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[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
利光辉 陈秀荔 王贇 林炜明 靳亚平
采用0.1% 型胶原酶和2.5g/L胰蛋白酶-0.2g/LEDTA,分别用热消化法和冷消化法消化分离家兔卵巢间质细胞,以探讨其体外培养条件和生长特点。结果表明,无论用热消化法还是冷消化法,0.1% 型胶原酶的消化效果均好于2.5g/L胰蛋白酶-0.2g/LEDTA的消化效果,前者的细胞活率在90%以上,可用于体外培养;经74μm滤网过滤后的卵巢组织分离培养出梭形和不规则形的间质细胞,且2种类型的细胞能在同一培养体系中贴壁生长。说明0.1% 型胶原酶可用于家兔卵巢间质细胞的分离。
关键词：
卵巢间质细胞 分离培养 形态观察
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
陈秀荔 靳亚平 利光辉 王赟 林炜明
为探讨子宫内膜细胞的分离与体外培养条件、生长特点及其增殖过程,采用不同消化方法进行了孕早期家兔子宫内膜细胞的消化和分离培养试验。结果表明,多数情况下采用胰蛋白酶消化获得的细胞数量少且活率低于60%,而采用1g/L胶原酶 型消化获得的细胞数量多达1×106/cm3,且活率大于90%。经74μm(200目)滤网过滤分离培养出多角形和梭形2种形态的基质细胞及铺路石状的腺上皮细胞,并均能在体外培养和传代。
关键词：
子宫内膜 体外培养 基质细胞 腺上皮细胞
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
毕台飞 宋宇轩 窦铖
【目的】研究家兔子宫平滑肌层细胞的体外培养和扩增方法。【方法】应用酶解消化法对新西兰大白兔的子宫平滑肌细胞进行体外分离和培养,并研究不同水平性腺激素对其生长的影响。【结果】酶解消化法可成功进行家兔子宫平滑肌细胞的体外培养和传代。子宫平滑肌细胞在体外的增殖受卵巢性腺激素的影响,100nmol/L雌二醇对其体外增殖有促进作用,而100nmol/L孕酮则有抑制作用。免疫组织化学结果表明,体外培养的子宫平滑肌细胞在激素作用下仍可维持其特性,在体外可传9~10代。【结论】建立了家兔子宫平滑肌细胞的体外培养和扩增方法,可为构建子宫三维结构提供充足的种子细胞。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
李瑞梅 陈秀荔 王海滨 靳亚平
为了建立一种高效的子宫细胞分离培养方法,用酶消化、过滤、离心与差速贴壁纯化相结合的方法分离培养家兔子宫细胞,分别以上皮细胞角蛋白、波形蛋白、α-平滑肌肌动蛋白等为抗原的免疫荧光对分离培养的细胞进行鉴定,并采用流式细胞仪分析细胞纯度。结果表明,家兔子宫内膜上皮细胞培养24 h后大部分贴壁,培养3 d左右形成单层细胞集落,呈角蛋白阳性,细胞圆形或椭圆形,胞质呈红色,核呈蓝色,纯度达96%以上;子宫内膜基质细胞培养0.5 h后即有贴壁,培养2 d后呈单层细胞集落状生长,呈波形蛋白阳性,细胞多边形或梭形,胞质呈红色,核呈蓝色,纯度达95%以上;平滑肌细胞培养24 h后大部分贴壁,6~7 d融合成片,呈...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
王妍 赵晓娥 杨培先 张仕强 苏利红 马保华
为了探讨小鼠卵巢颗粒细胞体外生长的特点及增殖的调控因素,分别添加2μg/mL胰岛素、50ng/mL FSH和20 ng/mL EGF的培养液培养小鼠卵巢颗粒细胞,每隔24 h对细胞进行计数,研究其对小鼠卵巢颗粒细胞增殖的影响。此外,还对培养过程中出现的卵巢颗粒细胞集落进行了AKP染色和C-kit免疫组化染色鉴定。结果显示,在培养的第4天添加EGF组和FSH组与对照组相比均具有显著的促增殖作用(P0.05);卵巢颗粒细胞集落经AKP染色和C-kit免疫组化染色均呈阳性。提示EGF和FSH对小鼠卵巢颗粒细胞具有促增殖效应,小鼠卵巢颗粒细胞具有干细胞的...
关键词：
卵巢颗粒细胞 体外培养 细胞增殖 小鼠
[期刊] 西南农业学报
[作者]
刘敏 潘敏慧 吴克军 鲁成
取家蚕4~5龄幼虫背部脂肪体,采用胰蛋白酶消化和组织块贴壁法进行离体培养,观察脂肪体细胞在体外培养过程中的变化。结果表明,家蚕脂肪体细胞在原代培养过程中出现了一批具有各种形态的脂肪前体细胞,细胞间呈管道状或网状排列等,可在体外培养条件下繁殖。最后这些细胞充满油滴后陆续死亡。该观察结果可为进一步探讨家蚕脂肪体细胞的分化及脂类代谢调节机制提供实验条件。
关键词：
家蚕 脂肪体细胞 原代培养
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
夏国良
利用胚胎卵巢体外长期培养技术研究了小鼠卵巢中卵细胞的生长发育状况。材料取自B6D2雌小鼠F1代胚胎，服龄为11．5日和13．5日。用Orcein染色法鉴别雌雄。分离出的卵巢培养12～14d。5d后换一次培养液，以后每2d换1次。培养8d后，13．5日龄胚胎卵巢中卵细胞已形成与体内相似的有规则的分布。在卵巢皮质部有大量的卵母细胞和少量体细胞，而在髓质部只有少量的卵母细胞和大量的体细胞。大量的未生长的小卵母细胞（直径＜25μm）紧密地分布在皮质的外侧，而生长印母细胞则主要分布在皮质的内侧和髓质。11．5日龄胚胎卵巢经过10～12d培养，没有形成上述分布规律，所有观察到的卵细胞都是生长中的卵母细胞。...
关键词：
小鼠胚胎 卵巢 卵细胞 生长发育
[期刊] 水产学报
[作者]
郑媛 陈松林
实验采用胰酶消化法,对半滑舌鳎脾脏、卵巢组织细胞进行离体培养,结果显示,脾脏、卵巢细胞能够在添加20%FBS,50 mmol/L 2-Me,100 U/mL青霉素,100μg/mL链霉素,1mmol/L丙酮酸钠,10 ng/mLbFGF的MEM完全培养基中生长,两种细胞的形态均为成纤维样,脾脏细胞可传至第9代,卵巢细胞至今已传至第11代。脾脏、卵巢细胞染色体中期分裂相均为正常的二倍体核型(2n=42),且具有异型W染色体。20%的血清浓度更适用于卵巢细胞传代培养。利用脂质体可将含有RFP荧光报告基因的质粒成功转入脾脏细胞中。
关键词：
半滑舌鳎 脾脏 卵巢 离体培养 传代培养
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
李健男 王爱荣 王林美 许方国 刘向国
将精制的柞蚕微孢子虫孢子用0.2mol.L-1KOH处理后,接种感染生长状态良好的柞蚕蛹卵巢初代培养细胞,调查其感染增殖规律。接种1h后,孢子的发芽率为53.8%,培养细胞的初期感染率为30%。接种24h后,可观察到裂殖体的数量急速增加,72h达最高峰。接种96h后可观察到短极丝孢子发芽后形成的空孢壳和二次感染体。接种5d后形成成熟孢子,每个细胞平均产100个孢子。在其生活史中,柞蚕微孢子虫呈双核或四偶核,并表现出孢子二型性,具有典型的Nosema属特征。
关键词：
柞蚕 微孢子虫 细胞培养 侵染与增殖
[期刊] 华北农学报
[作者]
刘海军 薛俊 徐直 张冬梅 李义海
分离方法和绵羊年龄对绵羊卵巢腔前卵泡的分离效果有显著影响。从每只羊获得腔前卵泡的总数看,机械分离法(89.5)和酶消化法(103.3)差异不显著,而正常卵泡数和正常卵泡率机械分离法(27.9,31.2％)明显高于酶消化法(19.1,18.5％);采用机械分离法,每只初情期前绵羊获得的腔前卵泡总数和正常卵泡数(125.6,35.1)均高于成年绵羊(60.4,16.1),而正常卵泡率(28.1％比26.8％)差异不显著。腔前卵泡在体外培养6 d,培养液中添加20ng/mL的IGF-I,培养结束时卵母细胞直径增幅为34.8 μm,与对照组的29.9 μm差异不显著。
关键词：
绵羊 腔前卵泡 分离 体外培养
[期刊] 西南农业学报
[作者]
王帅 陈根元 贾琦珍 邓利 张玲
为了探讨小花棘豆对家兔卵巢α－甘露糖苷酶（ＡＭＡ）的影响，进一步揭示小花棘豆的毒性作用机理。将２４只雌性家兔随机分为４组，即对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组。将小花棘豆全草粉碎后，按Ⅰ组添加１５％（含苦马豆素３０ Ｍｇ／ｋｇ）、Ⅱ组添加３０％（含苦马豆素６０ Ｍｇ／ｋｇ）、Ⅲ组添加４５％（含苦马豆素９０ Ｍｇ／ｋｇ）的比例制作混合饲料，饲喂至典型临床症状出现为止。攻毒后第１４、３５、７０天每次每组随机采集２只家兔的卵巢，检测家兔卵巢ＡＭＡ活性及表达的变化。试验组及对照组家兔卵巢高尔基体α－甘露糖苷酶Ⅱ（ＡＭＡ１）和溶酶体α－甘露糖苷酶（ＡＭＡ２）均有表达，但各试验组表达转录水平与对照组差异显著，试验Ⅰ．．．
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
郭志林 王新庄 张涌 王木 王轶敏 胡文举
采用大鼠心肌细胞条件培养基对兔胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESC)进行分离、传代培养,研究大鼠心肌细胞条件培养基对兔ESC分离培养效果的影响。结果显示,用SD大鼠心肌细胞条件培养基培养的兔ESC集落呈岛屿状生长,碱性磷酸酶染色呈强阳性,体外分化可形成类胚体状结构,贴壁的类胚体周边会出现许多分化的上皮样细胞或单个散在的细胞;常规冻存后再传代的兔ESC集落具有较为一致的生长特征,并呈现胚胎干细胞集落所特有的岛屿状生长形态;传至第5代的兔ESC集落核型正常率>75％。表明SD大鼠心肌细胞条件培养基可用于兔胚胎干细胞分离培养。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
王建起 Selvaraj J.NIMAL 曹文广
为研究体外培养的小鼠卵巢颗粒细胞Bmp8a和Bmp8b基因的表达情况,用10IU PMSG皮下注射21～23日龄健康雌性ICR小白鼠,48h后刺破卵泡获取颗粒细胞,置入10%FBS的DMEM/F12中体外培养5d,用Trizol提取总RNA,RT-PCR验证后切取目的 DNA片段进行测序。RT-PCR测序结果表明体外培养的小鼠卵巢颗粒细胞可扩增BMP-8atranscript variant 2和BMP-8b的mRNA序列,不扩增BMP-8atranscript variant 1的mRNA序列。结果显示体外培养的小鼠卵巢颗粒细胞可表达BMP-8atranscript variant 2和Bm...
[期刊] 水产学报
[作者]
郑忠明 李明云
根据哈氏仿对虾卵巢的组织学和外部形态特征 ,卵巢发育可分为六个时期 :形成期、小生长期、大生长期前期、大生长期后期、成熟期和恢复期。卵巢发育在浙江海区一年一个周期 ,产卵期为 5月至 9月 ,产卵高峰期在 6月至 7月 ,为多次产卵类型。
关键词：
哈氏仿对虾 卵巢发育 产卵类型与时间
[期刊] 西南农业学报
[作者]
蓝来娇 张媛媛 马涛 张娜 王胜坤 孙朝辉 陈晓阳 温秀军
【目的】本文为保护珍贵树种柚木(Tectona grandis)进一步利用性信息素防控柚木上主要食叶害虫—柚木野螟(Eutectona machaeralis Walker)的危害提供科学理论基础。【方法】观察了柚木野螟进行化学通讯的主要部位—雌蛾性腺以及卵巢的形态特点,并对其卵巢的发育进度进行分级。【结果】柚木野螟雌成虫性腺为腹部第8-9节节间膜上一囊状结构,腺体在自然状态下随第8腹节套缩于第7腹节内;其内部生殖器的构造包括一对卵巢和与卵巢相连的一对侧输卵管、中输卵管、受精囊及其附腺囊;依据卵巢的长短、卵粒的大小和多少将雌蛾卵巢发育分为5级:Ⅰ级(1-2日龄)、Ⅱ级(2-3日龄)、Ⅲ级(3-4日龄)、Ⅳ级(5-6日龄)和Ⅴ级(7日龄及以上)。【结论】本研究可为进一步利用昆虫性信息素防治柚木野螟提供一定的理论依据。
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