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[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 程蕾  王定发  向敏  胡修忠  刘晓华  凌明湖  夏瑜  
为研究干扰素刺激基因IFITM1和RSAD2在奶牛早期妊娠阶段外周血中的表达规律,于人工授精后0、14、18、21和28d采集奶牛外周血,利用荧光定量PCR检测IFITM1和RSAD2的相对表达量,采用化学发光法同步检测血清中孕酮浓度;并深入分析自然发情和同期发情2种状态下青年母牛外周血中RSAD2基因的相对表达及其在18d和21d外周血白细胞亚类(淋巴细胞、NK细胞、单核细胞)中的相对表达。结果表明,妊娠牛与空怀牛血清孕酮在21d和28d呈显著差异。人工授精后14d和18dIFITM1基因在妊娠牛与空怀牛中都显著下调,但在空怀牛与妊娠牛间差异不显著。妊娠牛外周血中RSAD2于21d显著上调;...
[期刊] 渔业科学进展  [作者] 姜燕   刘欣   徐永江   崔爱君   王滨   刘新富   柳学周   薛致勇  
为了研究黄条(鱼师) (Seriolaaureovittata)视觉和听觉等器官关键调控基因在早期发育过程的表达特性,本研究克隆了黄条(鱼师) otx2和eya1的开放阅读框(ORF)序列,解析了其序列及系统进化的特性和时空表达特征。结果显示,otx2的ORF长度为876 bp,编码291个氨基酸;eya1的ORF长度为1 962 bp,编码653个氨基酸。otx2和eya1均具有广泛的组织分布特性,其中,otx2在眼组织中表达量最高,脑次之,均显著高于其余组织(P<0.05);eya1在垂体中表达量最高,其次为卵巢,均显著高于其余组织(P<0.05)。在胚胎发育过程中均可检测到otx2和eya1的表达,且均在胚胎发育后期表达上调;其中,otx2在孵化期达到峰值,eya1在胚体包卵黄4/5期达峰值。在仔稚幼鱼时期均可追踪到otx2和eya1的表达,且在前期相对表达量较高;其中,otx2的表达呈先上调后下调的趋势,在20 dph (days post-hatching)时显著最高(P<0.05),eya1的表达量呈下调趋势,在1 dph时表达量显著最高(P<0.05)。该研究为认识otx2和eya1在黄条(鱼师)感知器官发育过程中可能的生理功能和研究感知器官的发育调控机制提供了分子认知基础。
[期刊] 渔业科学进展  [作者] 姜燕   刘欣   徐永江   崔爱君   王滨   刘新富   柳学周   薛致勇  
为了研究黄条(鱼师) (Seriolaaureovittata)视觉和听觉等器官关键调控基因在早期发育过程的表达特性,本研究克隆了黄条(鱼师) otx2和eya1的开放阅读框(ORF)序列,解析了其序列及系统进化的特性和时空表达特征。结果显示,otx2的ORF长度为876 bp,编码291个氨基酸;eya1的ORF长度为1 962 bp,编码653个氨基酸。otx2和eya1均具有广泛的组织分布特性,其中,otx2在眼组织中表达量最高,脑次之,均显著高于其余组织(P<0.05);eya1在垂体中表达量最高,其次为卵巢,均显著高于其余组织(P<0.05)。在胚胎发育过程中均可检测到otx2和eya1的表达,且均在胚胎发育后期表达上调;其中,otx2在孵化期达到峰值,eya1在胚体包卵黄4/5期达峰值。在仔稚幼鱼时期均可追踪到otx2和eya1的表达,且在前期相对表达量较高;其中,otx2的表达呈先上调后下调的趋势,在20 dph (days post-hatching)时显著最高(P<0.05),eya1的表达量呈下调趋势,在1 dph时表达量显著最高(P<0.05)。该研究为认识otx2和eya1在黄条(鱼师)感知器官发育过程中可能的生理功能和研究感知器官的发育调控机制提供了分子认知基础。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 王继英  王彦平  郭建凤  王怀中  林松  张印  武英  
【目的】中国地方猪种在抗病性和免疫力方面优于国外猪种,但是对中外猪种抗病力差异的遗传基础和免疫机理却了解甚少。有推测不同品种猪对疾病的抵抗力不同可能在细胞因子和受体的表达水平上有所反映。本研究以抗病力强的大蒲莲和抗病力相对较弱的长白猪的断奶仔猪为研究对象,对6个具有重要功能的细胞因子(促炎症细胞因子(IL8和TNFα),抗炎症细胞因子(IL10),干扰素调节因子(IRF3)和干扰素(IFNA和IFNG))和1个最具代表性的模式识别受体(TLR4)基因在大蒲莲和长白仔猪群体外周血液中的基因表达量进行检测,并对各基因进行品种和母猪效应分析,为了解中外不同猪种的免疫水平奠定基础。【方法】采集大蒲莲(...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 蔡亚非  李莲  刘庆华  杜娟  徐世永  刘红林  王根林  
用流式细胞记录仪检测分析奶牛在夏季 (日平均气温为 37 5℃)、夏末 (日平均气温 26 5℃) 和冬季 (日平均气温 5 5℃) 时奶牛外周血淋巴细胞DNA含量, 统计细胞所处的分裂时期及淋巴细胞的凋亡率, 并通过荧光定量PCR分析上述时期外周血淋巴细胞bax α基因mRNA表达量。结果显示: (1) G2 /M期细胞和淋巴细胞增殖指数随温度降低而呈明显的下降趋势, 5 5℃时比例最低, 相对于其他两个温度条件差异显著 (P
[期刊] 中国水产科学  [作者] 陈素华  吴杨平  陈爱华  张雨  曹奕  田镇  张志东  李秋洁  
细胞周期依赖性蛋白激酶(cyclin dependent kinases, CDKs)是调控真核生物细胞周期的重要家族基因,其中CDK1是促进细胞生长和增殖的重要激酶之一。为探究细胞周期素依赖性激酶1(CDK1)在选育群体红文蛤和自然群体黄文蛤(Meretrix meretrix)苗种生长发育中的作用,本实验采用RACE技术克隆获得文蛤CDK1基因(MmCDK1)的cDNA序列,该基因cDNA序列全长为1623 bp,其中包括353 bp的5′末端非翻译区(UTR),370 bp的3′ UTR,900 bp的开放阅读框(ORF),共编码299个氨基酸。预测氨基酸序列具有较高的保守性,包含STKc-CDK1-euk结构域、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族特征序列DLKPQN和G/V-T/S-X-X-Y/F-X-A-P-E、与cyclin B结合相关的保守序列PSTAIRE,以及与ATP相结合的保守序列GXGXXG和K33。组织表达结果显示,MmCDK1基因在各个组织中广泛表达,其中性腺中的表达量最高,其次是外套膜。不同条件(光照、饵料)培育实验结果显示,红文蛤苗种表现出比黄文蛤苗种更快的生长速度;各养殖条件下MmCDK1基因的差异表达结果与生长数据呈正相关关系,各组中红文蛤MmCDK1的表达量显著高于黄文蛤(P<0.05)。由此推测,MmCDK1基因在文蛤苗种生长中发挥重要作用,且选育后的红文蛤较黄文蛤拥有更好的生长性能。本实验将为进一步研究文蛤生长发育相关机制提供参考,也为文蛤新品种选育奠定理论基础。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 杨利国  刘荣军  王元兴  
选择患持久黄体、卵巢静止和慢性子宫内膜炎的奶牛各10头,从每种疾病类型中各选半数牛于宫内灌注复方缩宫素乳剂,其余患牛用生理盐水处理作为对照。各组患牛于处理当天和处理后第1,3,5,7,10,14和21d采血,用放射免疫测定方法分析血中17β-雌二醇(E2)和孕酮(P4)水平。结果发现,持久黄体患牛在处理后血中E2水平不断升高,P4水平逐渐降低;卵巢静止患牛在处理后血中E2和P4水平均升高;慢性子宫内膜炎患牛在处理前血中E2和P4水平介于前两种病牛之间,处理后血中E2水平逐渐升高,P4水平逐渐降低。这些结果证明,复方缩宫素乳剂具有溶解黄体和诱导发情作用
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 陈洁  鲍宝龙  
在眼睛发育过程中,Paired Box 6(pax6)和T-Box Transcription Factor 3(tbx3)界定了视网膜发生区域,Retinal Homeobox Protein 1(rx1)确定了视杯的形成范围。本研究调查了pax6、tbx3和rx1基因是否在左右眼睛发生区域的表达范围存在差异。荧光定量PCR显示,牙鲆pax6、tbx3和rx1基因从受精后20 h开始表达。RNA整体原位杂交检测发现pax6基因在牙鲆胚胎左右眼睛发生区域表达,左侧表达范围较右侧略大,同时pax6在前脑以及神经管处也有表达;tbx3和rx1基因在牙鲆胚胎左右眼睛发生区域表达,左右侧表达范围无明显...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 邢晋祎  张宁波  
为了解析鸡胚发育过程中NANOG、POUV和TWIST2基因的调控作用,利用荧光定量RT-PCR方法,研究NANOG、POUV和TWIST2基因在孵化1~6d(E1~E6)的整体胚胎和孵化15和18d(E15、E18)鸡胚的大脑、心脏、肝脏和左侧大腿肌肉组织中的表达谱。结果表明,1)NANOG基因的表达水平在E2~E6整胚和E15、E18胚期的大脑、心脏、肝脏和腿肌中的表达水平均极显著低于E1时期(P<0.01)。2)在鸡胚发育的整胚E1~E6和E15、E18时期的大脑、肝脏、心脏和腿肌中,POUV基因的表达水平基本呈现逐渐降低趋势,且从E3时期后均显著低于E1时期(P<0.05或P<0.01...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 毋玉婷  郭宝英  祁鹏志  吕振明  吴常文  史会来  平洪领  
Phb2是抗增殖蛋白(Prohibitin)的一个亚型。本研究利用RACE技术首次获得了曼氏无针乌贼(Sepiella japonica)Phb2基因的全长序列,该序列全长为1283 bp,其中5′非编码区(5′-UTR)150 bp,3′非编码区(3′-UTR)236 bp,开放阅读框(ORF)897 bp,预测编码298个氨基酸。序列分析表明,曼氏无针乌贼Phb2基因编码的蛋白无信号肽,第2042位氨基酸为跨膜结构,包含1个PHB家族的结构域。采用荧光定量PCR技术检测其在曼氏无针乌贼不同生长时期(幼
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 李慧  徐义平  鲍宝龙  
组蛋白去乙酰化酶(HDACs)可通过调节染色质结构和抑制特异性转录因子活性来调控细胞生长和分化。鉴于HDACs在蝌蚪变态发育过程中的作用,本研究克隆了牙鲆(Paralichthys olivaceus)HDAC1基因全长cDNA序列,并调查了其在牙鲆变态前和变态阶段的空间表达。牙鲆HDAC1全长cDNA序列为2 540 bp,包含长度为126 bp的5'UTR,1 470 bp的ORF和944 bp的3'UTR。HDAC1基因在牙鲆变态前以及变态阶段均有表达,这和蝌蚪中仅在变态前表达的现象不同。HDAC1在冠状幼鳍上的表达是随着幼鳍原基的生长发育逐渐增强的,直至冠状幼鳍分化成形后,基因表达减弱...
[期刊] 渔业科学进展  [作者] 马骞  庄志猛  冯文荣  柳淑芳  
转录因子Runx2和Osterix在高等脊椎动物骨骼发育的调控过程中具有重要作用。本研究以Runx2和Osterix基因作为研究对象,利用实时荧光定量PCR技术分析了两个转录因子在半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)成鱼的组织表达分布及其在早期发育阶段的表达水平变化。研究结果显示,Runx2和Osterix在半滑舌鳎成鱼的13个组织中具有较广泛的分布,并在脾组织中表达量最高,在背鳍、脑等组织中次之,在肝、肠、胃等组织中仅有微弱的表达。在半滑舌鳎早期发育阶段(卵期、仔鱼、稚鱼和幼鱼),Runx2和Osterix的时序性表达特征如下:1)孵化前,Runx2在卵裂期与原肠期的表达...
[期刊] 渔业科学进展  [作者] 马骞  庄志猛  冯文荣  柳淑芳  
转录因子Runx2和OsteRix在高等脊椎动物骨骼发育的调控过程中具有重要作用。本研究以Runx2和OsteRix基因作为研究对象,利用实时荧光定量PCR技术分析了两个转录因子在半滑舌鳎(CynOglOssus semilaevis)成鱼的组织表达分布及其在早期发育阶段的表达水平变化。研究结果显示,Runx2和OsteRix在半滑舌鳎成鱼的13个组织中具有较广泛的分布,并在脾组织中表达量最高,在背鳍、脑等组织中次之,在肝、肠、胃等组织中仅有微弱的表达。在半滑舌鳎早期发育阶段(卵期、仔鱼、稚鱼和幼鱼),Runx2和OsteRix的时序性表达特征如下:1)孵化前,Runx2在卵裂期与原肠期的表达...
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 王燕飞  徐义平  鲍宝龙  
蛋白生物素酰化发挥重要的生理作用,羧化酶和组蛋白生物素酰化主要依赖于羧化全酶合成酶(holocarboxylase synthetase,HCS)。首次克隆了HCS基因全长序列2 942 bp,其编码829个氨基酸,含有BirA功能结构域。利用RNA整体原位杂交技术,检测HCS基因在斑马鱼早期发育过程中的空间表达,发现HCS基因在脑、脊髓、鳃、心脏、肠道和肌肉等组织中表达。在肌肉组织中,HCS基因在初孵仔鱼的肌节表达,而在孵化后第6天仔鱼中,HCS基因则集中在每一肌节的中部表达。这些结果,为进一步了解HCS的功能奠定了基础。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 胡婕  苗向阳  冯浩咏  
【目的】研究早期胚胎发育基因,筛选猪早期体内发育胚胎和体外孤雌激活胚胎的差异表达基因,探讨影响胚胎发育的分子基础。【方法】分别采用孤雌激活和手术(猪体内发育)的方法收集2细胞、4细胞、8-16细胞时期的胚胎,利用SPEDDRT-PCR挑选不同时期的差异表达产物,将所获得的产物按照片段大小分离纯化后通过反向Northern杂交去除假阳性条带。将阳性条带克隆入T载体中,经过PCR鉴定后挑选其中的阳性克隆进行测序。【结果】筛选了11个代表不同时期表达差异的cDNA片段,编号为DDD1-DDD11。经过与GenBank数据进行同源性分析,发现其中DDD3、DDD11没有同源序列信息,提交数据库获得Ge...
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