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[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 赵雪梅  张正钫  郭静成  
用含不同浓度硒的Zarrouk培养液培养螺旋藻,用含不同浓度硒的豆芽汁葡萄糖培养酵母、并用含不同浓度硒的棉子皮培养基培养平菇、试验结果表明:在适宜的培养条件下,螺旋藻、酵母及平菇生长最适宜硬浓度分别为60mg·L(-1),10mg·L(-1)和200mg·L(-1),硒富集系数分别为19.2,14.4和22.6。将3种植物的蛋白质提出,经柱层析及电泳分离,分别得到多种含硒蛋白。试验证明。3种植物吸收的硒绝大部分都转化为含硒蛋白。
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 李湘河   徐静雯   赵勇  
本研究旨在利用4种提取方法[振荡提取(OE)、高速匀浆提取(HHE)、超声提取(UE)和反复冻融提取(RFE)]从螺旋藻中提取C-藻蓝蛋白并对其结构、理化性质、功能特性和抗氧化活性进行研究 。研究表明,4种提取方法所得C-藻蓝蛋白纯度都达到了试剂级标准,其中反复冻融和高速匀浆方法提取得到的C-藻蓝蛋白具有较高的纯度分别达到了2.68和2.37。红外光谱分析显示,反复冻融得到的C-藻蓝蛋白α-螺旋含量最高,说明其二级结构最稳定。C-藻蓝蛋白的功能特性研究表明,其溶解度、乳化能力、起泡能力、持水性、持油性、最低凝胶浓度和表面疏水性,均表现为反复冻融提取>高速匀浆提取>超声提取>振荡提取(P≤0.05)。由SDS-PAGE图谱可知,所有提取方法得到的C-藻蓝蛋白均包含α和β两个螺旋亚基。抗氧化实验结果显示,C-藻蓝蛋白具有较强的抗氧化特性,4种提取方式所得C-藻蓝蛋白清除DPPH和ABTS自由基能力表现为反复冻融提取>高速匀浆提取>超声提取>振荡提取。综上所述,反复冻融提取的C-藻蓝蛋白纯度最高,二级结构最稳定,具有最佳的功能特性包括了溶解度、乳化能力、起泡能力、持水性、持油性、最低凝胶浓度和表面疏水性,同时具有较强的抗氧化性,这些研究结果对拓展C-藻蓝蛋白在食品、医药和化妆品等应用提供理论和研究基础。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 陈里  詹逸舒  吴永尧  
对1株经过DES(硫酸二乙酯)、紫外线和氯化锂复合诱变后的产朊假丝酵母进行富硒发酵条件的研究,通过单因素及正交试验,确定葡萄糖为培养基的最佳碳源,添加4%~5%时可得到最高生物量与硒含量;蛋白胨和尿素的复合氮源为最佳氮源.分别添加蛋白胨0.5%,尿素0.9%,辅助氮源酵母膏0.4%,硒25μg/mL,摇瓶(250mL)装液量30mL,转速200r/min,培养温度28℃,pH5~6,培养时间40h,此条件下酵母生物量达到7.942g/L,总硒含量达到16486.48μg/L.
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 彭卫民  商树田  傅友兰  刘国琴  
采用羟基磷灰石柱层析法对钝顶螺旋藻藻胆蛋白粗提液进行纯化,得到藻蓝蛋白(PC)和别藻蓝蛋白(APC)纯化液。用紫外-可见分光光度计测得 PC 和 APC 的最大可见吸收峰分别在620nm 和650nm 处;用荧光分光光度计测得它们的室温荧光发射峰分别在645nm 和656nm 处。经12%SDS-PAGE 法分析,PC由α和β两个亚基组成,其分子量分别为16.3kD 和18.9kD;APC 也由α和β两个亚基组成,其分子量分别为15.0kD 和16.9kD。用高效液相色谱仪(HPLC)对 PC 和 APC 的氨基酸组成作了测定,发现二者的氨基酸组成比较相似。
[期刊] 水产学报  [作者] 常仁亮  韩保平  顾润润  
对五株假丝酵母菌株进行利用淀粉废水和转化硒元素的筛选试验 ,其中CY - 173菌株所得的蛋白质含量和蛋白态硒总量最多。对其进行耐高温试验 ,在 33~ 45℃范围内 ,菌株都能生长 ,但超过 40℃生长速度开始减缓 ,45℃时明显受到抑制。在 6L标准发酵罐内进行pH与温度条件试验 ,pH在 3~ 5之间 ,菌株生长差异不显著 ;在 33~ 40℃范围内 ,菌株都能较好生长 ,但以 37℃的蛋白质含量与蛋白态硒总量为最高。将所得的硒酵母替代部分鱼粉用于养殖中国对虾 ,结果三组硒酵母饲料 (含 10 %、2 0 %、30 %硒酵母 )的养殖效果均优于对照饲料 ,其中 10 %硒酵母添加量的饲料...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 乔玉辉  商树田  
通过对富硒钝顶螺旋藻中营养成分的分析 ,在施硒条件下 ,浓度小于 50 mg.kg-1的四价硒 Se( )可提高蛋白质含量 ,低浓度的六价硒 Se( )和四价硒可提高螺旋藻中氨基酸总量、各种氨基酸含量和部分矿质元素的含量 ,改善了螺旋藻的品质 ,为生产营养价值较高的硒强化螺旋藻提供一定的科学依据
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 柴丽红  李春荣  彭菊芳  
以活性干酵母为菌种,采用摇瓶培养,通过单因素试验和正交试验设计,研究了发酵培养基中酵母粉、蛋白胨和蔗糖3种主要成分对酵母生物量及富硒性能的影响。结果表明,对酵母生物量影响最主要的营养成分是蔗糖,其次是酵母粉和蛋白胨;对酵母硒含量和硒总含量影响最主要的成分均为蛋白胨,其次为酵母粉和蔗糖。以酵母中硒总含量为指标,初步确定的富硒酵母优化培养基配方为:酵母粉15 g/L,蛋白胨10 g/L,蔗糖20 g/L,且在该营养条件下制得富硒酵母的硒含量和硒总含量分别可达1 050.00μg/g和5 510.07μg/L,与优化前(培养基配方为酵母粉10 g/L,蛋白胨10 g/L,蔗糖40 g/L)相比分别提...
[期刊] 农业现代化研究  [作者] 盛怡  李慧敏  伍贤军  杨红  朱咏莉  李萍萍  
为研究盐泽螺旋藻(Spirulina subsalsa)藻蓝蛋白裂合酶CpcS的催化功能,首先通过PCR技术从S. subsalsa FACHB351基因组DNA中扩增藻蓝蛋白裂合酶的编码基因SscpcS,构建表达质粒pCDFDuet-SscpcS,然后再与脱辅基蛋白和色素合成酶表达质粒pETDuet-SscpcB-Ssho1::SspcyA共同转入大肠杆菌BL21(DE3),并经IPTG(Isopropyl β-D-Thiogalactoside,异丙基硫代半乳糖苷)诱导重组合成藻蓝蛋白。PCR产物测序表明SscpcS扩增成功;双酶切检测和SDS-PAGE电泳分析表明质粒pCDFDuet-SscpcS构建成功,且能表达目的蛋白。重组藻蓝蛋白PCB-CpcB细胞产物为深蓝色;纯化后的色素蛋白展现620 nm的最大吸收峰和646 nm的最大荧光发射峰;色素蛋白通过锌离子染色,在紫外线照射下展现明显荧光。该研究成功克隆源自盐泽螺旋藻的藻蓝蛋白裂合酶SsCpcS的编码基因,其表达产物SsCpcS能有效催化藻蓝蛋白的生物合成。此研究为S. subsalsa藻蓝蛋白的重组合成及抗氧化试剂的研制奠定基础,也为探明盐泽螺旋藻中CpcS的催化机理提供科学依据。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 杨娟  吴谋成  张声华  
香菇子实体经热水提取,乙醇沉淀,脱蛋白,DEAE纤维素柱及纤维素凝胶柱层析得到淡黄色纤维状疏松固体LeⅢ。LeⅢ经聚丙烯酰胺凝胶电泳和SepharoseCL6B柱层析,证明为分子量分布均一的多糖-蛋白质复合物。LeⅢ红外扫描有典型的多糖吸收峰,气相色谱测单糖组成为阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖,摩尔比为0.31∶0.47∶1.00∶1.15∶8.92
[期刊] 西南农业学报  [作者] 梁潘霞  兰秀  刘永贤  潘丽萍  农梦玲  邢颖  廖青  鹿士杨  陈锦平  
【目的】优选富硒大米,研究提取分离硒蛋白的最佳生产工艺条件,为提高硒蛋白资源的开发利用提供参考。【方法】采用碱提法提取硒蛋白,正交试验法优化大米硒蛋白的提取条件,采用考马斯亮蓝G-250试剂结合法测定蛋白含量,原子荧光法测定硒含量。以含硒蛋白质及硒得率为指标,研究影响富硒大米中含硒蛋白质提取的因素。【结果】影响富硒大米含硒蛋白提取率的主次因素为:Na OH浓度>料液比>温度>时间。富硒大米含硒蛋白提取的最佳工艺条件为提取温度50℃,碱液浓度0.14mol/L,提取时间5 h,料液比1∶30,此条件下硒蛋白
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 余芳  汪社英  方勇  王飞飞  谢伟  王茹  胡秋辉  
采用不同提取液从富硒绿茶茶渣中提取富硒绿茶硒蛋白,以正交试验确定最佳提取条件,并分析了富硒绿茶硒蛋白含量和氨基酸组成。结果表明,以0.1mol·L-1NaOH提取富硒绿茶茶渣,得到的蛋白质和硒含量最高。硒蛋白的最佳提取条件为:料液质量体积比1∶30(g/mL),提取时间16h,提取温度40℃。另外,试验还表明,喷施生物硒肥可以显著提高富硒绿茶中总蛋白和硒蛋白的含量,富硒绿茶中有30.3%的硒与碱溶性蛋白质结合;除蛋氨酸外,硒肥处理对绿茶中其他氨基酸组成和含量的影响不显著。
[期刊] 水产学报  [作者] 徐明芳  郭宝江  
螺旋藻是高光效自养原核多细胞丝状浮游性水生植物,个体仅300~500μm,属蓝藻门,颤藻科,螺旋藻属,天然产地在墨西哥和非洲乍得湖,它具有高光能转化率、高蛋白的特点,其光能转化率高达18%,植物蛋白含量为50%~70%以上,净蛋白消化率高达75%[何...
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 王盛  吴祖建  林奇英  谢联辉  
藻红蛋白(PE)具有特征性吸收光谱和荧光光谱,是一种新颖的荧光分子探针.经反复探索研究建立了盐析、离子交换层析、羟基磷灰石吸附层析和凝胶过滤层析的分离纯化方案,从珊瑚藻中分离纯化出R-藻红蛋白(R-PE),其纯度[D(565nm)/D(280nm)]高达11.
[期刊] 水产学报  [作者] 熊华伟  简少卿  贾小芳  虞舜  何宝荣  曾艳  张丽军  虞鹏程  
实验探讨了富硒酵母对斑点叉尾肝脏的毒性作用及蛋白质组学的影响,结果表明,饲养56 d后正常组和有机硒组采用原子荧光法检测硒含量均值为0.15和0.81 mg/kg。H.E染色显示有机硒组肝细胞有明显的疏松化,部分发生脂肪变。通过二维凝胶电泳结合ImageMaster软件分析,鉴定出8个表达差异蛋白质点,其中3个在有机硒组表达上调,5个在有机硒组特异表达,经液相色谱串联质谱分析鉴定,这些蛋白质分别是伴侣蛋白TCP1-亚基8、甘油醛-3-磷酸脱氢酶、4SNc-Tudor蛋白、腺苷激酶、酮糖移转酶、丙氨酰-tRNA合成酶。富硒酵母饲料对斑点叉尾肝具有明显的毒性效应,有机硒调控4SNc-Tudor...
[期刊] 水产学报  [作者] 钟立人  毋瑾超  张燕平  赵艳  王南舟  
鱼精蛋白(Protamine)是一种常与DNA结合,存在于鱼类成熟精巢中的碱性蛋白。由于其生化组成的特点,鱼精蛋白不仅具有促使细胞发育繁殖的作用,而且一旦将其分离出来,能有效抑制多种食品腐败菌的生长和繁殖[Miler1942]。同时,这种鱼精蛋白还有...
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