【目的】分离鉴定高效富铁酿酒酵母菌株,优化其培养基组分和发酵条件。【方法】从果园根际土壤中分离选育耐铁酿酒酵母菌,对其进行形态学、生理生化分析和26 S rDNA基因序列分析鉴定;采用单因素试验,分别设置不同碳源种类(葡萄糖、蔗糖、乳糖、果糖、麦芽糖)、氮源种类(硫酸铵、酵母膏、蛋白胨、尿素)及不同质量浓度Fe~(2+)(100,200,300,…,1 000,1 200,1 600,2 000μg/mL)、碳源(10,20,30,40,50,60,70,80,90 g/L)、氮源(无机氮源2,4,6,8,10,20 g/L;有机氮源4,8,12,16,20,24,28 g/L)、无机盐(MgSO_4·7H_2O 0.3,0.5,1.0,1.5,2.0 g/L;KH_2PO_4 0.5,1.5,2.5,3.5,4.5 g/L)的培养基进行试验,探究不同培养基组分对酿酒酵母富铁能力的影响。采用单因素试验研究温度(26,28,30,32,34,36,38℃)、初始pH值(3.5,4.0,4.5,5.0,5.5,6.0,6.5,7.0,7.5)、接种量(2%,4%,6%,8%,10%,12%)、转速(140,160,180,200,220 r/min)、装液量(250 mL三角瓶中分别装20,30,40,50,60,70mL)对酿酒酵母富铁能力的影响。选择温度、初始pH值、接种量、转速进行L_9(3~4)正交试验设计,获得最佳发酵培养条件,并进行验证试验。【结果】从三叶木通果园土壤中分离鉴定获得1株耐铁酿酒酵母菌株ZY-JM16,通过单因素试验,获得该菌株最优培养基组成为:蔗糖50 g/L、尿素4 g/L、酵母膏24 g/L、KH_2PO_4 2.5 g/L、MgSO_4·7H_2O 0.5g/L、Fe~(2+)900μg/m L(FeSO_4·7H_2O 4.5 g/L);通过单因素试验和正交试验优化,发现该菌株高富铁率最佳发酵条件为:起始pH值4.8、温度28℃、转速180 r/min、接种量6%、装液量50 mL(250 m L锥形瓶),发酵时间为40 h。在此条件下,该菌株铁富集率达到91.80%,较优化前提高了229.27%;菌体生物量达13.06 g/L,较优化前提高了59.07%。【结论】获得1株高效富铁酿酒酵母菌ZY-JM16,对其培养条件进行了优化,明晰了其生长规律。

考察了半胱氨酸(CYS)添加量和添加时间对酿酒酵母(Saccharomy cerevisiae Y08)合成谷胱甘肽(GSH)的影响。结果表明:在发酵开始时添加半胱氨酸,能够增强菌体合成GSH能力,当添加量达到0.05%时,GSH产量达到最大值(52.28mg·L-1)。在发酵稳定期(10h)添加半胱氨酸,胞内GSH含量增加不显著,GSH产量仅提高了10.57%。为降低半胱氨酸对菌体生长的抑制,对酿酒酵母原生质体进行复合诱变,筛选半胱氨酸抗性突变菌株。结果表明:半胱氨酸对半胱氨酸抗性突变菌株的生长抑制作用减轻,抗性菌株能够在含有0.4%半胱氨酸的发酵液中正常生长,GSH产量和胞内GSH含量比未...

【目的】利用微卫星标记技术对来自新疆和宁夏的48株酿酒酵母菌株进行区分,并分析其亲缘关系。【方法】选择4个微卫星位点:SCAAT1、SCYOR267c、C11和YPL009c,用其多态性对48个菌株进行分析。【结果】4个微卫星标记在48株菌中共检测到87个等位基因,39种基因型;4个位点多态信息含量为0.8593—0.9115,均为高度多态位点;期望杂合度(heterozygosity expected,He)和观测杂合度(heterozygosity observed,Ho)分别为0.8803—0.9268和0.8333—0.9792。【结论】宁夏和新疆地区酿酒酵母菌株生物多样性丰富。

本文介绍了RAPD、mtDNA-RFLP、微卫星DNA(microsatellite)、Interdelta指纹图谱以及线粒体DNACOX1基因指纹图谱等5种DNA分子标记技术的方法和原理及其优缺点,同时探讨了DNA分子标记技术在国内外酿酒酵母菌株区分中的应用状况与前景。

通过实验室和中等规模生产车间试验,对饲料级啤酒酵母的培养条件进行筛选?生产工艺进行优化,进而选择形成优良的酵母菌生产工艺,生产出质优价廉的饲料级酵母培养物。结果表明,酵母菌最佳液体培养基组成为2%的葡萄糖、1.8%的麦芽糖、0.5%硫酸铵、0.5%氯化钾、0.5%硫酸镁、0.5%氯化钠和土豆液,最佳培养时间为48 h。在进行酵母菌的固体培养时,加豆汁量为投料量的60%,菌种的接种量为2%,培养温度为31℃,培养时间为72 h时,酵母菌的繁殖效果最好,可达83亿/g。

以酵母高级醇和乳酸代谢理论为基础, 建立了一套低含量高级醇和高活性的乳酸脱氢酶啤酒酵母菌株选育方法。将出发菌株诱变后, 依次通过乳酸、麦芽汁碳酸钙和TTC上层平板筛选, 分离获得一株高级醇产量下降 28 7%的目标菌株。用该菌株接种发酵后, 啤酒中高级醇含量由原出发菌株的 98 4mg·L-1下降到 70 2mg·L-1, 其发酵性能基本保持不变; 经连续 8次继代培养后, 该菌株的高级醇、双乙酰产量和啤酒发酵度保持不变, 显示遗传性能稳定。

对1株经过DES(硫酸二乙酯)、紫外线和氯化锂复合诱变后的产朊假丝酵母进行富硒发酵条件的研究,通过单因素及正交试验,确定葡萄糖为培养基的最佳碳源,添加4%～5%时可得到最高生物量与硒含量;蛋白胨和尿素的复合氮源为最佳氮源.分别添加蛋白胨0.5%,尿素0.9%,辅助氮源酵母膏0.4%,硒25μg/mL,摇瓶(250mL)装液量30mL,转速200r/min,培养温度28℃,pH5～6,培养时间40h,此条件下酵母生物量达到7.942g/L,总硒含量达到16486.48μg/L.

为了提高酿酒酵母中β-葡聚糖(SCG)含量,本研究对酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiaeFFL01)培养基进行了优化。通过单因素试验评价了碳源、氮源、无机离子、酶激活剂等对酵母生物量及SCG的影响,运用二次回归旋转组合建立数学模型,通过响应面分析确定培养基各主要组分最佳含量为:葡萄糖31.1 g/L、蛋白胨19.1 g/L、酵母膏15.0 g/L、甘油9.7 g/L。优化培养基使SCG由原来的(0.664±0.013)g/L增加到(1.112±0.008)g/L。所建模型二次项显著水平P<0.01,证明培养基对SCG影响达极显著水平。

从栓皮栎自然发酵基质中分离得到的36株酵母菌,经TTC平板显色图变化挑选出5株菌株,分别测试比较其发酵性能。结果表明:筛选的5株酵母菌菌落形态基本一致,但酵母菌XS03和XS04的死亡率显著低于XS01、XS02和XS05等3株酵母菌(P<0.05)。

以米曲霉为出发菌株,通过物理、化学及复合诱变得到一株曲酸高产菌株ENTG-206,并对该菌株的发酵条件进行了初步研究。结果表明:该菌株的最佳发酵培养基配方为玉米水解糖12%,麦根-豆饼粉0.6%,MgSO4.7H2O 0.05%,KH2PO40.2%,pH值6.0。以优化后的培养基进行30L摇瓶发酵,发酵4d产酸可达49.8mg.mL-1。

选取12头体质量相近的健康断奶仔猪随机分为2组，对照组(CON组)和试验组(SDGS组)分别饲喂依据NRC(2012)仔猪营养需要标准配制的等氮等能基础日粮与4%白酒糟酿酒酵母培养物添加日粮，每组6个重复，预饲7 d后试验28 d，探索日粮添加白酒糟酿酒酵母培养物对断奶仔猪生长性能、器官指数、血清生化指标及肠道形态、肠黏膜紧密连接蛋白(TJ)和细胞因子m RNA相对表达量的影响，综合评价日粮添加白酒糟酿酒酵母培养物在断奶仔猪上的饲喂效果。结果表明：SDGS组的平均日增质量显著(P0.05)变化；SDGS组的肝脏指数显著(P0.05)变化；血清生化指标(总蛋白、尿素、葡萄糖、免疫球蛋白M、免疫球蛋白G)在两组间的差异均无统计学意义(P>0.05)；与CON组相比，SDGS组的肠道形态更完整、排列整齐，但空肠和回肠隐窝深度显著(P<0.05)增加，空肠绒毛高度显著(P<0.05)降低，空肠和回肠绒毛高度与隐窝深度比值均显著(P0.05)变化；SDGS组空肠黏膜TJ蛋白中闭合蛋白–3(Claudin–3)的m RNA相对表达量有降低趋势(P=0.091)，空肠黏膜TJ蛋白中闭合小环蛋白–1(ZO–1)、闭锁蛋白(occludin)与十二指肠和回肠黏膜TJ蛋白Claudin–3、occludin、ZO–1的m RNA相对表达量则均无显著(P>0.05)变化；SDGS组十二指肠和回肠黏膜细胞因子白细胞介素–6(IL–6)的m RNA相对表达量显著(P0.05)变化。总之，依照NRC(2012)仔猪营养需要标准，添加4%白酒糟酿酒酵母培养物配制的等氮等能日粮可显著提高断奶仔猪平均日增质量，显著降低肝脏指数，改善肠道的免疫功能，且不会破坏肠道屏障结构，肠黏膜结构更完整，但肠道形态却向消化吸收能力降低的方向发展。可见，白酒糟酿酒酵母培养物可作为断奶仔猪配合日粮的原料，但使用时需要注意肠道健康的保护。

选取12头体质量相近的健康断奶仔猪随机分为2组，对照组(CON组)和试验组(SDGS组)分别饲喂依据NRC(2012)仔猪营养需要标准配制的等氮等能基础日粮与4%白酒糟酿酒酵母培养物添加日粮，每组6个重复，预饲7 d后试验28 d，探索日粮添加白酒糟酿酒酵母培养物对断奶仔猪生长性能、器官指数、血清生化指标及肠道形态、肠黏膜紧密连接蛋白(TJ)和细胞因子m RNA相对表达量的影响，综合评价日粮添加白酒糟酿酒酵母培养物在断奶仔猪上的饲喂效果。结果表明：SDGS组的平均日增质量显著(P0.05)变化；SDGS组的肝脏指数显著(P0.05)变化；血清生化指标(总蛋白、尿素、葡萄糖、免疫球蛋白M、免疫球蛋白G)在两组间的差异均无统计学意义(P>0.05)；与CON组相比，SDGS组的肠道形态更完整、排列整齐，但空肠和回肠隐窝深度显著(P<0.05)增加，空肠绒毛高度显著(P<0.05)降低，空肠和回肠绒毛高度与隐窝深度比值均显著(P0.05)变化；SDGS组空肠黏膜TJ蛋白中闭合蛋白–3(Claudin–3)的m RNA相对表达量有降低趋势(P=0.091)，空肠黏膜TJ蛋白中闭合小环蛋白–1(ZO–1)、闭锁蛋白(occludin)与十二指肠和回肠黏膜TJ蛋白Claudin–3、occludin、ZO–1的m RNA相对表达量则均无显著(P>0.05)变化；SDGS组十二指肠和回肠黏膜细胞因子白细胞介素–6(IL–6)的m RNA相对表达量显著(P0.05)变化。总之，依照NRC(2012)仔猪营养需要标准，添加4%白酒糟酿酒酵母培养物配制的等氮等能日粮可显著提高断奶仔猪平均日增质量，显著降低肝脏指数，改善肠道的免疫功能，且不会破坏肠道屏障结构，肠黏膜结构更完整，但肠道形态却向消化吸收能力降低的方向发展。可见，白酒糟酿酒酵母培养物可作为断奶仔猪配合日粮的原料，但使用时需要注意肠道健康的保护。

【目的】探索益生性酿酒酵母菌对绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1(sheep beta-defensin-1,SBD-1)表达的调节作用,为在分子水平上揭示益生菌对防御素的调控机理提供一定的理论基础及依据。【方法】首先将新鲜的绵羊瘤胃组织用PBS和抗生素处理后进行瘤胃上皮细胞原代培养,当原代细胞数量长到细胞培养瓶的85%以上时,将细胞传于12孔板用于细胞刺激试验。同时将活化并纯化后的酿酒酵母菌25℃、180 r/min有氧培养48 h后,进行5次平行平板计数试验,根据平板计数的数据处理方法,得到浓度为5.2×108 CFU·m L-1的酿酒酵母菌液,再通过倍比稀释把所得菌液依次稀释成浓度为5.2×...

对酿酒酵母(S accharomy ces cerev isiae)与酒类酒球菌(O enos.oen i)的跨界融合子F-20-7进行抗生素筛选、降酸试验、生长试验等生产性能测试及相关基因鉴定研究。结果表明,氨苄青霉素对融合子的影响较小,融合子对L-苹果酸的降解率在54.06%~78.81%,在挑选出的融合子中仅有4株能够在YNB、模拟葡萄汁及天然葡萄汁中生长,其生长力较葡萄酒酵母差。PCR扩增结果显示,融合子质粒DNA中存在苹果酸-乳酸发酵的两个关键酶基因,即苹果酸-乳酸酶基因M leA和苹果酸-乳酸通透酶基因M leP,测序结果表明M leP基因与G enB ank中M leP基因序列的...

【目的】进行中国自行筛选的专利菌种酒酒球菌SD-2a(Oenococcus oeni SD-2a)的苹果酸-乳酸酶基因在酿酒酵母中的整合型表达,使葡萄酒生产过程中的酒精发酵和苹果酸-乳酸发酵(malolactic fermentation,MLF)同时进行。【方法】克隆Oenococcus oeni SD-2a的苹果酸-乳酸酶基因mleA,以PGK1强启动子和ADH1终止子为调控元件,以酵母整合型质粒YIp5为载体,构建重组表达质粒pYILmleA,并转化酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)YS59,经筛选鉴定获得酵母转化子YS59/pYILmleA。进行转化子的营养缺...