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[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 姚宝安  钟勤  王乾兰  赵俊龙  马丽华  喻子牛  
对捻转血矛线虫幼虫有杀灭作用的苏云金芽胞杆菌的筛选姚宝安,钟勤,王乾兰,赵俊龙,马丽华,喻子牛(华中农业大学牧医系,武汉430070;华中农业大学部级农业微生物重点实验室,武汉430070)THESIFTINGOFBACILLUSTHURINGIEN...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 王祥  姚宝安  
苏云金芽胞杆菌的伴胞晶体毒素对捻转血矛线虫第2期幼虫的毒力王祥,姚宝安(华中农业大学畜牧兽医学院,武汉430070)关键词苏云金芽胞杆菌,伴胞晶体毒素,捻转血矛线虫,第二期幼虫THETOXICITYOFBacillusthuringiensisCRY...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 姚宝安  王祥  夏雪山  赵俊龙  马丽华  孙明  喻子牛  
捻转血矛线虫是世界各国危害牛、羊等反刍动物的主要寄生虫之一.目前虽然有特效的化学药物驱虫,但因其具一定的副作用,寄生虫易产生耐药性,药物易在内品残留,危害人类健康.苏云金芽胞杆菌是一种革兰氏阳性细菌,它在形成芽胞的同时,在菌体一端形成一种蛋白性质伴胞晶体,它对昆虫有较高毒力,对人畜安全无毒,不污染环境,成本低,已广泛用于防治农、林、仓贮害虫和医学
[期刊] 华北农学报  [作者] 胡晓婷  宋健  王容燕  杜立新  曹伟平  王金耀  冯书亮  
为了发掘新的Bt资源,从3种不同土壤类型的样品中分离得到了285株苏云金芽孢杆菌菌株。采用杀虫活性测定方法从中获得了13株对铜绿丽金龟幼虫具有高毒力的菌株。利用PCR-RFLP鉴定体系和SDS-PAGE蛋白分析法,研究了这13株苏云金芽孢杆菌的杀虫晶体蛋白基因类型和晶体蛋白表达情况。结果显示,有12株均含有编码毒杀铜绿丽金龟幼虫毒素蛋白的cry8Ca基因,而FTL53没有鉴定到已有的基因类型。这13株菌的伴孢晶体都含有分子量为130 kDa的蛋白。本研究为不断发现新型的、具有高毒力的cry毒素基因奠定了基础。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 黄衍章  李世广  王转红  
采用半人工饲料混药法,观察了苏云金芽孢杆菌对初期性储粮害虫印度谷螟Plodia interpunctella(Hbner)幼虫生长发育的影响。结果表明:苏云金芽孢杆菌对印度谷螟幼虫的毒杀作用并不明显,当苏云金芽孢杆菌剂量≤20000IU/g时,处理7d后对印度谷螟幼虫的毒杀率与对照没有显著差异;当苏云金芽孢杆菌剂量≥2500IU/g时,其对印度谷螟的化蛹和羽化均表现出明显的抑制作用。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 胡逸超  雷薇  孙建生  李季刚  邹克兴  苏赞  梁伟  蔡联合  陈琦  邹承武  
【目的】明确一株具有烟草甲幼虫毒杀作用苏云金芽孢杆菌在蜡样芽孢杆菌群中的进化关系,并对该菌株所携带的cry基因进行鉴定,为其在农业上的开发应用提供参考依据。【方法】对苏云金芽孢杆菌GXZY032菌株的16S rRNA和gyrB基因序列进行PCR扩增测序,并进行相应的进化树分析;使用PCR技术对GXZY032菌株基因组所包含的cry杀虫基因进行鉴定。【结果】菌株GXZY032的16S rRNA序列经PCR扩增得到1.5 kb片段,在进化树中以较低的置信值与多个BtII群菌株聚到一起。gyrB基因序列经PCR扩增并测序得到1.2 kb片段,所构建的进化树有6个置信值较高的分支,构成BtI、BtII、B.cereus I、BtIII、Bt+Bw和Bt+Ba 6个群,其中菌株GXZY032的序列与BtII群聚集一起,置信值为99%。对8种cry基因进行PCR鉴定,结果表明,菌株GXZY032包含cry1、cry2和cry10 3种类型cry基因。【结论】苏云金芽孢杆菌菌株GXZY032属于BtII群,具有cry1、cry2和cry10 3种类型cry杀虫基因。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 刘明秋  戴经元  喻子牛  
以小菜蛾、棉铃虫为生物测定昆虫 ,通过测定 5种无机盐 (Na2 CO3,K2 CO3,CaCl2 ,MgSO4 ,和MgCl2 )对苏云金芽胞杆菌油剂的增效作用进行增效因子的筛选。结果表明 ,以小菜蛾为供试昆虫 ,除CaCl2 外 ,其余 4种无机盐对苏云金芽胞杆菌油剂均表现增效作用 ,0 .0 10 %MgCl2 效果最好 ,增效比为 1.5 6。以棉铃虫为供试昆虫 ,5种无机盐对苏云金芽胞杆菌油剂均表现增效作用 ,0 .0 12 5 %MgSO4 效果最好 ,增效比为 1.6 9,0 .0 2 5 %的Na2 CO3 次之 ,增效比为 1.5 9
[期刊] 林业科学研究  [作者] 李恩杰  李娜  王青华  张永安  王玉珠  曲良建  
[目的]探究伊氏杀线真菌与苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)对松材线虫的联合毒力。[方法]使用Esteya vermicola孢子悬浮液与Bt发酵液处理松材线虫,通过线虫的形态变化、死亡率及死亡速度3个方面测定E.vermicola与Bt联合对松材线虫的影响。[结果]经过E.vermicola孢子悬浮液处理过的线虫会出现内容物渗漏,体腔收缩、弯曲、断裂的现象;高浓度的E.vermicola孢子悬浮液与Bt发酵液联合处理松材线虫可以明显地提高线虫的死亡率,最高可以达到100%;联合处理的线虫死亡速度较快,随着处理时间的延长,死亡率会一直呈上升的趋势。[结论]应用这两种生防微生物在合适的浓度下混配能够在较短时间内提高松材线虫的死亡率。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 陆慧慧  林志强  谭万忠  罗华东  鲜菲  毕朝位  余洋  杨宇衡  
【目的】分析并鉴定对马铃薯甲虫(Leptinotarsa decemlineata)具强致病性的苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)CPB012菌株的杀虫基因型,为充分而有效地利用此生防菌奠定基础。【方法】CPB012菌株在LB培养基上30℃培养2—3 d,用苯酚品红进行晶体染色,观察伴孢晶体形态。cry1—cry10杀虫基因的检测选用技术成熟的PCR-RFLP(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism)法,即对某一类基因(如cry1、cry2…)保守区序列设计通用引物,并引入...
[期刊] 淡水渔业  [作者] 华建权  潘雪央  沈爱苗  
针对慈溪市饮用水水库底层鱼类相继发生胃瘤线虫危害鱼体生长发育、影响鱼产品质量的情况 ,笔者在调查、取样的基础上 ,选用了鱼苗鱼病防治中四种常用药物 :90 %晶体敌百虫、甲苯咪唑、盐酸左旋咪唑、肠虫清 (阿苯达唑 )等进行幼虫杀灭试验 ,试验方法采用等对数间距法 ,结果表明 :这四种药物对胃瘤线虫幼虫均有杀灭效果 ,其中甲苯咪唑毒性最强 ,90 %晶体敌百虫、盐酸左旋咪唑次之 ,肠虫清毒性最弱。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 逯晋忠  李菁菁  张献芳  祁髙富  陈京元  赵秀云  
模拟自然界中云斑天牛Batocera horsfieldi(Hope)成虫的生活状态,建立室内人工饲养及生测方法,对苏云金芽胞杆菌(Bt)的杀虫活性进行测定。将苏云金芽胞杆菌菌悬剂涂抹在野蔷薇枝条表面,饲喂云斑天牛成虫,20 d后统计死亡率、体质量变化及产卵数量。在室内测定了80株苏云金芽胞杆菌的活性,通过1次初筛和2次复筛,筛选到1株对云斑天牛成虫有较高致死率的菌株ZQ-51。该菌株处理云斑天牛成虫后平均死亡率为53.33%,平均体质量减少率和平均产卵减少率分别是5.67%和12.48%,与对照差异均极显著。从感染死亡的成虫肠道中重新分离了该菌株,并验证分离的菌株与ZQ-51具有相似的形态特...
[期刊] 林业科学  [作者] 徐华潮  徐金华  张立钦  林海萍  杨萍  程剑明  
苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis),简称Bt,其在形成芽孢的同时会在菌体的1端或2端形成蛋白晶体,这种蛋白晶体被称为杀虫晶体蛋白(insecticidal crystalproteins,ICPs)或δ-内毒素(delta-endotoxin)。因ICPs具有杀虫高效、广谱、对
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 沙莉  章淘  黄张敏  黄志鹏  关雄  
分离自武夷山土壤的苏云金芽胞杆菌BRC-HZP7菌株对小菜蛾和甜菜夜蛾幼虫有较好的毒杀作用.对该菌株进行了生理生化测定、cry基因的PCR-RFLP检测,以及通过SDS-PAGE检测晶体蛋白,并对蛋白点进行肽段指纹图谱鉴定.结果表明该菌株含有cry1Aa、cry1Ba、cry1Ia、cry2Ab、cry2Ac、cry2Ae等6种cry基因.从选取的8个蛋白条带肽段指纹图谱可以看出:标记3、6、7、8的4个蛋白点都是杀虫晶体蛋白,蛋白点6、7、8分别鉴定为Cry2Aa、Cry1Aa、Cry1Ba,蛋白点3可能是Cry1Ba的部分片段.表明该菌株有丰富的ICP资源,可作为杀虫应用的候选菌株.
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 王清锋  喻子牛  
利用PCR片段延伸连接技术将cry1E的原启动子准确地更换为cry3A启动子,重组cry1E经载体pHT315克隆至枯草芽胞杆菌无芽胞突变株1S8和苏云金杆菌以色列亚种无晶体突变株4Q7,获得重组菌3A1EBs和3A1EBt。聚丙稀酰胺凝胶电泳和生物测定表明,克隆改造后的cry1E可表达,表达的Cry1E对海灰翅夜蛾有毒(幼虫死亡率60%~70%)。
[期刊] 华北农学报  [作者] 王容燕  冯书亮  范秀华  曹伟平  胡明峻  
通过正交试验优选出对金龟子幼虫有杀虫活性的苏云金杆菌HBF 1菌株的发酵培养基组合为:氮源B4 4%,淀粉1 2%,酵母粉0.5%,KH2PO40.04%,MgSO40.05%。用此配方进行摇瓶发酵,发酵液的平均菌数可达到44亿/mL,晶体产生量为2 1130mg/mL,发酵液稀释50倍对铜绿丽金龟幼虫进行生测,14d平均死亡率达到78 3%。
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