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[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 刘艳娟  谭勋  刘家国  赵洪进  王小龙  
将体重为120~150 g的清洁级SD雄性大鼠145只随机分为4组:对照组(25只)、肝癌模型组(40只)、亚硒酸钠组(40只)和富硒麦芽组(40只)。在对照组和模型组大鼠日粮中添加亚硒酸钠至硒含量达到饲养标准(0.1 mg.kg-1),在亚硒酸钠组和富硒麦芽组日粮中分别添加亚硒酸钠和富硒麦芽使硒含量均达到3.0 mg.kg-1。除对照组外,其余各组连续16周饮用含100 mg.L-1的二乙基亚硝胺(DEN)溶液以诱癌,然后改饮自来水至18周末。每组于4、8、12、16和18周时随机挑取5只大鼠断头处死,肝脏切片经增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组化染色后计数肝癌组织中PCNA阳性细胞并计算PC...
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 刘家国  赵洪进  刘艳娟  王小龙  
将193只每只体重100-120 g雄性SD大鼠随机分成5组.在组Ⅰ-Ⅲ日粮中添加富硒麦芽(SEM)使Se质量分数分别达0.3、1.0、3.0 mg.kg-1;在组Ⅳ(模型组)、Ⅴ(阴性对照组,不加Se也不诱癌)日粮中添加Na2SeO3使Se质量分数达0.1mg.kg-1.组Ⅰ-Ⅳ的饮水中添加100 mg.L-1二乙基亚硝胺(DEN)以诱癌,维持DEN摄入量每天每千克体重约10 mg(10 mg.kg-1),连续16周,然后改饮普通灭菌水至18周末;组Ⅴ大鼠始终自由饮用普通灭菌水.每4周各组眼眶采血、断颈椎杀大鼠5只;于18周末采血、处死所有大鼠.每次采样前大鼠禁食12 h,观察其肝脏病理变化...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 刘家国  赵洪进  刘艳娟  刘永旺  王小龙  
雄性SD大鼠233只,随机分成6组。组Ⅰ~组Ⅲ为富硒麦芽(SEM)处理组,日粮中添加SEM使硒含量分别为0.3、1.0、3.0 mg.kg-1;组Ⅳ~组Ⅵ,分别为亚硒酸钠(SS)组、模型组、正常对照组,日粮中添加SS至硒含量分别为3.0、0.1、0.1 mg.kg-1。组Ⅰ~组Ⅴ,饮水中添加二乙基亚硝胺(DEN,100 mg.L-1)诱癌,连续16周。18周末采血、处死所有大鼠,观察肝脏形态学、肝癌标志物、肝功能、血糖、血钙及血糖调节相关激素的变化。结果发现,某些剂量的SEM能显著地减少肝癌大鼠肝表面癌结节数目,降低肝癌标志物甲胎球蛋白、谷胱甘肽硫转移酶、γ谷氨酰转肽酶和胰岛素样生长因子Ⅱ的含...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 刘家国  赵洪进  刘艳娟  刘永旺  王小龙  
雄性SD大鼠153只,体质量100~120 g,随机分为4组。阴性对照组、模型组日粮中添加亚硒酸钠至硒含量为0.1 mg.kg-1;富硒麦芽组(SEM)、亚硒酸钠组(SS)日粮中分别添加富硒麦芽和亚硒酸钠至硒含量达3.0 mg.kg-1。在模型组、SEM组、SS组饮水中添加二乙基亚硝胺(DEN,100 mg.L-1)诱癌,连续16周。阴性对照组始终以普通灭菌水自由饮用。每4周各组鼠眼眶采血5只,18周末采血,处死所有大鼠。结果发现,与同期模型组相比,SEM组血清白介素2(IL-2)显著升高(第8、12周除外),胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)(第4、8周除外)和一氧化氮合酶(NOS)含量,以及...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 赵洪进  刘家国  刘艳娟  王小龙  
采用100 mg.L-1二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠肝癌16周,同时分别饲喂含0.3、1.0、3.0 mg.kg-1富硒麦芽硒和3.0 mg.kg-1亚硒酸钠(Na2SeO3)硒的饲料,停止诱癌及补硒处理2周后,处死大鼠,测定生化指标等,并用流式细胞术分析肝细胞增殖周期的变化。结果显示,3.0 mg.kg-1富硒麦芽组大鼠的肝/体重比、血浆丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TB IL)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、谷胱甘肽硫转移酶(GST)显著低于模型组,肝癌结节数明显低于0.3、1.0 mg.kg-1富硒麦芽组和3.0 mg.kg-1Na2SeO3组,但ALT和...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 张燕燕  木泰华  张苗  
【目的】探讨pH改性和热改性甘薯果胶对结肠癌细胞HT-29、乳腺癌细胞Bcap-37和肝癌细胞SMMC-7721增殖的影响。【方法】分别对改性前后甘薯果胶的半乳糖醛酸含量、酯化度、分子量、微观结构及癌细胞增殖抑制活性进行测定。【结果】果胶改性后半乳糖醛酸含量显著提高(P<0.05),而酯化度和分子量降低,微观结构发生明显变化。未改性、pH改性和热改性甘薯果胶对3种癌细胞均有抑制作用,并呈浓度和时间依赖性;改性后甘薯果胶对3种癌细胞增殖抑制效果均有显著提高(P<0.05),且改性甘薯果胶对HT-29和Bcap-37的抑制效果更显著。【结论】改性甘薯果胶对HT-29和Bcap-37的增殖抑制效果较...
[期刊] 水产学报  [作者] 康亚妮  陆俊  徐晓婷  孙雪  徐年军  赵小东  
为了探讨龙须菜多糖(PGL)对肺癌细胞增殖能力的抑制作用及其形态学的影响,将不同浓度的PGL分别作用于肺癌A549细胞24、48、72 h,采用CCK-8和台盼兰拒染法检测PGL对细胞增殖能力及生长的抑制作用,计算死亡细胞数及存活率;相差显微镜和DAPI染色观察PGL对肺癌细胞的形态学影响;Annexin V-FITC/PI双染法和流式细胞术检测PGL对细胞凋亡的作用。结果显示,随PGL作用浓度及时间的增加,细胞增殖能力及存活率逐渐降低,抑制率逐渐增加,以50μg/m L作用72 h最为显著。细胞形态发生不规则改变,接触生长状态减少,数量减少,细胞核受到损伤,细胞发生凋亡,72 h后上述改变更...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 刘彬  王小龙  
将不同质量浓度 (0 3、 0 5、 0 6、 0 8、 1 0、 1 2、 1 5和 2 0 μg·mL-1)的亚硒酸钠加入大鼠的肝癌细胞 (RH 35 )和正常肝细胞 (BRL)的体外培养液中 ,分别在不同时间 (2 4、 4 8、 72和 96h ;2 4、 5 6和 96h)检测肝癌细胞和正常肝细胞的活性、增殖能力、生长曲线等指标。结果表明 ,随着浓度和时间增加 ,亚硒酸钠对肝癌细胞的生长抑制作用逐渐增强 ;随时间的延长 ,亚硒酸钠对正常肝细胞的生长呈现一定的抑制作用 ,但浓度变化对正常肝细胞生长抑制的作用不明显。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 黄在兴  刘凌云  陈华  翁伯琦  林占熺  刘朋虎  
【目的】研究菌草灵芝多糖肽(GL-PP)对肝癌细胞Huh7活性、迁移和细胞凋亡的影响,为GL-PP应用于肝癌治疗提供理论依据。【方法】用低(50μg/mL)、中(100μg/mL)、高(200μg/mL)3种不同浓度的GL-PP处理肝癌细胞Huh7,分别采用CCK8、Transwell方法、流式细胞仪分析不同浓度GL-PP对肝癌细胞Huh7活性、迁移和细胞凋亡的影响。【结果】培养基添加GL-PP后肝癌细胞Huh7活力降低,且GL-PP添加浓度越高活力降低越多,但是差异均不显著(P>0.05);GL-PP的浓度为100μg/mL时对肝癌细胞Huh7的迁移无明显影响,当浓度为200μg/mL时对肝癌细胞Huh7的迁移具有明显的抑制作用;低浓度(50μg/mL)和中浓度(100μg/mL)的GL-PP对肝癌细胞Huh7的凋亡无明显影响(P>0.05),高浓度(200μg/mL)的GL-PP能够明显(P<0.05)诱导肝癌细胞Huh7的凋亡。【结论】GL-PP对肝癌细胞Huh7细胞活性影响不显著,高浓度的GL-PP可抑制肝癌细胞Huh7的迁移,也可诱导其凋亡。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 穆璐  张潇筠  韩宝泉  陈昱光  张智英  徐坤  
[目的]确认大眼狮鲈鱼皮肤肿瘤病毒(WDSV)辅助因子OrfA与转录因子E2F5的互作关系,以及OrfA对肿瘤细胞增殖的影响。[方法]采用重组DNA技术构建orfA与E2F5基因过表达载体;通过Western Blot试验,检测对比HEK293T、Hela229宫颈癌细胞、A375恶性黑色素瘤细胞、SMMC-7721肝癌细胞和SPC-A-1肺腺癌细胞中E2F5的表达量;通过酵母双杂交和免疫共沉淀试验,验证OrfA与E2F5的互作关系;采用CCK-8试剂盒和PI单染色法,检测过表达orfA基因对SPC-A-1细胞增殖的影响;采用RT-qPCR,检测过表达orfA基因对SMAD4和caspase-3基因表达的影响。[结果]成功构建了orfA与E2F5基因过表达载体pLenti-EF1α-orfA和pLenti-EF1α-E2F5;在5种细胞系中,以SPC-A-1细胞E2F5蛋白表达量最高;酵母双杂交和免疫共沉淀试验结果均证明,OrfA与E2F5可以直接相互作用;过表达orfA基因对SPC-A-1细胞增殖具有显著促进作用,同时能够增强SMAD4基因的表达,抑制caspase-3基因的表达。[结论]WDSV OrfA与E2F5有相互作用,且能促进SPC-A-1肺腺癌细胞的增殖。
[期刊] 华中师范大学学报(自然科学版)  [作者] 沈浩  曹郁  雷明  ZAHID Kashif Rafiq  吴雪  刘珂  刘艳丽  刘金林  杨继红  赵浩斌  祁超  
木糖醇亚硒酸酯是一种新合成的化合物,其能够引发人肝癌细胞系SMMC-7221细胞凋亡并且其引发SMMC-7221细胞凋亡伴随着谷胱甘肽的消耗.为了提供更多关于木糖醇亚硒酸酯的抗癌机制研究,该实验用荧光定量PCR技术检测经该化合物处理后的SMMC-7221细胞中caspase-3、caspase-8、caspase-9这3个基因mRNA水平的变化.在经0.5mg/L或1mg/L木糖醇亚硒酸酯分别处理SMMC-7221细胞12、24、36、48h后,与对照组相比,caspase-3的mRNA表达水平从1248
[期刊] 华中师范大学学报(自然科学版)  [作者] 戈艺潼   吉滢   曾敏敏   郑学明   黄新祥   张盈  
近年来,细菌外膜囊泡(OMVs)在抗肿瘤治疗中展现出的巨大潜力引起了广泛的关注。为探究伤寒沙门菌外膜囊泡(S. Typhi-OMVs)对人结直肠癌细胞株HT-29增殖的影响及可能的作用机制,通过超速离心法提取不同细菌的OMVs,细胞增殖实验(CCK-8)检测各细菌OMVs对细胞活力的影响;转录组测序(RNA-seq)分析处理后细胞基因表达水平的变化;试剂盒检测铁死亡相关标志物的含量变化;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质免疫印迹法(western blot)分别检测相关基因mRNA和蛋白质的表达变化。结果显示,在提取的6种细菌OMVs中,S. Typhi-OMVs对HT-29细胞的增殖产生了最明显的抑制作用,并且呈现出浓度和时间梯度依赖性;RNA-seq显示HT-29细胞可能发生了铁死亡;S. Typhi-OMVs作用后,细胞内发生了铁沉积,氧化产物增多,抗氧化剂减少,符合铁死亡生化特征;SAT1是S. Typhi-OMVs处理后HT-29胞内mRNA表达量变化最大的基因;p53-SAT1-ALOX15是铁死亡的信号通路之一,S. Typhi-OMVs处理后胞内p53、SAT1、ALOX15的mRNA与蛋白表达均增高。以上结果表明,S. Typhi-OMVs能够抑制结直肠癌细胞HT-29的增殖,其机制可能与通过p53-SAT1-ALOX15信号通路诱导HT-29发生铁死亡有关。
[期刊] 华中师范大学学报(自然科学版)  [作者] 李亚姣  雷文  秦云  应畅  周秀梅  
人类肝细胞癌是全球最常见和具有高致命性的癌症之一.中国的肝癌患者在全球居于首位,目前仍然没有找到有效的方法来治疗肝癌.近年,溶瘤痘病毒(vaccinia virus)由于其高效的抗癌效应,副反应较低和良好的安全性已成为一种癌症治疗的新方法,且已经广泛应用于癌症的治疗中.索拉非尼,一种新型的肿瘤激酶抑制剂,作为化疗药物可安全有效地治疗肝癌,且已应用于临床试验中.本实验将索拉非尼与溶瘤痘病毒联用并探究其在肝癌细胞中的抗肿瘤的效应.通过体外MTT,Hochest,流式细胞术,Western blot等细胞实验和
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 王丽丽  蔡淑娴  薛志慧  刘仲华  
以赛珍珠5800铁观音为材料,测定乌龙茶中水浸出物、茶多酚、游离氨基酸、可溶性糖、黄酮类物质、没食子酸、8种儿茶素和3种生物碱的含量;并将0、0.2、0.4、0.6、0.8和1.0 mg·m L~(-1)乌龙茶水提取物作用于体外培养的人大肠癌LOVO细胞中,分别处理24和48 h后,采用四甲基偶氮唑蓝(mTT)法测定细胞增殖抑制率,并在倒置显微镜下观察细胞形态的变化;以0.6和0.8 mg·m L~(-1)乌龙茶水提取物处理LOVO细胞48 h,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,扫描电镜下观察细胞凋亡情况.结果表明,乌龙茶中各化学成分的含量均较高,水浸出物含量达40.8%以上,茶多酚含量14.2%...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 刘玉芝 李文玉 李成叶 刘玉竹 穆维维 邱昌伟  
研究不同剂量、形式、配伍的含硒复合物对犬乳腺癌细胞CTM1211的影响,以探究硒抗癌的有效剂量、形式和机制。用低、中、高剂量的CTX(环磷酰胺,1、2、4 mg/mL)、SSE(亚硒酸钠,10、20、40 μmol/L)、MSA(甲亚硒酸,10、20、40 μmol/L)、MSC(硒代半胱氨酸,200、400、800 μmol/L)、CTX+SSE(0.5 mg/mL+5 μmol/L、1 mg/mL+10 μmol/L、2 mg/mL+20 μmol/L)、CTX+MSA(0.5 mg/mL+5 μmol/L、1 mg/mL+10 μmol/L、2 mg/mL+20 μmol/L)、CTX...
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