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[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
杨永新 王加启 卜登攀 张乐颖 李珊珊 张春林 周凌云
为分析初乳与常乳乳蛋白的表达变化,揭示乳蛋白分泌及乳腺易感疾病的机理,采用二维凝胶电泳结合液相色谱串联质谱的方法分析了产后第1天、第7天和第21天牛乳中蛋白表达变化。结果发现,相对于第7天和第21天牛乳蛋白的表达丰度,第1天牛乳蛋白中有5个蛋白表达量增加;而第7天与第21天牛乳蛋白表达无变化。且第1天牛乳蛋白表达量增加的是具有免疫活性的免疫球蛋白M和G以及运输功能的白蛋白和转铁蛋白等。结果表明由初乳向常乳转换过程中,这些乳蛋白表达量的降低可能与乳腺易感乳房炎等疾病相关。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
杨永新 张勇 周雷 程广龙 陶金忠 赵兴绪
【目的】通过分析临床健康和乳房炎奶牛乳腺组织膜蛋白的差异表达,以期在蛋白质水平探索奶牛乳房炎的发生机理。【方法】采用二维凝胶电泳技术分离了临床健康和乳房炎奶牛的乳腺组织膜蛋白,经考马斯亮蓝染色后PDQuest 7.4软件匹配、检测凝胶中差异表达的蛋白点,对12个差异蛋白点采用高效液相色谱串联离子阱质谱分析,SEQUEST软件搜索NCBInr数据库。半定量RT-PCR分析差异表达蛋白的mRNA水平。【结果】12个差异蛋白点鉴定为11种蛋白质,其中9个蛋白点在临床型乳房炎奶牛乳腺组织膜蛋白中表达量上调而3个蛋白点表达量下调,主要涉及细胞膜骨架系统、信号转导、物质结合和传递等生物学功能。半定量RT-...
关键词：
奶牛 乳房炎 乳腺膜蛋白 蛋白质组
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
尹华彪 陈杰 韩正康
研究了22头黑白花奶牛分娩后前7d 初乳蛋白各组分浓度的逐日变化以及初乳蛋白对7头新生公犊.生长的影响。结果表明:初乳蛋白各组分浓度呈逐日递降趋势;初乳总蛋白(TP)、酪蛋白(CN)和乳清蛋白(WP)浓度递降率分别为100,0.25和1.15;初乳乳清中 x-乳清蛋白(x-LA)、β-乳球蛋白(β-LG)、免疫球蛋白 G(IgG)、血清白蛋白(SA)和乳转铁蛋白(LF)浓度递降率分别为1.03,0.98,1.27,1.46和1.30.新生黑白花公犊生长速度与其摄入初乳蛋白水平密切相关.
关键词：
黑白花奶牛 初乳蛋白组分 新生犊牛 生长
[期刊] 中国农业科学
[作者]
杨永新 王加启 卜登攀 李珊珊 周凌云
【目的】分析不同体细胞数牛乳中乳蛋白的表达变化。【方法】采用二维凝胶电泳技术分离了低体细胞数、中体细胞数、高体细胞数和临床乳房炎的牛乳蛋白,考马斯亮蓝G-250溶液染色,液相色谱串联质谱检测表达变化的蛋白点。【结果】在中体细胞数和高体细胞数乳中酪蛋白水解产物和白蛋白增加,在临床乳房炎牛乳中α-、β-和κ-酪蛋白几乎全部水解,而白蛋白、转铁蛋白、纤维蛋白原β链和结合珠蛋白等乳清蛋白表达量增加。【结论】展示了不同体细胞数牛乳中乳蛋白的凝胶表达图谱,同时表明牛乳酪蛋白的水解程度随着体细胞数的增加而增加,至严重临床乳房炎时牛乳中酪蛋白几乎全部水解而乳清蛋白急剧增加。
关键词：
奶牛 体细胞数 乳蛋白 质谱检测
[期刊] 中国农业科学
[作者]
张勇 杨永新 赵兴绪
【目的】采用比较蛋白质组学技术分析、检测了临床健康与乳房炎奶牛乳腺组织中的差异表达蛋白,以寻找药物治疗目标,探讨奶牛乳房炎的发生机理。【方法】采用二维凝胶电泳分离临床健康与乳房炎奶牛的乳腺组织蛋白,考马斯亮蓝染色,PDQuest7.4软件自动匹配检测差异表达蛋白斑点,高效液相色谱串联离子阱质谱分析鉴定。【结果】凝胶图谱中检测出15个差异蛋白斑点,串联质谱分析后有12个蛋白斑点可搜索到相应的结果,对应于10种蛋白质,主要涉及结合、运输和催化活性等分子功能,参与细胞、代谢及生物调节等生理过程。【结论】临床健康与乳房炎奶牛的乳腺组织中蛋白的表达模式存在差异,表达差异蛋白与奶牛乳房炎的发生相关,对其分...
关键词：
奶牛 乳房炎 乳腺组织 蛋白质组
[期刊] 中国农业科学
[作者]
杨永新 赵兴绪 张勇 陶金忠
【目的】检测和分析临床型乳房炎与正常奶牛血浆中差异表达的蛋白质。【方法】用二维凝胶电泳分离血浆蛋白,凝胶用硝酸银染色和考马斯亮蓝染色,PDQuest7.4软件自动检测分析差异表达蛋白斑点并经高效液相色谱串联离子阱质谱鉴定。【结果】凝胶图谱分析后得到3个差异蛋白斑点,鉴定为2种蛋白质(结合珠蛋白前体和乳腺球蛋白)。结合珠蛋白前体在临床型乳房炎奶牛血浆中表达量增加,可作为乳房炎诊断标记分子;而乳腺球蛋白的表达量下调。【结论】临床型乳房炎与正常奶牛的血浆中蛋白质的表达存在差异,对差异表达蛋白质的研究有利于探索机体的生理病理状态,可为疾病的诊断和治疗提供全面的信息。
关键词：
奶牛 临床型乳房炎 血浆 差异表达蛋白质
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
李卫真 邹思湘 汤艾非 韩正康
测定了８头太湖猪（二花脸）分娩后一周奶中乳糖和蛋白质浓度，并用电泳胶扫描法定量其各种蛋白组分。结果显示，脱脂奶中蛋白质浓度随泌乳进行而降低，乳糖浓度变化与之呈反相关（ｒ＝－０．８６８，Ｐ＜０．０１）。分娩后第１ｄ免疫球蛋白（Ｉｇｓ）最高，之后急剧下降。但分娩后前４ｄＩｇｓ浓度，以及一周内总酪蛋白（ｔＣＮ），α－乳清蛋白（α－ＬＡ）和β－乳球蛋白（β－ＬＧ）的浓度，前３ｄ清蛋白（ＳＡ）和乳铁蛋白（ＬＦ）的浓度都显著高于相应组分在第２０ｄ的浓度（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。在２０头二花脸和１６头杂交猪（大白×二花脸）奶中观察到ａ，ｂ和ｄ三种特异高分子量蛋白，并有ｂ，ｄ，ａ＋ｂ，ｂ＋ｄ和ａ＋ｄ等５...
关键词：
猪种 二花脸猪 初乳 奶蛋白
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
周涛 付力立 罗正中 马莉 杜振隆 姚学萍 沈留红 余树民 严作廷 曹随忠
【目的】基于非靶向代谢组学技术,对荷斯坦奶牛初乳和常乳中的代谢物进行鉴定与分析。【方法】选择年龄、体况及预产期相近、胎次相同的健康围产期经产荷斯坦奶牛12头,分别于分娩后1 h和21 d采集乳汁,离心并收集乳清,依次记为初乳组(C＿0)和常乳组(C＿21)。采用代谢组学技术对初乳组和常乳组乳清进行分析,结合正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)和学生t检验,以变量投影重要度(variable importance in the projection,VIP)>1,P<0.05为标准筛选差异代谢物,并对筛选出的差异代谢物进行聚类分析、显著差异代谢物筛选和KEGG通路分析。【结果】在荷斯坦奶牛初乳组(C＿0)和常乳组(C＿21)共筛选到97种差异代谢物,通过聚类热图可以看出,大多数代谢物在初乳组的含量高于常乳组;差异代谢物随机森林图显示,排名靠前的9种显著差异代谢物分别为乌头酸、柠康酸、龙胆酸、泛酸、牛磺酸、氧戊二酸、柠檬酸、6’唾液酸乳糖和精胺。KEGG通路富集分析显示,8条主要的代谢通路分别为酮体的合成与降解、牛磺酸与次黄嘌呤代谢、丙酮酸代谢、嘌呤代谢、嘧啶代谢、氨基糖与核苷酸糖代谢、三羧酸循环和丁酸代谢。【结论】荷斯坦奶牛初乳中脂质、氨基酸和核苷酸代谢物的含量高于常乳,而常乳中糖类代谢物含量高于初乳,初乳与常乳中代谢物水平的差异为后续代谢物机制的研究奠定了理论基础。
关键词：
奶牛 代谢组学 牛初乳 牛常乳 代谢物
[期刊] 华北农学报
[作者]
高娜 徐庚全 王萌 王立斌 邱山桐 余震 余四九 潘阳阳
利用蛋白质组学的方法对娟犏牛奶与牦牛奶乳清和乳脂球膜(MFGM)相同蛋白进行分析，而娟犏牛产奶量高于牦牛，若娟犏牛奶的功能与牦牛奶相近，将提高当地牧民的经济水平。通过离心法分离乳清与乳脂，分别提取蛋白；通过串联质量标签(TMT)技术，进行蛋白质定性与定量分析得到相同蛋白；对相同蛋白进行GO功能注释、KEGG代谢通路、蛋白互作等生物信息学分析。结果表明，利用标记定量蛋白质组学技术在娟犏牛奶与牦牛奶中共鉴定到651种乳清蛋白和990种MFGM蛋白，筛选出298种乳清相同蛋白，283种MFGM相同蛋白。GO注释分析发现，鉴定的娟犏牛奶与牦牛奶乳清相同蛋白主要参与的生物过程是内肽酶活性的负调控、免疫应答和免疫球蛋白产生，MFGM相同蛋白参与的生物过程主要是内肽酶活性的负调控和补体激活，经典途径乳清与MFGM相同蛋白定位的细胞成分主要是胞外间隙和胞外区，参与的分子功能主要是三磷酸鸟苷(GTP)酶活性、GTP结合。KEGG富集分析发现，娟犏牛奶与牦牛奶乳清与MFGM相同蛋白主要富集的途径包括补体和凝血级联反应、吞噬体和内质网中的蛋白加工。娟犏牛奶和牦牛奶中丰度较高的蛋白显示出其在免疫和促进营养吸收等方面表现优异，然而，娟犏牛产奶量高于牦牛，这将增加当地牧民的经济收入，也为人们提供更多有价值的高原奶制品。
[期刊] 华北农学报
[作者]
陈静廷 卜登攀 马露 杨晋辉 李发第
旨在研究不同物种泌乳奶牛牛乳中活性物质免疫球蛋白和乳铁蛋白绝对含量的特性。采用双抗夹心ELISA法对牦牛乳、水牛乳和荷斯坦奶牛乳乳样中主要免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)和乳铁蛋白(Lf)含量进行了定量测定并做出了相关性分析。结果显示,牦牛乳、水牛乳和荷斯坦奶牛乳乳样中免疫球蛋白和乳铁蛋白活性质量浓度与吸光值存在良好的线性关系,各标准曲线方程的R均大于0.99。不同物种牛乳中IgA、IgG、IgM和Lf的绝对含量差异显著(P<0.05)。同一品种牛乳中免疫球蛋白IgA、IgG、IgM和Lf的绝对含量显示出不同的个体性差异。除荷斯坦奶牛乳乳样中IgA与IgM呈现较低程度的负相关外,牛乳中Ig...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
杨晓宇 李娜 杨华 陈锦屏 张富新
研究了酸、碱、胃蛋白酶、胰蛋白酶对羊初乳中免疫球蛋白IgG稳定性的影响。结果表明,IgG在pH 值为5．0～10．0时十分稳定,在pH值低于5．0的条件下,随pH值降低,变性率急剧上升;正交试验结果表明,胃蛋白酶对IgG的影响因素为pH值>作用时间>酶液浓度;最佳条件为pH 4．0,作用时间1 h,胃蛋白酶的质量浓度为0．5 mg／mL;胰蛋白酶对IgG活性的影响相对较小。
关键词：
羊初乳 免疫球蛋白 稳定性
[期刊] 西南农业学报
[作者]
杨正德 涂家宽 裴成江 宋大书 刘付祥
为研究提高奶牛乳脂率与乳蛋白含量的营养调控技术,选择体况、胎次、产犊时间、产奶量相近的泌乳盛期中国荷斯坦奶牛27头,采用L9(34)正交试验设计,进行了中性洗涤纤维(NDF)、小肠可消化蛋白(IDCP)、添加过瘤胃保护脂肪酸(RPFA)、过瘤胃保护氨基酸(RPAA)对泌乳盛期奶牛乳脂率与乳蛋白含量的影响试验。结果表明,日粮干物质(DM)中NDF 41%、IDCP按我国《奶牛饲养标准》推荐量92%、脂肪酸钙150 g/d、过瘤胃保护蛋氨酸8 g/d+过瘤胃保护赖氨酸32 g/d,可有效提高奶牛泌乳盛期的乳脂率与乳蛋白含量。
关键词：
奶牛 营养调控 乳脂率 乳蛋白
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
李林强 朱莉莉 万威 王亮 田苏辉 田万强
【目的】比较牛、羊乳热处理后蛋白质变性程度，探讨牛、羊乳蛋白质热稳定性差异机理。【方法】采用离心沉淀法、全自动色差仪和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳法，以未热处理的常温（１８～２０℃）牛、羊乳为对照，测定不同温度（９５，１２１℃）处理１５ｍｉｎ后牛、羊乳蛋白质沉淀率、红值（Ａ＊）和酪蛋白的组成；并采用考马斯亮蓝法、菲林试剂法和激光粒度仪测定牛羊鲜乳蛋白质、还原糖质量浓度及蛋白质粒度大小。【结果】羊乳蛋白质沉淀率显著高于牛乳（Ｐ＜０．０５），牛乳酪蛋白的红值显著高于羊乳（Ｐ＜０．０５），牛、羊乳酪蛋白主要均为β－酪蛋白和αＳ１－酪蛋白２种，分子质量分别约为３４和２６ｋｕ；羊乳蛋白质质量浓度（（３７．６７±．．．
关键词：
牛乳 羊乳 蛋白质 热变性 变性机理
[期刊] 中国农业科学
[作者]
袁廷杰 王加启 杨永新 卜登攀 杨晋辉 周凌云
【目的】从血清蛋白组研究运输对奶牛机体的影响,充分理解运输对奶牛的生理病理影响及其潜在的作用机制提供理论依据。【方法】采用二维凝胶电泳(2-DE)结合MADIL-TOF-TOF串联质谱的方法对运输前第7天、运输后3 h和第7天奶牛的血清进行蛋白质组分析鉴定。【结果】运输可引起奶牛血清中14个蛋白点的表达丰度发生变化,有12个蛋白点得到有效鉴定。与运输前第7天相比,血清白蛋白、IgG1重链恒定区、类型II细胞骨架I和转甲状腺素蛋白在运输后3 h表达量降低,而α1-酸性糖蛋白、结合珠蛋白、nesprin-2、微管微丝交联因子1、酪氨酸蛋白激酶Fps85D、输出蛋白5和一个未知蛋白点在运输后3 h的...
关键词：
运输 奶牛 血清 蛋白组
[期刊] 水产学报
[作者]
郭长明 袁橙 武彩红 朱善元 刘广锦 陆承平 刘永杰
以斑马鱼和巨噬细胞作为体内、外感染模型,比较无乳链球菌鱼源株GD201008-001与人源株A909的致病性差异,利用iTRAQ技术和质谱分析技术进行差异表达蛋白鉴定,以期为揭示无乳链球菌不同宿主来源株致病机制提供新思路。实验通过测定菌株GD201008-001、A909的斑马鱼半数致死量和巨噬细胞吞噬率,比较二者致病性差异;提取全菌蛋白,经iTRAQ试剂标记后进行质谱鉴定,质谱数据用软件Mascot 2.2和Proteome Discoverer 1.4进行查库(Uni Prot数据库)鉴定及定量分析,
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