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[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
程新伟 梁鹏 孙鹤 赵卉双 金红 程文健 陈丽娇
以氯仿/甲醇法提取的大黄鱼鱼卵粗磷脂为原料,研究柱层析固定相种类、粒度,洗脱剂流速、配比及样品上载量等因素对分离纯化的鱼卵磷脂酰胆碱(Roe-PC)纯度和回收率的影响,以确定最佳的工艺参数.结果表明,在固定相为200300目硅胶,流动相为氯仿/甲醇(3∶2),流速为2 m L·min(-1),上载量为0.035 g·g(-1)(样品/硅胶)的条件下,分离纯化的大黄鱼Roe-PC的纯度可达96.34%,回收率为85.18%.
关键词：
大黄鱼鱼卵 磷脂酰胆碱 分离纯化
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
陈文娟 陈丽娇
采用乙醇加热纯化提取的方法,从大黄鱼鱼卵中提取磷脂,研究乙醇含量、料液比、浸提温度、浸提时间、浸提次数对磷脂提取率的影响,并用正交设计优化提取工艺条件.结果表明,最佳工艺条件为:乙醇含量为92%、料液比1∶8、浸提温度45℃、浸提时间20 min、浸提3次,在该条件下产品的提取率可达47.73%.采用薄层层析法结合分光光度法分析测定大黄鱼鱼卵磷脂含磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、神经鞘磷脂、溶血磷脂酰胆碱5种组分,相对含量分别为69.38%、4.14%、8.52%、7.24%、10.72%.
关键词：
大黄鱼鱼卵 磷脂 提取率 成分分析
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
陈文娟 陈丽娇 曾稍俏
为了充分提取和利用大黄鱼鱼卵中的磷脂,研究酶水解法提取大黄鱼鱼卵磷脂的工艺。通过单因素试验和响应面设计优化试验,确定酶水解法的最佳工艺条件,并比较酶水解法与溶剂法、超声波法的提取效果。结果表明,选用内切型木瓜蛋白酶、料液比1∶2、pH 6.0、酶解温度45℃、酶解时间1.5 h和加酶量125 U/g为较佳工艺条件。在此条件下,产品的平均提取率可达70.92%,表明响应面法用于对大黄鱼鱼卵磷脂提取条件的优化是可行的。工艺放大试验结果表明,酶水解法的提取率比溶剂法和超声波法分别提高了22.02%和9.6%,说明酶水解法是提高大黄鱼鱼卵磷脂提取率的较好方法。
关键词：
大黄鱼 鱼卵 磷脂 酶水解法 提取
[期刊] 西南农业学报
[作者]
卞欢 王道营 张牧晗 徐为民 刘芳 诸永志 蒋宁 曹建民
采用2-油酸-1-棕榈酸磷脂酰胆碱为表面活性剂、低级醇为助表面活性剂、异辛烷为油相、蒸馏水为水相,以伪三元相图微乳面积大小为指标,考察磷脂酰胆碱微乳体系。结果表明,磷脂/正丙醇/异辛烷/水W/O微乳体系、磷脂/正丁醇/异辛烷/水W/O微乳体系以及磷脂/正丙醇/异辛烷/水O/W微乳体系均为稳定的磷脂酰胆碱微乳体系。3种微乳体系和脂质体分别与鸭肉肌内磷脂酶振荡反应10 h后,采用TLC联用Quantity One软件鉴定反应产物中的脂肪酸,以脂肪酸斑点分析的Trace Qty值为指标,最终确定磷脂酰胆碱反应体系。因此,以脂质体作为反应体系所产生的脂肪酸最多,即脂质体为磷脂酰胆碱最佳反应体系。为进一...
关键词：
磷脂酰胆碱 磷脂酶 微乳 脂质体
[期刊] 水产学报
[作者]
李红霞 刘文斌 李向飞 王晶晶 刘波 谢骏
选取450尾健康的异育银鲫鱼种[体重为(7.46±0.2)g],随机分成5组,其中1组为对照组,2、3、4和5为试验组,投喂的饲料是在基础饲料中分别添加0.05%溶血卵磷脂、0.1%的溶血卵磷脂、0.1%甜菜碱和0.15%氯化胆碱(共含氯化胆碱0.21%),在室内可控温循环水养殖系统中饲养67d,研究3种添加剂对异育银鲫生长、脂肪代谢和血液指标等的影响。结果表明,各试验组异育银鲫的增重率比对照组均有提高,其中0.1%甜菜碱组和高剂量氯化胆碱(0.21%)组增重率分别比对照组提高了10.28%和9.23%,且差异显著(P<0.05)。试验组的饲料系数均比对照组有所下降,其中高剂量氯化胆碱(0.2...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
赵文恩 韩雅珊 乔旭光 广田才之
将蛋黄磷脂酸胆碱（PC）制成的脂质体用于类胡萝卜素抑制脂质过氧化研究，β-胡萝卜素抑制TBARS积累没有诱导期。当存在于脂质体膜上时，类胡萝卜素抑制脂质过氧化能力的顺序如下：鸡油菌黄质＞叶黄素≈β-胡萝卜素＞胭脂树橙。类胡萝卜素在水分散液中存在时，抑制脂质过氧化能力按胭脂树橙＞叶黄素＞鸡油菌黄质＞β-胡萝卜素顺序递减。结果表明，类胡萝卜素抑制脂质过氧化与其作用的介质环境密切相关。
关键词：
类胡萝卜素 PC脂质体脂质过氧化
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
谭烽 兰文升 崔峰 乔传令 陈雯莉
利用Trizol法从尖音库蚊中提取总RNA,构建cDNA文库,并克隆出乙酰胆碱酯酶外显子序列;利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统对蚊虫乙酰胆碱酯酶进行真核表达,并利用Ni-琼脂糖对酶进行纯化。采用SDS-PAGE对纯化产物进行检测,结果表明得到了纯度较高的乙酰胆碱酯酶。参照Ellman法对酶的活性进行测定,结果显示纯酶的活力为2.219×10-4 mol/(min.g)。
[期刊] 中国水产科学
[作者]
单瑞后 王松 王骏 王军 汝少国
采用Sephacryl S-300过滤层析和DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析相结合的方法从尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)成熟卵子匀浆液中分离纯化出了一种高分子量的蛋白。该蛋白能被Schiff试剂、甲基绿和苏丹黑B着色,Western blot显示能被金鱼卵黄脂磷蛋白(lipovitellin,Lv)多克隆抗血清特异性识别,在非变性条件下分子量约为560 k D,在SDS变性条件下分子量约为112 k D,结果表明分离纯化的蛋白是一种含有糖、磷、脂基团的蛋白,符合鱼类Lv的性质,且与金鱼Lv有免疫交叉反应,从蛋白的性质和免疫原性以及分子量大小...
关键词：
尼罗罗非鱼 卵黄脂磷蛋白 纯化 性质鉴定
[期刊] 中国水产科学
[作者]
鄢庆枇 韩一凡 高天翔 庄峙厦 王小如
分别用饱和硫酸铵二次盐析法和蛋白A亲和层析法对健康大黄鱼(Pseudosciaena crocea)血清中的免疫球蛋白(IgM)进行分离纯化,所得产物用SDS-PAGE进行检测。结果表明,蛋白A亲和层析法可以较好地分离到高纯度的大黄鱼血清IgM,产物的电泳胶中只有重链和轻链2个条带;饱和硫酸铵二次盐析法除了有这2个条带,还有很多杂带,而且蛋白A亲和层析法更为简便、快速,因此用蛋白A亲和层析法分离纯化IgM优于饱和硫酸铵二次盐析法;大黄鱼免疫球蛋白重链的分子量在76 kD左右;轻链分子量在28 kD左右。用纯化的大黄鱼IgM免疫实验兔,获得效价高达1∶40 960的兔抗鱼IgM血清。本实验所建立...
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
邓冬艳 邓鹏翅 宋红杰 齐悦
以新鲜蛋液为原料,以磷脂酰胆碱为研究对象,采用乙醇(萃取)-丙酮(脱脂、重结晶)联合提取法提取、纯化蛋黄卵磷脂;利用核磁共振技术,以磷酸三苯酯为内标物,建立磷脂酰胆碱的定性定量分析方法。实验结果表明:料液比为1∶10、乙醇体积分数为95%、提取时间为60min时,所研究的几种蛋类蛋黄卵磷脂提取量为4.88~8.14mg/g;核磁共振氢谱、磷谱结果显示,这些蛋黄卵磷脂提取物中磷脂酰胆碱的百分含量为16.9%~27.4%,加标回收实验结果令人满意,表明该核磁共振方法能实现蛋黄中磷脂酰胆碱的有效分析测定。
关键词：
禽蛋 磷脂酰胆碱 核磁共振
[期刊] 华北农学报
[作者]
索力 曲秋芝 孙大江 张颖 王雪 赵吉伟
采用SephadexG-200凝胶过滤层析法,对黑龙江茴鱼卵黄蛋白粗提液进行分离纯化,层析洗脱共得到3个蛋白峰。用聚丙烯凝胶电泳、免疫扩散等方法研究表明:黑龙江茴鱼卵黄蛋白(Yolk protein)含有分子量分别为567.2,486.3,157.5 kDa的3种蛋白,由分子量分别为80.7,68.7,46.8,39,30,20.9,16.7,14.9,14.1 kDa的9个蛋白亚基组成;峰2蛋白为卵黄脂磷蛋白(Lipovitellin,Lv),分子量为486.3 kDa,由分子量为80.7,30,14.9,14.1 kDa的4个蛋白亚基组成;纯化的黑龙江茴鱼Lv免疫新西兰大白兔获得兔源多克隆...
关键词：
黑龙江茴鱼 卵黄蛋白 卵黄脂磷蛋白 纯化
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
张敏 魏微 陆晓丹 张玲云 杜艳瑜 李淑卿 梁鹏 程文健 陈丽娇
以大黄鱼鱼卵为研究对象,采用6种溶剂(正己烷、环己烷、异丙醇、乙酸乙酯、95%乙醇、氯仿—甲醇)提取鱼卵油,对所得鱼卵油的脂质得率和品质(磷脂含量、过氧化值、游离脂肪酸含量、硫代巴比妥酸值、脂肪酸组成)进行分析.结果表明:95%乙醇组的脂质得率(27.97%±0.40%)、磷脂含量(12.40%±0.35%)、游离脂肪酸含量(12.76%±0.33%)和硫代巴比妥酸值(2.76 mg·kg~(-1)±0.14 mg·kg~(-1))均显著高于其他溶剂组,过氧化值(1.33 mmol·kg~(-1)±0.38 mmol·kg~(-1))最低.氯仿—甲醇组的脂质得率(19.00%±0.57%)相对较低,但其磷脂含量(8.18%±0.62%)仅次于95%乙醇组,且过氧化值(2.22 mmol·kg~(-1)±0.32 mmol·kg~(-1))、游离脂肪酸含量(4.64%±0.05%)和硫代巴比妥酸值(0.97 mg·kg~(-1)±0.07 mg·kg~(-1))均较低.此外,二十碳五烯酸(EPA)含量和二十二碳六烯酸(DHA)含量之和在多不饱和脂肪酸(PUFA)中的占比分别为89.73%(氯仿—甲醇组)、88.49%(95%乙醇组)、87.59%(异丙醇组)、87.21%(正己烷组)、86.25%(环己烷组)、82.02%(乙酸乙酯组).综上,95%乙醇对大黄鱼鱼卵油的提取效果最好,但其氧化程度较为严重;氯仿—甲醇组鱼卵油的脂质得率低,但其氧化程度相对较低,品质较好.说明氯仿—甲醇是提取大黄鱼鱼卵油的最佳溶剂.
[期刊] 中国水产科学
[作者]
张进盼 白志毅 张梦莹 颜玲 陆风辉 王贺
溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶1(LPCAT1)是一种重要的脂质代谢酶。为明确三角帆蚌(Hyriopsiscumingii)HcLPCAT1基因在类胡萝卜素代谢中的功能,探究该基因与三角帆蚌壳色的相关性,本研究采用RACE技术克隆获得HcLPCAT1基因cDNA全长1675 bp,ORF区1296 bp编码431个氨基酸;实时荧光定量分析发现HcLPCAT1基因在紫色三角帆蚌各组织中表达量均高于白色三角帆蚌相应组织,且在肝胰腺、外套膜中的表达量差异显著(P<0.01),同时相应组织中总类胡萝卜素含量(TCC)极显著升高(P<0.01)。采用直接测序法鉴定出三角帆蚌HcLPCAT1基因5个SNP位点的基因型与内壳色存在显著相关性(P<0.05),单倍型分析发现H1、H2两种单倍型为紫色三角帆蚌优势单倍型,H3、H5、H6三种单倍型为白色三角帆蚌优势单倍型。本研究鉴定的HcLPCAT1基因可为解析三角帆蚌类胡萝卜素代谢和壳色形成的机制提供研究基础,筛选出的与内壳色相关SNP及单倍型可用于分子辅助育种。
[期刊] 水产学报
[作者]
温茹淑 方展强 江世贵 马广智 徐杰 姚静
采用Sephacryl S-300凝胶过滤层析柱和HiTrap Q阴离子交换柱从卵黄生成期的雌性剑尾鱼(Xiphophorus helleri)卵巢组织提纯了卵黄脂磷蛋白(Lv)。已确定被纯化的剑尾鱼Lv在Native-PAGE(4%~7.5%)电泳中分子量为530 kD左右。Native-PAGE(4%~7.5%)电泳后的凝胶分别进行糖蛋白染色、脂蛋白染色及磷蛋白染色。结果表明,剑尾鱼Lv是一种富含糖、脂、磷的蛋白。用纯化的剑尾鱼Lv免疫大白鼠获得鼠源多克隆抗血清。用免疫双扩散的方法测定Lv抗血清的效价为l∶32。Western-blotting检测显示抗血清的特异性较好;卵黄蛋白原(Vtg...
关键词：
剑尾鱼 卵黄脂磷蛋白 纯化 免疫分析
[期刊] 中国水产科学
[作者]
齐霁 陈立侨 孙盛明 姜海波 李二超 禹娜
采用2×6因子设计方法,以酪蛋白和明胶为蛋白源,分别配制了含1%和2%磷脂,6个氯化胆碱水平(0、250、500、1 000、2 000、4 000 mg/kg饲料)的12组等氮、等脂精制饲料,在室内水族箱条件下对体质量为(0.22±0.01)g的中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)幼蟹进行为期6周的饲养试验,每处理组各设4个平行。结果表明:当饲料中胆碱的添加水平分别为1 000 mg/kg(1%的磷脂水平)和500 mg/kg(2%的磷脂水平)时,幼蟹的存活率均达到最高值,分别为89%和88%;幼蟹增重率和特定生长率均随着胆碱添加量的提高而显著升高(P<0.05);磷脂水平为1...
关键词：
中华绒螯蟹 胆碱 磷脂 交互作用
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