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[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 付婉艺  李厚华  李玲  王亚杰  张存旭  
【目的】分析天山雪莲悬浮培养细胞生长过程中生物量和总黄酮含量的变化,优化总黄酮的提取纯化方法。【方法】采用L9(34)正交设计优化天山雪莲悬浮培养细胞中总黄酮的超声提取工艺,比较聚酰胺层析法、碱提酸沉法和聚酰胺酸碱法对总黄酮含量、纯度及回收率的影响。【结果】在3~15d,随着培养时间的增加,天山雪莲悬浮培养细胞的生物量和总黄酮含量明显增加,在培养15d时均较高,分别为21.9g/L和66.5mg/g,表明天山雪莲悬浮培养细胞最适收获时间为培养15d;总黄酮提取最佳工艺为:70℃超声条件下,采用体积分数70%的乙醇连续提取3次,可以得到66.5mg/g总黄酮;总黄酮纯化的最佳方法为:聚酰胺层析法...
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 刘延吉  张旭  田晓艳  
黄酮类化合物具有广谱的药理活性和较低毒性,为了开发阳桃(Averrhoa carambola Linn)中黄酮类化合物的药用价值,本研究以阳桃为材料,采取有机溶剂提取与大孔树脂纯化的方法,对阳桃中的黄酮类化合物的提取与纯化工艺进行了研究。结果表明:以50%乙醇为提取液,料液比为1∶10,80℃下提取2.5h,黄酮的提取效果最好,黄酮得率可达2.82%;最佳的纯化工艺为采用AB-8大孔树脂,样品上样浓度为1.0mg·mL-1,pH值为4.1,上样流速为1.5mL·min-1,洗脱液流速为1.5mL·min-1,洗脱液为50%乙醇,洗脱液量为2.4倍柱体积。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 汪金玉  张秋霞  陈康  陶晨璐  武慧雯  
【目的】优化聚酰胺树脂纯化茶枝柑叶总黄酮的工艺,为茶枝柑叶的开发利用提供参考。【方法】以总黄酮吸附量及解吸率为指标,通过静态吸附与解吸试验,确定适合分离纯化茶枝柑叶总黄酮的聚酰胺树脂粒径。通过动态吸附与解吸试验,采用单因素试验与响应面法优化,研究聚酰胺树脂分离纯化茶枝柑叶总黄酮的工艺参数,并对最优工艺条件进行验证。【结果】200~300目(48~75μm)聚酰胺树脂较适用于纯化茶枝柑叶总黄酮。茶枝柑叶总黄酮最优纯化工艺为:上样液质量浓度(生药量)15 mg/mL,pH值为5,流速为1.75 BV/h,上样量为聚酰胺树脂质量的6倍(湿质量),用1.3 BV的75%(体积分数)乙醇洗脱。在该工艺条件下,所得纯化物中总黄酮得率为64.17%。【结论】200~300目(48~75μm)聚酰胺树脂适用于茶枝柑叶总黄酮的分离纯化,且所得总黄酮纯度较高。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 华涛  冯磊  张雪花  唐波  常晨  刘国阳  吴培培  陈丽  张道华  侯继波  
为建立在生物反应器内微载体逐级放大培养PK-15细胞和增殖PCV2技术。采用分批式培养方法,研究了PK-15细胞在微载体胰酶消化放大悬浮培养及猪圆环病毒2型(PCV2)增殖工艺。结果表明,5 g/L的微载体和高糖DMEM下,采用4.0×105cells/m L的初始接种密度及培养至第2天进行换液操作工艺可以获得最佳的PK-15细胞生长效能。胰酶消化转移将PK-15细胞从1 L反应器放大至3 L反应器,微载体上细胞贴附均匀、生长旺盛,培养3 d细胞密度可达34.3×105cells/m L。采用感染复数为0
[期刊] 草业科学  [作者] 袁惠君  李欣  贾鸿震  袁毅君  
黄芪总黄酮具有抗氧化、增强机体免疫等功能,常作为免疫增强剂添加在食品和饲料中。通过单因素试验研究乙醇体积分数、料液比和提取时间对黄芪总黄酮提取量的影响,进一步用Box–Behnken法优化黄芪总黄酮最佳提取工艺,并利用大孔吸附树脂–聚酰胺联用技术对其进行富集纯化。结果表明:在乙醇体积分数70%,料液比1∶17,提取时间70 min的条件下提取效果最佳,总黄酮提取量为2.78 mg·g~(–1),相对标准偏差为1.41%。经HPD722大孔吸附树脂–聚酰胺联用富集纯化后,黄芪总黄酮提取量为310.63 mg·g~(–1),增加112倍,其中毛蕊异黄酮含量由0.13 mg·g~(–1)增至42.56 mg·g~(–1),增加327倍;芒柄花素含量由0.06 mg·g~(–1)增至7.89 mg·g~(–1),增加132倍。
[期刊] 林业科学研究  [作者] 梁军  魏刚  吕全  贾秀贞  张星耀  
研究了印楝细胞悬浮培养系的建立及印楝细胞悬浮培养的条件。结果表明,印楝细胞悬浮系的建立以B5培养基,NAA2 0~4 0mg·L-1,采用直接倾倒法作为接种方法为好;基于生物量、印楝素含量和印楝素产率综合分析认为,印楝细胞悬浮培养的最佳条件为B5培养基,NAA2~4mg·L-1,蔗糖30g·L-1,培养温度25℃,及根据培养容器的大小选择合适的转速和装液量。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 张尧  李忠晴  张丽  王爱英  祝建波  
【目的】将克隆得到的天山雪莲sikP基因转入番茄中,以提高番茄类黄酮的含量。【方法】利用农杆菌介导的叶盘法,把天山雪莲MYB转录因子sikP基因的植物过表达载体pBI121-35S-sikP转入番茄,利用PCR和RT-PCR技术检测目的基因是否整合到番茄中并表达,将获得的转基因番茄和对照番茄生根后移栽至花盆中,分别对其类黄酮含量进行检测。【结果】在获得5株转基因番茄中,测得转基因番茄总黄酮质量分数明显提高,是对照组番茄总黄酮质量分数的5.4倍。【结论】天山雪莲Myb转录调控因子sikP基因对番茄次生代谢具有重要的调控作用,能够有效地提高番茄类黄酮的含量。
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 朱宇旌  孙景霞  李新华  任慧玲  滕微  
通过静态吸附、解吸试验及静态吸附动力学试验,确定了采用大孔吸附树脂HPH480对红三叶异黄酮进行纯化。动态吸附试验结果表明:对于红三叶异黄酮,较好的动态吸附条件为,上样液浓度0.8~1.3mg·mL-1,上样液pH值为5,径高比1:20,不需要预吸附,流速2mL·min-1,室温下上样,采用70%乙醇室温洗脱,流速为1.0mL·min-1,洗脱剂用量为4BV,在此条件下得到的红三叶异黄酮纯度为25%以上,较粗提物提高4倍以上。采用树脂吸附法与溶剂萃取法联用对异黄酮进行精制以乙酸乙酯萃取效果较好,可使红三叶异黄酮纯度达到32.29%;采用树脂吸附法与重结晶法联用,纯度可达44.78%,但重复性差...
[期刊] 华中师范大学学报(自然科学版)  [作者] 王晓林  金龙哲  钟方丽  杨文楷  
探索聚酰胺动态吸附-解吸纯化刺玫果总黄酮的工艺条件.以总黄酮的比吸附量、吸附率及比解吸量、解吸率为考察指标,通过单因素实验对刺玫果总黄酮的纯化工艺进行优化.结果表明聚酰胺纯化刺玫果总黄酮的最佳工艺条件:上样液总黄酮的质量浓度为0.9 mg/mL、上样量为19.5 mL/g(上样液体积/聚酰胺质量)、上样液的pH值为24、吸附流速为1.52.0 mL/min、解吸液为70%乙醇水溶液、解吸流速为1.01.5 mL/min、解吸液的pH值为89、解吸液用量为12 mL/g(解吸液体积/聚酰胺质量).在上述纯化
[期刊] 北京林业大学学报  [作者] 郑丹  李晓敏  何静  雷建都  
以白木香叶为原料,利用乙醇水溶液浸提法,用芦丁为对照品,硝酸铝作显色剂,测定提取液在510 nm波长处的吸光度,来检测白木香叶总黄酮的提取率。单因素实验考察了乙醇体积分数、提取温度、液料比和提取时间4个因素对白木香叶总黄酮提取得率的影响,在此基础上,通过响应曲面法优化得到白木香叶总黄酮提取的最佳工艺条件。利用大孔吸附树脂对白木香叶总黄酮进行分离纯化,以饱和吸附量、吸附率和解吸率作为评价指标,比较了D101、AB-8和S-8 3种极性不同的大孔吸附树脂对白木香叶总黄酮的分离纯化效果,得到了分离纯化效果最佳的
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 高小棠  王萍  
以龙葵果生物碱提取得率为考察指标,分别用水、60%、70%、80%、85%、90%、95%、100%的乙醇和60%、70%、90%、95%、100%的甲醇作为溶剂提取龙葵果生物碱,得出80%乙醇为较好的提取溶剂。以80%乙醇为提取溶剂,设提取温度(20、40、60、80、100℃)、提取时间(2、3、4、5、6、7、8h)、提取料液比(1∶5、1∶10、1∶20、1∶40、1∶60、1∶80、1∶100)g/mL3个单因素试验,再运用全因子试验设计、最陡爬坡试验和中心组合试验进行响应面分析,探索龙葵果生物碱最优提取纯化工艺。结果表明:最优龙葵果生物碱的提取工艺条件为提取温度57.5℃,料液比(...
[期刊] 北京林业大学学报  [作者] 郑悦  王萍  
以黑果花楸花色苷得率为考察指标,分别用水,50%、60%、70%、80%、90%、100%的乙醇和50%、60%、70%、80%、90%、100%的甲醇作为溶剂提取黑果花楸花色苷,得出80%乙醇为较好的提取溶剂。以80%乙醇为提取溶剂,进行提取时间、料液比、p H值、提取温度4个单因素试验。在单因素试验基础上,运用Box-BeHnken响应面设计建立数学模型。结果表明最佳提取条件为:提取时间110 min、p H值2、提取温度34℃、料液比1∶16.5,黑果花楸花色苷得率为6.648 mg/g。通过静态吸附和解吸筛选出黑果花楸花色苷的最佳纯化树脂为AB-8,最佳纯化条件为上样质量浓度2 mg/...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 胡博然  徐文彪  马峰旺  
以宁夏农科院选育的新品种宁杞 1号 3年生树为试材 ,对影响枸杞胚细胞悬浮培养及其再生系统建立的培养基与激素配比进行了研究。结果表明 ,以人工授粉后 18d的幼果 ,剖取成熟胚作为外植体 ,选择 MS+6 BA1.0 mg/ L+IBA0 .5 m g/ L 培养基诱导愈伤组织 ,经单细胞悬浮培养建立了稳定的细胞系 ;MS+6 BA0 .2mg/ L 培养基较为适宜枸杞胚状体萌发成苗 ,该再生苗转移到 MS+NAA0 .2 mg/ L 生根培养基上 ,诱导生根并获得完整植株 ;共移栽成活 14株 ,成活率达 38.8%。
[期刊] 华北农学报  [作者] 张楠  王保军  张秀清  张京声  孙君社  
研究了元宝草悬浮细胞生长及其金丝桃素类物质(金丝桃素和假金丝桃素)的代谢规律。悬浮培养细胞的生长周期为18 d,其中4~10 d是对数期。金丝桃素类物质在10 d达到46.06μg/g(DW),其含量增加与细胞鲜质量增长相偶联。可溶性糖的消耗与细胞的生长以及金丝桃素类物质的代谢有着密切的关系,是影响细胞鲜质量和金丝桃素类物质增长的重要因素。
[期刊] 浙江农林大学学报  [作者] 陈红贤  于笑笑  王晨阳  张敏  刘忠华  
对国槐Sophora japonica槐角种胚细胞悬浮培养的动力学进行研究,在优化细胞接种量的基础上,分析测定培养周期内不同培养阶段的槐角细胞生长和培养基中碳源、氮源、磷源的消耗,以及细胞的鲜质量、干质量和黄酮产量的变化,从而了解细胞生长、营养消耗与次生代谢产物积累的基本规律,为建立结构化动力学模型奠定基础。结果表明:(1)初始接种量为40.000 g·L-1时,最利于细胞的培养;(2)细胞的培养周期约为27 d,经过27 d的培养,生物量和黄酮的产量达到最高,分别为9.733 g·L-1和53.566 mg·L-1,对细胞比生长速率和黄酮比合成速率进行分析,得出黄酮的积累和细胞的生长为部分生...
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