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[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
张龙涛 王舒宁 龚晖 沈恒胜 林锋强 缪伏荣
采用MTT法依次用热水、冷碱、热碱浸提姬松茸菌丝体,研究得到的3种水溶性多糖及胞外多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响.结果表明:4种多糖在不同质量浓度下可单独或协同Con A刺激淋巴细胞增殖;以0.5-0.25μg.mL-1冷碱提取的水溶性多糖,可促进LPS诱导的脾淋巴细胞的增殖(P>0.05).
关键词：
姬松茸 多糖 脾淋巴细胞 MTT法
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
范云鹏 王德云 胡元亮 刘家国 赵晓娟 袁菊 高焕 王远垒
为了观察黄芪多糖(APS)被制备成黄芪多糖脂质体后是否能够提高其生物活性,用MTT法测定了其对鸡T、B淋巴细胞增殖的影响,以APS溶液和空白脂质体作为对照。结果显示:APS脂质体在125～15.625μg.mL-1时无论是单独作用还是协同植物血凝素(PHA)作用均能显著促进鸡T淋巴细胞的增殖,并且在125～31.25μg.mL-1时,效果显著优于APS溶液和空白脂质体(P<0.05);APS脂质体在125～15.625μg.mL-1时无论是单独作用还是协同脂多糖(LPS)作用均能显著促进鸡B淋巴细胞的增殖,并且在31.25μg.mL-1的效果显著优于APS溶液和空白脂质体(P<0.05)。表明...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
苏玲 胡静 李雨婷 金周雨 杨扬 杨颜铭 宋慧
为确定树舌多糖在小鼠脾淋巴细胞上的定位,应用胺化还原法在树舌多糖(GAP)的还原性末端连接异硫氰酸荧光素(FITC),用荧光分光光度计测定其荧光取代度,xCELLigence RTCA DP全自动实时细胞分析仪检测GAP荧光标记前后生物学稳定性。流式细胞仪检测小鼠脾T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞中的GAP荧光强度,荧光显微镜观察GAP在小鼠脾淋巴细胞中的定位。结果显示:在荧光标记GAP(FITC-GAP)前后的细胞毒活性不变,并且其荧光取代率为0.90%;流式细胞仪检测发现小鼠脾T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞上的荧光信号强度与FITC-GAP加入量成正相关,荧光显微照片显示GAP定位于小鼠...
关键词：
树舌 多糖 荧光标记 脾细胞 细胞定位
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
特列克·阿依恒别克 赛福丁·阿不拉 萨比热·热夏提 况玲 德力拜尔·木拉提 阿得力江·吾斯曼
[目的]探讨骆驼刺酸性多糖 (Acidic Alhagi sparsifolia shap polysaccharide， aASP) 对小鼠脾淋巴细胞的免疫增强作用。[方法]本试验采用醇沉法提取骆驼刺多糖，采用柱层析法对骆驼刺多糖进行分离及纯化，采用苯酚硫酸法、硫酸-咔唑法和BCA微孔酶标仪法，检测糖含量、糖醛酸和蛋白含量，采用红外光谱法鉴别多糖性质。采用MTT法确定aASP对小鼠脾脏淋巴细胞的安全浓度，在安全浓度范围内500 μg·mL~(-1)、125 μg·mL~(-1)和31.25 μg·mL~(-1)三个浓度下检测单独、协同LPS和PHA对脾淋巴细胞的增殖效果；流式细胞术检测aASP对淋巴细胞亚群分化的影响；ELISA法检测aASP对淋巴细胞细胞因子分泌的影响。[结果]骆驼刺多糖提取物中多糖含量为81.8%±1.2%，糖醛酸含量为17.34%±0.75%，蛋白含量为0.54%±0.08%；红外光谱显示aASP在1746.53 cm~(-1)处有较强的吸收峰，结合糖醛酸含量判定aASP为酸性多糖。高、中、低浓度的aASP均可促进脾脏淋巴细胞增殖，协同LPS和PHA能够更显著促进B细胞和T淋巴细胞的增殖(P<0.05)。流式细胞术和ELISA检测结果显示aASP能够促进CD4~(+)T和CD8a~(+)T细胞的分化，并促进脾淋巴细胞分泌IFN-γ、TNF-α、IL-6和IL-4。[结论]aASP可以增强小鼠脾脏淋巴细胞的增殖，诱导小鼠脾脏T淋巴细胞产生Th1及Th2混合型免疫应答，免疫细胞偏向CD4~(+)T细胞分化。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
杨姗姗 张秀娟
本文通过观察荷瘤小鼠淋巴细胞内钙离子浓度的变化,初步探究Ca2+作为第二信使在半枝莲多糖诱导淋巴细胞增殖过程中调控作用。采用荧光探针Fura-3/AM对细胞内的Ca2+进行标记,在激光共聚焦显微镜下观察细胞的荧光强度变化。结果表明,半枝莲多糖各剂量组与空白对照组比较均对脾淋巴细胞中钙离子的浓度有显著提高作用(P<0.01),并呈现剂量依赖关系,而与阳性组比较各剂量组均低于阳性组,低、中剂量组有差异(P<0.05)。从试验结果看出,胞内Ca2+浓度的提高能促进淋巴细胞的增殖。
关键词：
多糖 淋巴细胞 钙离子
[期刊] 西南农业学报
[作者]
谭成明 房慧伶 胡庭俊
为探讨山豆根多糖对地塞米松诱导的小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞凋亡的影响,通过腹腔注射地塞米松建立小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞凋亡模型,并采用琼脂糖凝胶电泳、透射电子显微镜和流式细胞术进行观察和检测。结果表明,除空白对照组外,其余各组的琼脂糖凝胶电泳图均出现梯状条带,而且透射电子显微镜观察凋亡对照组和不同剂量山豆根多糖组均可见典型的凋亡特征,胸腺和脾脏淋巴细胞的胞核染色质凝聚呈半月形、C形及凋亡小体,可见巨噬细胞吞噬凋亡小体。流式细胞仪分析显示,不同剂量山豆根多糖组凋亡率与凋亡对照组凋亡率比较有显著性差异(P
关键词：
山豆根多糖 小鼠 淋巴细胞 细胞凋亡
[期刊] 农业现代化研究
[作者]
李丽立 张彬 朱南山 印遇龙 彭慧珍 邱细敏 唐志如
为探讨多糖对早期断奶仔猪淋巴细胞增殖与细胞因子的影响,选用21d龄健康杜×长×大断奶仔猪(5.30±0.25kg)25头,随机分为5个组,每组5头,分别饲喂玉米-豆粕型基础日粮(CR)、基础日粮+0.3%白术纯多糖(PPAM)、基础日粮+0.6%复合粗多糖(CCP)、基础日粮+0.6%白术粗多糖(CPAM)、基础日粮+抗生素(15%金霉素150mg/kg+4%黄霉素50mg/kg)(ANT),试验期为14d。结果显示:PPAM、CCP能提高血清中TNF的含量(P<0.05),同时PPAM、CCP、CPAM也有提高淋巴细胞增殖和IL-2的趋势。表明饲料中添加PPAM、CCP能够有效提高早期断奶仔...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
张玲 胡庭俊 陈炳全
马尾藻具有很高的食用和药用价值,分离提取马尾藻多糖(Sargassum polysaccharides,SP),对其理化性质进行分析;研究马尾藻多糖对氧化应激态鸡脾脏淋巴细胞内谷胱甘肽(GSH)和一氧化氮(NO)分泌水平及淋巴细胞体外增殖的影响。结果表明:马尾藻多糖提取率为152.8 g/L;马尾藻多糖浓度为100、200、400 mg/L时,能显著促进体外培养的鸡脾脏淋巴细胞增殖;H2O2浓度为50μmol/L时,能诱导体外培养的鸡脾脏淋巴细胞处于氧化应激状态。马尾藻多糖浓度为400 mg/L,与细胞共孵育4 h或12 h,能显著增加氧化应激态细胞内GSH含量;共孵育培养8 h,能显著降低氧...
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
杨桂红 黄一帆 林珊珊 祁保民 王全溪
分别采用基因克隆技术、细胞分离培养技术和四甲基偶氮唑蓝(MTT)法首次克隆了番鸭神经肽S(NPS)的基因,并探讨NPS对番鸭脾淋巴细胞体外增殖能力的影响.基因测序结果显示,所克隆的番鸭NPS c DNA序列为181 bp,与其他物种NPS的同源性极高,其中与鸡NPS的亲缘关系最近.MTT法研究结果显示:0.01-1000 nmol·L-1NPS可促进番鸭脾淋巴细胞体外的增殖,其中以10 nmol·L-1NPS的促进效果最优;10 nmol·L-1NPS协同脂多糖(LPS)及1 nmol·L-1NPS协同植物血凝素(PHA)对促进脾淋巴细胞增殖的效果最好.上述结果表明,番鸭NPS基因在进化上是高...
关键词：
番鸭 神经肽S 基因克隆 脾淋巴细胞增殖
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
张佩君 白丽丽 乔琦 陈德坤
无菌采取犬血、肝素抗凝、分离出红细胞,制备不同浓度的红细胞悬液,接种24孔板中进行培养,在培养不同时间分别收集红细胞培养上清液,采用淋巴细胞增殖转化试验,检测其单独及协同不同丝裂原(PHA-P、ConA和LPS)对犬淋巴细胞增殖转化的影响,淋转结果用MTT法测定。结果显示,无论单独或是协同不同丝裂原(PHA- P、ConA和LPS),红细胞培养上清液对淋巴细胞均有明显的促增殖转化作用(P
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
刘冬华 刘红 汪彬 张爱群 李咏梅
以姬松茸深层发酵菌丝体中的主要活性物质粗多糖的产量为评价指标,对姬松茸液体深层发酵培养的条件进行了研究,分别考察了碳源、氮源、碳源配比、氮源配比、微量元素、装液量、培养温度、pH值、培养时间对姬松茸液体深层发酵的影响.结果表明,在消前pH自然、500 mL锥形瓶装液量80 mL、培养温度25℃、转速200 r/min的条件下培养10 d,姬松茸的发酵培养效果最佳,胞内多糖产量可达7.028 mg/mL.
关键词：
姬松茸 菌丝体 生物量 多糖 胞内多糖
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
阚飞 孙捷 田路旸 李超 徐明旭 房云 代陈胜 张克云
以中国药用昆虫白星花金龟(Protaetia brevitarsis)幼虫(蛴螬)为研究对象,通过匀浆、乙醇沉淀、Sevag法去除蛋白,得到蛴螬总多糖,其得率为57%。用苯酚硫酸法进行多糖浓度测定。经MTT法检测表明,终质量浓度为5和20μg.mL-1的总多糖对小鼠脾细胞的生长增殖率分别为48.8%和62.2%,对巨噬细胞生长增殖率分别为240%和516%。用DEAE-Sephadex A-25、LPLC-Sephadex G-75层析法分离纯化总多糖,得到5种蛴螬多糖,其中相对分子质量分别为42 000和26 000的2种蛴螬多糖对脾细胞生长增殖率较高,终质量浓度为5μg.mL-1的该2种多...
关键词：
蛴螬 多糖 免疫细胞增殖
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
王桂芹 芦洪梅 韩宇田 牛小天 李子平 赵朝阳 秦贵信
【目的】探讨丙氨酰-谷氨酰胺(Ala-Gln)对免疫抑制和应激建鲤体外培养淋巴细胞增殖的调控作用。【方法】通过对建鲤注射环磷酰胺和皮质醇来建立免疫抑制和应激模型,以注射生理盐水为对照,分离头肾、脾脏和外周血淋巴细胞进行体外培养,测定培养液中不同浓度Ala-Gln(0.0,2.0,4.0,6.0,8.0和10.0mmol/L)对淋巴细胞转化率的影响。【结果】免疫抑制模型及应激模型中,建鲤头肾、脾脏和外周血的淋巴细胞转化率均显著低于对照组(P
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
邱妍 崔保安 胡元亮 张红英 王远阁
450羽14日龄蛋公鸡随机均分成9组,用鸡新城疫-传染性支气管炎二联(NDV-IBV)弱毒苗首次免疫的同时,8个试验组分别肌肉注射高、低剂量的黄芪多糖、板蓝根多糖、牛膝多糖和山药多糖溶液,对照组注射生理盐水,每天1次,连续3 d。28日龄用NDV-IBV灭活油乳苗再次免疫。各组分别于首次免疫后第7、14、21、28、35、42和49天随机抽取8羽翼下静脉采血,分离血清,用微量法测定新城疫血凝抑制(HI)抗体效价;于首次免疫后第10、20、30、40和50天每组随机抽取5羽心脏采血,分离淋巴细胞,分别用MTT法和流式细胞仪双染色法测定淋巴细胞增殖和CD4+、CD8+T淋巴细胞含量的动态变化。结果...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
谭智杰 张巧毅 赵柔 王常贵 林元山
以不同碳源、氮源、pH、温度、接种量、转速、时间为单一变量，通过单因素试验和Plackett–Burman试验从7个因素中筛选显著性因素，对筛选出的显著性因素进行最陡爬坡试验，采用Box–Behnken试验探究茯苓菌液体发酵产胞内多糖的最优条件。结果表明：接种量、p H、葡萄糖质量分数和酵母膏质量分数是茯苓菌液体发酵产胞内多糖的显著性因素；在接种量9%、pH 5.7、葡萄糖质量分数4%、酵母膏质量分数1%、时间7 d、温度28℃、转速170 r/min的条件下，茯苓胞内多糖的含量为(5.82±0.18) g/L，生物量为(14.63±0.21) g/L，分别为未优化前的1.6倍和2.0倍。与常规栽培相比，茯苓菌液体发酵产胞内多糖的时间大大缩短，减少了松材消耗，且茯苓菌液体发酵培养基成本低廉。
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