.6。同源性及系统进化分析表明,Fc FBA与节肢动物的FBA聚为一类,与卤虫(Artemia franciscana)、家蚕(Bombyx mori)、沙漠蝗(Schistocerca gregaria)的相似度分别是86%、79%和78%。荧光定量PCR结果显示,Fc FBA在肌肉中的相对表达量最高,肝胰腺中最低。WSSV感染后,该基因在鳃、肝胰腺和肌肉中呈现出不同的时空表达特点。ds RNA干扰24 h以后,抑制效率达到最大。与PBS对照组相比,Fc FBA干扰组(ds RNA组)加快了对虾染病后的死亡速度。本研究表明,Fc FBA基因可能参与了中国明对虾生物胁迫的应答反应。

关键词：中国明对虾 FBA基因基因克隆组织表达基因干扰

首页
下一页
尾页
第 页

文献操作() 导出元数据文献计量分析

全选

导出文件格式：WXtxt

作者：

删除

推荐搜索