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[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 刘波  叶钟音  刘经芬  周明国  
从江苏常州草莓上分离到的 Botrytis cineren 菌株 B205对多菌灵、速克灵均表现高度抗性。多重抗性菌株在含多菌灵或速克灵的 PSA 培养基上菌丝生长很少受抑制,在无药的 PSA 培养基上菌丝连续培养8代后,抗性程度并不下降,只表现生长速率有所降低;对扑海因呈交互抗药性,但对福美双、克菌丹、百菌清、退菌特、粉锈宁等杀菌剂的反应与敏感菌相似;该多重抗性菌的产孢能力明显低于敏感菌。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 王学贵  罗维  冯晓菲  赵芸  刘书华  陈诗瑶  
采用菌丝生长速率抑制法测定了北京、山东、江西等7个地区31株灰霉菌株和1株实验室标准菌株(BO5.10)对腐霉利的毒力。结果表明,32个供试灰霉菌株中,8个菌株对腐霉利属中等抗性,20个菌株属于低等抗性,4个菌株为敏感菌株。进一步测定了个别抗性菌株与敏感菌株的高盐渗透压、甘油含量以及电导率之间的差异。供试抗性及敏感菌株在1.25~10 g/L Na CL浓度范围内可刺激菌落生长,超过此浓度界线抑制菌落生长,且对抗性菌株抑制率大于敏感菌株。抗腐霉利菌株甘油含量和电导率均高于敏感菌株。以上结果为灰霉病的抗性治理提供了理论依据。
[期刊] 华北农学报  [作者] 钱铸锴  张传清  周根  戴德江  时浩杰  
为了建立一种新型的能够快速、准确、高效地检测铁皮石斛灰霉病菌对多菌灵抗药性的检测技术,利用环介导的等温扩增技术(Loop-mediated isothermaL ampLification)通过对临安3个铁皮石斛基地的灰霉病菌进行抗性分析发现,本地铁皮石斛灰霉病菌对多菌灵表现出高水平抗药性的菌株编码β-微管蛋白的198位氨基酸由e(GaG)突变为V(GtG)。根据高抗菌株第198位密码子的突变位点设计了特异性检测引物,对高抗灰霉菌株e198V基因型进行分子检测。结果表明:使用钙黄绿素染料作为反应指示剂,在等温条件下(65℃)进行核酸扩增反应40 min后,以抗药性菌株dna为模板的反应液呈阳性...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 潘以楼  汪智渊  吴汉章  
从江苏、河北、上海等地采集的水稻恶苗病病株上分离到抗、感多菌灵(MBC)的稻恶苗病菌(Fusxariummvniliforme)菌株中,选用7个抗性菌株和6个敏感菌株均获得氯酸盐的硝酸盐利用缺陷突变体(nitmutant)。从抗性菌株获得nit突变株的频率显著高于敏感菌株,突变株对MBC的敏感性与其亲本菌株完全一致。抗性菌株的nit突变株间及敏感菌株的nit突变株间均能产生互补反应而形成异核体,抗性菌株的nit突变珠和敏感菌株的nit突变株间不能产生互补反应。F.mibukufirne的抗、感MBC菌株的nit突变性状有一定的稳定性,但产孢密度和致病力较亲本菌株显著下降。
[期刊] 华北农学报  [作者] 杜立新  冯书亮  王容燕  王金耀  曹伟平  林开春  张用梅  
本文对拮抗BS-208菌株防治番茄灰霉病的作用机制进行了初步研究。通过在番茄苗上接种番茄灰霉病菌和拮抗枯草芽孢杆菌BS-208,测定PAL、SOD、POD和PPO的活性变化及MDA含量。结果表明,接种BS-208菌株发酵液处理48 h后PAL、POD和PPO活性均升高,其中PAL和POD活性在处理后48 h达到最大值,均为0.72,PPO活性在处理后96 h达到最大值,为4.5,这些酶活性的升高增强了番茄抵御病原菌侵入的能力;而MDA含量与对照相比无明显变化,表明接种BS-208菌株后对番茄植株没有伤害。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 祝海娟  刘大伟  张艳菊  白玲玲  杨佳乐  
本研究采用叶盘漂浮法测定了来自黑龙江省、吉林省、辽宁省、北京、山东省、江苏省、湖北省和广东省8个省份13个黄瓜主产区的36个黄瓜霜霉病菌株对甲霜灵的抗药性。结果表明,黄瓜霜霉菌对甲霜灵的EC_(50)值为1.3277~171.5480μg/mL,平均EC_(50)值为64.6782μg/mL;36株菌株中,有3个中抗菌株,占总菌株数的8.3%;33个高抗菌株,占91.7%,为优势群体,无敏感菌株和低抗菌株。各地区采集的黄瓜霜霉菌对甲霜灵抗性水平范围28.25~3649.96倍,平均抗性水平为1376.13倍;除黑龙江省齐齐哈尔检测到1株中抗菌株和辽宁省海城检测到2株中抗菌株外,其余菌株对甲霜灵...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 贡常委  秦旖曼  屈劲松  王学贵  
【目的】灰霉病是草莓生产过程中的一种重要病害,严重影响了其产量和品质。论文旨在明确四川省草莓灰霉病菌对咯菌腈的抗性频率以及抗性机制,为草莓灰霉病的药剂防治提供理论依据。【方法】2016—2017年从四川成都、德阳、眉山、乐山及雅安等地采集草莓灰霉病样本,并分离纯化得到188株草莓灰霉病菌菌株。采用区分计量法测定188株灰霉病菌对咯菌腈的敏感性水平,采用菌丝生长速率抑制法测定咯菌腈对代表性菌株的毒力和渗透压敏感性,采用甘油铜比色法测定经咯菌腈处理的抗性菌株和敏感菌株甘油含量,采用分段测序对抗性菌株和敏感菌株Ⅲ型组氨酸激酶基因BOS1(BC1G_00374)扩增测序,采用Swissmodle和I-TASSER预测和评价突变对BOS1的结构影响。【结果】188株灰霉病菌菌株中有8株表现为高抗,9株为中抗,43株为低抗,其余表现为敏感;咯菌腈对代表性菌株的EC50介于0.03—0.62μg·mL~(-1),代表性菌株的抗性倍数范围为2.2—45.9。NaCl浓度在1.25—10 g·L~(-1)可刺激敏感菌株生长,浓度在1.25—20 g·L~(-1)范围可刺激抗性菌株生长,但>40 g·L~(-1)时则抑制菌丝生长,尤其对抗性菌株,抗性越高抑制作用越强;在正常条件下各代表性菌株甘油含量介于0.0025—0.0148μg·mL~(-1),且菌株的甘油含量与咯菌腈抗性没有明显的关联性,但在使用咯菌腈处理(0.1μg·mL~(-1))抗性菌株和敏感菌株后,甘油含量均上升,且抗性菌株甘油含量上升幅度明显低于敏感菌株。低抗菌株YAHY-13、CDCZ-2以及中抗菌株CDCZ-42在TAR和HAMP区域均发生突变,中抗菌株CDCZ-20和高抗菌株MYFC-10、CDCZ-43在TAR和REC区域均有突变,但CDCZ-20菌株在TAR区域位点是I365N,而两株高抗菌株在TAR区域位点是I365S。不同突变位置对BOS1区域结构有不同程度的影响,其中F127S、I365N、I365S、V1136I、A1259T均处于BOS1区域结构的无规则卷曲,但TAR区域I365N和I365S使区域结构无规则卷曲发生整体偏移。【结论】四川省已有部分地区草莓灰霉病菌对咯菌腈产生了抗性;相比敏感菌株,田间抗性菌株对渗透压的耐受能力增加,但当浓度超过耐受范围后对渗透胁迫高度敏感,药剂胁迫下田间抗性菌株甘油含量增加量显著小于敏感菌株;组氨酸激酶BOS1突变的位置和方式与灰霉病菌菌株对咯菌腈的抗性水平存在必然联系。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 侯明生  赵明富  
将多菌灵、硫磺原药按不同比例混配,在室内对小麦赤霉病菌(Fusariumgraminearum)和稻瘟病菌(Pyriculariagrisea)进行毒力测定。结果表明,不同比例混配的多硫对2种病菌菌丝生长速率均有明显的抑制作用,各配比与单体多菌灵和硫磺相比,有显著增效作用。在多菌灵和硫磺之比12.5∶12.5,15∶10和10∶15的3种混剂中,对小麦赤霉病菌的共毒系数分别为118.2,106.5和98.2;对稻瘟病菌的共毒系数分别为105.6,101.1和98.1。3种混剂的EC50值,对小麦赤霉病菌分别为3749μg/L,3565μg/L和5389μg/L,单体多菌灵和单体硫磺分别为241...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 曾凡松  尹合兴  史文琦  汪华  杨立军  龚双军  张学江  向礼波  喻大昭  
【目的】揭示β1-微管蛋白基因(β1-tub)和β2-微管蛋白基因(β2-tub)在赤霉病菌(Gibberella zeae)对多菌灵的抗性过程中所起的作用。【方法】采用PCR克隆测序法测定Js449(EC50=7.911μg·m L-1)、Js462(EC50=6.515μg·m L-1)、Js484(EC50=5.031μg·m L-1)、Js506(EC50=8.455μg·m L-1)和Js519(EC50=6.280μg·m L-1)等5个多菌灵抗性菌株的α-、β1-、β2-、γ-tub序列,并与敏感菌株HG-1(EC50=0.552μg·m L-1)进行比对。采用实时荧光定量PCR...
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 庄敬华  孙国良  高增贵  刘限  陈捷  
从土壤中筛选出对番茄灰霉病菌(BotrytiscinereaPers.)有较强拮抗作用的生物防治菌株94株,其中拮抗细菌22株,分离率为17.6%;拮抗放线菌53株,分离率为11.7%;拮抗木霉菌19株,分离率为28.8%。研究发现,拮抗细菌可产生抗生素类物质,且在121℃高温下处理30min不失活,放线菌的抗生物质大多不耐热。拮抗木霉菌具较强的营养竞争及重寄生作用,温室接种试验表明对番茄叶部灰霉病的防治效果达67.18%。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 陈长军  钱忠海  李俊  王建新  尚衍强  周明国  
用单独和混合培养的方法研究了在营养贫乏的条件下禾谷镰孢菌对多菌灵抗性菌株No.2458和敏感菌株No.2021间产孢竞争的作用。结果表明:在单独培养时,抗性菌株No.2458产孢前期和后期分别呈抛物线方式消长,敏感菌株No.2021前期呈直线方式,后期呈抛物线方式消长;敏感和抗性菌株在等量接种混合培养条件下,其前后期产孢模型分别为N∑s=-1.43×105+2.64×104T-46.09T2和N∑r=-2.99×103+6.45×102T-1.13T2。在混合培养时No.2021产孢高峰与其在单独培养时的相同,而No.2458的产孢高峰比其在单独培养时提前24h,并且前者在培养42.5~190...
[期刊] 华北农学报  [作者] 张蕊  李术娜  李朝玉  王全  李红亚  朱宝成  
以灰葡萄孢菌为指示菌,采用平板对峙法(改良的琼脂平板扩散法),从土壤中分离筛选出产芽孢拮抗菌株7株。采用液体发酵法对初筛菌株进行了复筛,得到1株具有较高拮抗活性的菌株L-72,对该菌株进行了形态观察和生理生化特征分析,鉴定为Bacillus属。用PCR法扩增其16S rDNA,测定全序列(1432bp),与GeneBank中已知菌的16S rDNA序列对比,并用Neighbor-joining方法构建L-72菌株进化树,结果表明,L-72菌株与9种模式菌株相似度均低于97%。因此,确定L-72菌株是与芽孢杆菌(Bacillus velezensis)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyl...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 崔林开  李井干  陆静  阴伟晓  王源超  
为了评估大豆疫霉对甲霜灵是否存在抗性风险,采用药剂驯化的方法诱导获得了大豆疫霉菌抗甲霜灵突变株hlj34M,并对其适生性进行了初步研究。该突变体菌丝生长速率、游动孢子产量和致病力与野生型相比没有显著变化。而卵孢子产量明显减少,突变体的3个单游动孢子后代的卵孢子产量与亲本菌株相比分别减少20.35%、43.63%和43.85%,统计分析差异达极显著水平。结果表明:甲霜灵的长期使用会导致大豆疫霉对其产生较大的抗性风险。
[期刊] 华北农学报  [作者] 王万立  王勇  刘耕春  郝永娟  刘春燕  陈静  
从天津市茄子保护地中分离出122个茄子灰霉病菌株中,多菌灵的抗性菌占410%,且多为高抗菌株;多菌灵与乙霉威间表现负交互抗性关系;速克灵和扑海因的抗性菌比率为279%,均为低抗水平,EC50为23011203810μg/mL,两种药剂存在交互抗性;对多菌灵、速克灵、扑海因均有抗性的菌株占供试菌株的279%,均敏感的菌株占590%,对多菌灵有抗性而对速克灵和扑海因敏感的菌株只占131%。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 段亚冰  效雪梅  杨莹  曹君红  施一渊  张晓柯  王勇  王建新  周明国  
[目的]传统的植物病原菌抗药性检测方法存在检测周期长、操作繁琐、效率低等诸多缺点,建立一种小麦赤霉病菌(Fusarium graminearum)对多菌灵抗药性快速检测的方法尤为重要。[方法]基于环介导等温扩增技术(LamP),以小麦赤霉病菌对多菌灵抗药性基因型F167Y的β2微管蛋白基因为靶标,经过人工错配,设计并筛选LamP特异引物,对检测体系各组分浓度配比进行优化,并通过人工接种试验验证该检测技术的可靠性。[结果]建立了一种小麦赤霉病菌对多菌灵抗性的快速、高通量的分子检测技术,该检测技术能特异性鉴定小麦赤霉病菌对多菌灵的抗药性菌株;证实了该检测技术在生产中可靠、稳定、可操作性强,具有广阔...
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