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[期刊] 渔业科学进展
[作者]
张欢欢 王秀华 李晨 黄倢
从对虾养殖池中分离出１株编号为２０１３０８２５１５（简称菌株１５）的菌株，以鳗弧菌（Ｖｉｂｒｉｏ ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）、哈维氏弧菌（Ｖｉｂｒｉｏ ｈａｒＶｅｙｉ）和副溶血弧菌（Ｖｉｂｒｉｏ ｐａｒａｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ）为指示菌，分析了菌株１５对指示菌的抑菌效果及最低抑菌浓度，同时，分析了菌株１５对其他７株弧菌的抑菌效果。结果显示，菌株１５对３株指示菌均具有抑菌效果，对鳗弧菌、哈维氏弧菌及副溶血弧菌的最低抑菌浓度分别为２．５０×１０～４、２．５０×１０～５、２．５０×１０～５ ｃＦｕ／ｍｌ；对其他弧菌也具有一定的抑菌效果。采用注射及浸泡感染方法分析了菌株１５对对虾的生物安全性，结果显示．．．
关键词：
假交替单胞菌 拮抗菌 弧菌 抑菌效果
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
李翠苹 翟倩倩 王想 李健
为了解对虾养殖池中副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)的耐药性和毒力基因的携带情况，2018年从山东4个地区的对虾养殖池收集分离副溶血弧菌，采用Kirby-Bauer纸片法检测其对12种抗生素的耐药性，用PCR方法检测其携带耐热直接溶血素基因(tdh)和耐热相关溶血素基因(trh)的情况。从对虾养殖池共分离副溶血弧菌50株。药敏实验结果显示，副溶血弧菌对庆大霉素、硫酸新霉素和氨苄西林的耐药情况最为严重，耐药率分别98%、90%和86%，对氟苯尼考、氯霉素、头孢他啶等敏感性较高，耐药率分别为10%、10%和20%。88%的菌株具有多重耐药性。毒力基因检测结果显示，所有菌株均不携带tdh基因，4%的菌株表现为trh阳性。本研究提示，对虾养殖水环境中的副溶血弧菌对抗生素的耐药性较为严重，应加强副溶血弧菌的病原学监测，在养殖过程中合理使用抗生素，以实现水产养殖业健康发展。
关键词：
副溶血弧菌 耐药性 毒力基因 对虾养殖池
[期刊] 林业科学
[作者]
刘会香 周翠 金静 胡凌志 曹帮华
从石榴果实中发现一株拮抗细菌,通过对菌体的形态观察、生理生化特性及16SrDNA序列测定鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis);其抗菌特性研究表明:该拮抗菌对几种不同林果病原菌均有不同程度的抑制作用。由Botryosphaeria dothidea、B.parva和Zythia versoniana引起的林果病菌菌丝形态变化表现为菌丝分支增多、扭曲,部分菌丝出现断裂和细胞出现原生质浓缩现象,菌丝顶端和中部细胞膨大成球形或椭圆形,有的成念珠状,有的顶端膨大明显聚集成簇并且颜色加深,随着细胞的继续膨大,透明度增加,最后菌丝细胞变成空泡;而由Valsasordida引起的杨树腐烂病...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
丁雄祺 谢媚 陈偿 管云雁 方建相 云龙
从凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)养殖水体中分离出具有高效氨氮及亚硝态氮去除功能的菌株Y2,生理生化和16SrRNA基因序列比对分析结果显示该菌株为麦氏交替单胞菌(Alteromonas macleodii)。进一步通过生长实验进行温度、酸碱度、盐度的培养条件优化,利用抗生素药敏实验筛选菌株特定抗性;通过卤虫浸泡感染的方法检测麦氏交替单胞菌Y2的安全性,并测定海水培养液OD_(600)及含氮无机污染物的浓度,探究菌株Y2生长与水体中氨氮、亚硝态氮、硝态氮之间的动态变化关系;通过28d对虾养殖试验,监测水质、生物絮团形成量、致病菌数量及对虾成活率生长速率,进一步阐明菌株在实际养殖中的功效。结果表明,该菌株Y2对苯唑西林、克林霉素有抗性;对卤虫的48 h半致死浓度高于1.9×10~8 cfu/mL,显著高于哈氏弧菌(10~2 cfu/mL)。此外,该菌具有持续去除水体中氨氮、亚硝态氮的功能。在养殖实验中能抑制潜在病原菌弧菌生长、提高对虾存活率及生长率,并且能在水体中稳定存活较长时间。综上所述,菌株Y2是养殖用益生菌制剂的优良备选菌株,可作为生物絮团养殖系统中调节水质的关键菌株。
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
张欢欢 王秀华 李晨 黄倢
从对虾养殖池中分离到１株细菌（编号２０１３０４２４０２，简称菌株０２），分别用１６Ｓ ｒ ＤＮＡ序列比对法和细菌全细胞脂肪酸气相色谱法对该菌进行鉴定。结果显示，菌株０２为芽孢杆菌（ＢＡｃｉｌｌｕＳ Ｓｐ．）。为探讨该芽孢杆菌在生物絮团对虾养殖中的使用效果，实验分别设置加菌加糖组（菌株０２的量为２．０×１０４ ｃＦｕ／ｍｌ，蔗糖量为饵料的７０％）、加菌组、加糖组（生物絮团组）及空白对照组，研究了菌株０２对养殖水质（温度、盐度、溶氧、ｐＨ、氨氮及亚硝酸氮）、对虾存活率及水体中主要菌群组成等指标的影响。结果显示，加菌加糖组能显著降低养殖水体中的氨氮和亚硝酸氮浓度，提高对虾存活率。生物絮团对虾养殖系统．．．
[期刊] 中国水产科学
[作者]
王金燕 李彬 王印庚 廖梅杰 荣小军 张正 牛盈盈 宁鲁光
2014年5月,在东营的刺参(Apostichopus japonicus)养殖池塘环境中对水样和底泥样品进行了细菌分离和益生菌的筛选,共获得66株可培养细菌。以刺参"腐皮综合征"主要致病菌为指示菌进行拮抗作用实验,使用选择培养基对菌株的产淀粉酶和蛋白酶能力进行测定,筛选获得一株潜在益生菌株——DY-6,并进行了生理生化实验、16S r DNA基因序列分析、菌株生长特性及其对刺参的安全性研究。结果表明,DY-6对其指示菌假交替单胞菌(Pseudoalteromonas nigrifaciens)、灿烂弧菌(Vibrio splendidus)、副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)和溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)均有良好的抑制作用,抑菌圈直径分别达到24 mm、22 mm、27 mm和37 mm,对淀粉和蛋白培养基的水解直径分别为28 mm和20 mm。利用该菌对刺参进行高浓度胁迫实验测试其安全性,实验期间浸浴组和投喂组刺参状态良好,没有发病和死亡现象。利用细菌生理生化和16S r DNA基因序列分析表明,DY-6与贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis CP015911)的相似性为99%。因此,初步鉴定该菌株为贝莱斯芽孢杆菌。同时,将该菌株与商品化微生态制剂产品中分离的4株益生菌进行了比较,DY-6在温度20~35℃、盐度0~35范围内生长较快,优于上述4株菌,4 h进入对数生长期,10 h达到生长高峰。筛选的贝莱斯芽孢杆菌具有良好的抑菌能力,生长速度快,并且具有广温广盐的优点,不仅能够降低疾病发生率,还可更好地适应黄河口地区夏季水温偏高、盐度波动大的特点,由此具有良好的益生菌商业化开发潜力。
[期刊] 中国水产科学
[作者]
李卓佳 郭志勋 张汉华 杨小立 杨莺莺 陈康德 贾晓平
本研究通过对斑节对虾养殖系统中的异养细菌、浮游微藻进行为期3个月的监测,发现浮游微藻和异养细菌的总量都表现为养殖后期高于养殖前期,其中浮游微藻增加了2个数量级,异养细菌增加了1个数量级,施放有益芽孢杆菌群对池塘菌群和藻群的变动有明显的影响。施放有益芽孢杆菌群的池塘,异养细菌总数略低,弧菌数量维持在10~3 CFU/mL以下,浮游微藻平稳增长,蓝藻占20％以下;对照池异养细菌的总数略高,弧菌数量达到 10~4CFU/mL,浮游微藻数量波动,养殖后期蓝藻占60％,为绝对优势种群。表明有益芽孢杆菌群有促进浮游微藻平稳繁殖的作用,但对浮游蓝藻和弧菌的繁殖起抑制作用,浮游蓝藻与弧菌之间具有一定的繁殖相关...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
郭照辉 黄军 魏小武 罗容珺 伍善东 刘清术
从烟–稻–(油)多年轮作的耕地土壤中分离得到1株广谱拮抗菌HMI–23,对水稻立枯丝核菌、油菜核盘菌、青枯雷尔氏菌具有强烈抑制作用。经过16S rDNA的序列比对,初步认为该菌为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。该菌株发酵液抑菌活性对温度、紫外线和蛋白酶K不敏感,基因组中含有多个已知脂肽抗生素合成相关基因,脂肽粗提物亦对立枯丝核菌、核盘菌、雷尔氏菌有强烈的抑制作用。质谱分析结果表明,该粗提取物中可能含有多种已知的脂肽,如伊枯草菌素A、抗霉枯草菌素B、杆菌霉素D、丰原素B等。
关键词：
拮抗菌 分离 鉴定 脂肽
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
张宝存 刘飞 边慧慧 刘杰 潘鲁青 黄倢
从患病凡纳滨对虾肝胰腺中分离出菌株20100612001,经人工感染实验证实,该分离菌株对凡纳滨对虾的半数致死量为1.44×106CFU/ml。形态学观察和革兰氏染色表明,该菌株为革兰氏阴性,无芽孢,有一根端极鞭毛;呈球杆状、球状、棒状或梨状且有两极浓染现象;在2216E培养基上为透明或半透明的圆形菌落,而在TCBS选择性培养基上为绿色或蓝绿色菌落。经Biolog碳源利用反应、脂肪酸气相色谱分析得出,该菌株与副溶血弧菌、需钠弧菌等的生理生化特性最相似;16SrD-NA序列测定表明,该菌株与弧菌属中几株病原菌的同源性均达到98.9%以上。在分子进化树中该菌株与副溶血弧菌Vibrio paraha...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
韦锡昌 林蓝慧 蒙姣荣 李界秋 王忠文
【目的】从香蕉根际土壤等材料中分离筛选获得对香蕉枯萎病菌有抑制作用的拮抗菌，为香蕉枯萎病生物防治提供理论基础及菌株资源。【方法】采用稀释平板分离法，从香蕉枯萎病罹病土壤、桑蚕和发酵藻等材料中分离得到微生物，再分别采用平板划线法和单孢分离法对细菌、真菌进行分离和纯化，以香蕉枯萎病菌亚热带4号生理小种（Foc STR4）为靶标菌，采用平板对峙法进行拮抗菌的筛选试验，对抑制效果最好的菌株进行基因测序鉴定、生理生化指标测定；以只接种Foc STR4为对照进行防治香蕉枯萎病的盆栽试验。【结果】从罹病的香蕉根际土壤中筛选得到一株对Foc STR4有明显抑制效果的拮抗细菌TU3-1，抑制率为56.18%，在实验中发现TU3-1对香蕉炭疽病菌等其他13种供试植物病原菌有抑制作用，其中对香蕉炭疽病菌的抑制效果最好，抑制率为75.99%。盆栽试验结果显示，与只接种Foc STR4处理相比，对香蕉枯萎病的防治效果为51.81%。经基因测序、序列比对和生理生化实验观测，TU3-1菌株被鉴定为贝莱斯芽孢杆菌属（Bacillus velezensis），该菌株为革兰氏阳性菌，厌氧性，可水解淀粉和纤维素，产生氨气和蛋白酶，最适宜培养基为PDA培养基，最适培养温度为30 ℃，最适生长pH为7。【结论】筛选鉴定得到1株对Foc STR4抑制率为56.18%、对香蕉枯萎病防治效果为51.81%的拮抗细菌TU3-1，被鉴定为B. velezensis TU3-1对其他10种植物病原真菌及3种植物病原细菌也有抑制作用，表现出广谱抑菌活性，可进一步开发作为生防菌种质资源。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
刘姝 陆兆新 吕凤霞 别小妹 房耀维 丁重阳
从连云港海域潮间带采集的样品中筛选得到1株产广谱、高活性抗菌物质的放线菌GB-2。该菌对藤黄微球菌、蜡样芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌等5种革兰氏阳性菌,大肠杆菌、荧光假单胞菌等4种革兰氏阴性菌及扩展青霉、黄曲霉、点青霉、犁头霉、番茄灰霉、小麦赤霉病菌、香蕉炭疽病菌、棉花枯萎病菌、稻瘟病菌等18种真菌有显著拮抗作用。根据其形态特征、培养特征、生理生化特性和16S rRNA序列分析结果,确定其为弗氏链霉菌变种。菌株GB-2所产抗菌物质的稳定性研究表明,该物质在121℃pH 1和pH 12条件下抑菌活性均不变;紫外线照射不影响其抗菌活性。结果揭示该菌在生防、食品及医药方面有潜在的应用价值。
关键词：
链霉菌GB-2 鉴定 抗菌活性 稳定性
[期刊] 水产学报
[作者]
张庆华 戴习林 李怡 赵勇 曾胡龙 张军玉 潘迎捷
So far studies have focused on bacteria isolation aimed at establishing causes of fish diseases and medication methods.Now,more and more attention has been given to the composition of the microflora,its variations in time,and effect on whiteleg shrimp(Litopenaeus vannamei).This is why the problem of...
[期刊] 华北农学报
[作者]
康金磊 韩旭 张仕琦 王丙庆 杨文杰
为探讨茼蒿在西瓜枯萎病防治中的作用和效果，并初步探索其作用机制。采用系列稀释法和平板对峙法从水培茼蒿根系悬混液中分离出一株对西瓜枯萎病具有明显拮抗作用的细菌，命名为ＴＫ－３。综合菌落形态特征、生理生化特征鉴定和１６Ｓ ｒ ＤＮＡ分子鉴定的结果，表明拮抗菌ＴＫ－３为解淀粉芽孢杆菌。菌株ＴＫ－３中拮抗相关代谢物和生物学性能的研究结果表明：菌株ＴＫ－３能够产生吲哚乙酸（ＩＡＡ）、嗜铁素、ＮＨ３和蛋白酶，具备一定的解磷能力，无ＨＣＮ的产生。盆栽试验结果表明：拮抗菌ＴＫ－３对西瓜枯萎病的防治效果达到４８．７％。根据以上结果，ＴＫ－３菌株是一株极具开发潜力的生防菌株。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
李江红 郑志阳 洪双燕 齐香凤 梁勤
【目的】寻找抑制蜜蜂球囊菌的拮抗菌,用于白垩病的生物防治。【方法】利用细菌纯化技术从患白垩病的蜜蜂幼虫体内分离纯化了一株对蜜蜂球囊菌(Ascosphaera apis)有抑制作用的细菌,并结合形态学、革兰氏染色以及16S rDNA序列分析技术进行鉴定,同时通过蜜蜂体内、体外接种试验研究其对蜜蜂球囊菌的抑制作用。【结果】该细菌被初步鉴定为蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus),它在培养基中能够完全抑制蜜蜂球囊菌的生长,但其发酵液对蜜蜂球囊菌的生长没有影响。将含菌饲料喂蜜蜂幼虫,蜜蜂幼虫的死亡率和生长发育没有受到影响,说明该细菌对蜜蜂幼虫没有致病性。蜜蜂幼虫体内同时接种细菌和球囊菌孢子,发...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
翟熙伦 杨金广 申莉莉 钱玉梅 王盼 孙丽萍 王惠卿 赵洪东 王永 王凤龙
【目的】筛选对烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)和马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)具有显著拮抗活性的菌株。【方法】从山东诸城等植烟区采集烟草病毒病高发区健康烟株中烟100(Nicotianatabacum var.Zhongyan 100)的根际土壤,分离抗TMV的活性菌株,通过生理生化测定和分子鉴定确定菌株。采用Real-time PCR技术定量检测该菌株对TMV和PVY的抑制作用进一步验证该菌株的抗病毒活性。田间试验进行3个处理,菌液与病毒混合,2 h后接种(I),喷菌液2 h后接种病毒汁液(II),接种病毒汁液2 h后喷施菌液(III),...
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