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[期刊] 水产学报
[作者]
谢恩义 花卫华 马家海
为缩短传统育苗时间,开发室内种质保存技术,满足大规模栽培苗种需求,实验用4%的果胶酶和2%纤维素酶混合,将来自于不同月份和不同藻体部位的宽礁膜切段,分别在相同条件下解离成原生质体,详细研究了这些不同部位和不同生长时期细胞的再生、分化和发育途径。根据体细胞后代的外形、有无假根、有无公共膜、细胞大小和排列方式,以及它们最终的发育分化趋势,将宽礁膜原生质体发育方式分为8种结果,既可形成体细胞,也可形成生殖细胞。形成体细胞的发育途径又分3种类型7种结果,即细胞团、畸形苗和正常苗3种类型,其中发育成细胞团的类型又分为规则细胞团和不规则细胞团2种结果,发育成畸形苗的类型又分为假根为主的畸形苗、有类假根的畸...
关键词：
宽礁膜 酶制剂 原生质体分离 分化 发育
[期刊] 水产学报
[作者]
谢恩义 马家海
为了开发礁膜人工育苗的新技术,以4％果胶酶和2％纤维素酶的甘露醇溶液,分离酶解经无菌处理的礁膜叶状体,在40mmol·L~(-1)CaCl_2,0.7mol·L~(-1)甘露醇,pH5.5,温度28℃,摇床速度50r·min~(-1)旋转振荡3h的条件下,1.0g湿重礁膜可获原生质体约2×10~6个。原生质体分离后依次用比重为1.030、1.026、1.022的消毒海水(添加N、P、Fe~(2+)、IAA、KB、Vit C)培养,2d后已形成明显的再生细胞壁,3～4d后细胞开始分裂,8d后形成由4～8个细胞组成的细胞团,以后原生质有不同的发育形态,较常见的是形成由一共同胶质膜包被的类似亲本的叶...
关键词：
礁膜 原生质体 酶解 分离 培养
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
吴琴生 刘宝 刘大钧
“中国春”胚性细胞悬浮系经混合酶液处理,可游离出大量原生质体(产量可达3×10~7～4×10~7/ml细胞)。这些原生质体在较简单的 MS 修饰培养基上(液体浅层或低溶点琼脂糖包埋)能够持续分裂,并以较高植板率(45%～47%)形成细胞团。将来自细胞团的微愈伤组织转至分化培养基上能够产生大量绿点;只有少数愈伤组织能够转变为结构紧密的胚性愈伤组织;并由此分化出大量根系和叶片,但未获得完整植株。文中对造成这一现象的可能原因进行了讨论。
[期刊] 水产学报
[作者]
陈昌生 章景荣 张振皎
礁膜(Monostroma nitidum)是我国重要的经济海藻之一,隶属于绿藻门,绿藻纲,石莼目,礁膜科,礁膜属。礁膜广泛分布于我国的东南沿海,生长在内湾静水处的岩石上或具有泥砂的石块上。日常所见的礁膜叶状体是配子体,为膜状,呈绿色或黄绿色,体软并具光泽。礁膜是绿藻中食用价值最高的一种,体软味美,我国南北沿海居民有食用。日本人也喜食“紫菜酱”(原料以礁膜为主,掺入少量紫菜,加入调味料,高压烹煮而成)。此外,礁膜还具有一定的药用价值,如清热化痰,利水解毒以及降低胆
关键词：
礁膜 配子体 发育 盐度 营养盐
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
刘艳丽 姚家玲
以盾叶薯蓣叶片、种子愈伤为材料,探讨了不同的酶浓度、酶解时间及渗透压对原生质体分离的影响。结果表明:生长5~10 d的叶片置于0.6%纤维素酶、0.5%果胶酶、0.9 mol/L甘露醇的酶液中、黑暗处理21 h,其原生质体产量和活力最高;悬浮培养5~10 d的愈伤组织在2.0%纤维素酶、1.0%果胶酶0、.7 mol/L甘露醇的混合酶液中黑暗处理6~8 h原生质体产量和活力最高。
关键词：
盾叶薯蓣 原生质体 分离
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
吕长平 石雪晖 徐艳 叶云
为建立良好的刺葡萄原生质体分离体系,利用原生质体融合技术对刺葡萄进行品种改良,以刺葡萄叶片、根尖和愈伤组织为材料,研究了经不同酶液组合和酶解时间处理,再经过0.45μm筛网过滤,1000r/min低速离心后分离产生原生质体的情况.试验结果表明,原生质体分离材料以愈伤组织最好,叶片次之,根尖最差;4次以内继代培养的愈伤组织,经2%纤维素酶+0.5%果胶酶+1%离析酶的酶液组合酶解8h后,原生质体的产量为5.12×106个,活力为88.57%.
关键词：
刺葡萄 原生质体 分离 酶液
[期刊] 西南农业学报
[作者]
郝玉有 梁宗琦 刘爱英
本文报道几个影响粉被马利娅霉（ＭａｒｉａｎｎａｅａｐｒｕｉｎｏｓａＬｉａｎｇ）原生质体形成和再生的重要因子。在所试的几种酶中，以单用蜗牛酶（Ｓｎａｉｌａｓｅ）６～８ｍｇ／ｍｌ于２５℃处理３～４ｈ对原生质体的制备和再生效果都较好。原生质体的形成与再生对０．６ｍｏｌ／Ｌ的三种无机盐稳定剂无选择性，均为合适的渗透压稳定剂。巯基乙醇对于原生质体的形成不是关键因素。打散菌丝时的机械拉力强度也很大程度上影响原生质体的形成。
关键词：
粉被马利娅霉,原生质体,形成,再生
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
陈文辉 郭照辉 贺月林 刘冬华
为提高姬松茸原生质体的再生率,对姬松茸原生质体再生的条件进行了优化.结果表明,将培养5 d的姬松茸种子液点种在覆以玻璃纸的菌丝生长培养基上,26℃培养5 d,用2.0%的裂解酶以pH6.0,0.8 mol/L NaCl为稳定液,在30℃下酶解6 h,可制备得到菌落数为1.8×107 cfu/mL的原生质体液.将原生质体悬液经G2过滤器过滤除菌后在GM上再生,原生质体再生率可达8.53%,残片率2.43%.
关键词：
姬松茸 原生质体 再生
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
孙玉强
根据增加棉花基因库多样性的迫切需要,棉花改良计划正在转向于多种分子育种技术的应用和资源的利用。丰富的棉花野生种(Gossypiumspp.)是栽培棉遗传改良重要的种质资源和更新资源,并成为宝贵的遗传资源库,野生棉研究利用对栽培棉的遗传改良有着重大的现实和理论意义及潜在的应用
[期刊] 水产学报
[作者]
陈昌生
礁膜配子接合及合子的附着以１０￣１２ｈ的黑暗处理为宜。光强对合子的生长发育影响较大，合子早期生长快，适宜光强为３０００￣５０００ｌｘ，合子后期生长减慢，开始转化形成游孢子囊，适当降低光照强度和缩短光照时间有利于游孢子囊的形成和游孢子的放散。这些研究结果将为礁膜人工育苗提供科学依据。
关键词：
礁膜,合子,光照,生长,发育
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
周宇波 柳俊 谢从华 蔡兴奎
试验以马铃薯试管苗叶片为原生质体来源 ,通过研究材料预处理方法对原生质体产量和质量的影响 ,培养方式及培养基中糖醇与细胞分裂和愈伤组织形成的关系 ,优化并建立了高效稳定的原生质体培养体系 ,获得了 2个双单倍体系的叶肉原生质体再生植株
关键词：
马铃薯 原生质体 培养体系
[期刊] 林业科学研究
[作者]
阙国宁 诸葛强
以牡竹属黄竹（ＤｅｎｄｒｏｃａｌａｍｕｓｍｅｍｂｒａｎｃｅｕｓＭｕｎｒｏ）的竹节及无菌苗根颈为外植体，培养于含有５ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ、０．２ｍｇ／ＬＫＴ和２００ｍｇ／ＬＬＨ的ＭＳ培养基上诱导愈伤组织，然后移至相同成份或不同浓度２，４－Ｄ的液体培养基中，进行悬浮培养，以建立分散性良好的悬浮细胞系。利用悬浮细胞和无菌苗叶片经酶解获大量原生质体，其产量分别约为每克鲜重２．５×１０５个和５×１０５个，活力均可达８０％。
关键词：
黄竹,细胞悬浮培养,原生质体分离
[期刊] 华北农学报
[作者]
吕复兵 张献龙 刘金兰
以陆地棉品种“珂字２０１”为材料，比较了ＩＡＡ＋ＫＴ和２，４－Ｄ＋ＫＴ在愈伤诱导和悬浮培养中的效应，结果表明，愈伤组织诱导中，ＩＡＡ和２，４－Ｄ表现为正效应，且２，４－Ｄ的效应强于ＩＡＡ；ＫＴ表现为负效应；胚性愈伤悬浮培养中，３种激素都表现出负效应。以胚性细胞悬浮系为材料进行了原生质体的分离和培养试验，分离原生质体的最佳酶组合为纤维素酶（ＯｎｏｚｕｋａＲ１０）３％＋果胶酶（Ｐｅｃｔｉｎａｓｅ）１．５％，原生质体培养的最佳激素组合为ＩＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ０．１ｍｇ／Ｌ，适当提高原生质体密度有利于原生质体培养。光照，温度等物理因素对原生质体培养也有明显影响。原生质体再生的愈伤组织直接在无激素的...
关键词：
陆地棉,原生质体培养,植株再生
[期刊] 湖南农业大学学报
[作者]
胡家金 甘霖 熊兴耀 肖浪涛 张秋明
由美味猕猴桃东山峰 79- 0 9品种诱导产生的 4种类型愈伤组织 ,其分离原生质体的效果不同 :A型愈伤组织分离的原生质体数量多 ,但活力较低 ;B型愈伤组织分离的原生质体不仅数量较多 ,而且活力也高 ;C型愈伤组织分离的原生质体数量少 ,但活力高 ;D型愈伤组织分离的原生质体数量较多 ,但活力低
关键词：
美味猕猴桃 原生质体分离 愈伤组织 筛选
[期刊] 中国农业科学
[作者]
龙建友 唐世荣 吴文君
【目的】对No.24菌株及其诱变株Ms-24菌株的原生质体的制备、融合、再生条件及融合子的生物活性进行了研究,探索了秦岭霉素的产量提高与融合条件的关系。【方法】采用荧光染色技术对融合子进行了标记,秦岭霉素含量的测定采用了HPLC法进行。【结果】融合后得到的3株高产秦岭霉素的融合子即为pf77,pf126和pf138菌株,其发酵产物的杀菌活性比原始No.24菌株分别提高了43.48%,60.87%和65.22%。HPLC检测发现,融合子pf77,pf126,pf138菌株发酵产物中秦岭霉素的含量与No.24菌株相比分别提高了36.59%,74.39%和91.46%。【结论】进行原生质体再生时,添...
关键词：
秦岭霉素 原生质体融合 融合子
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