【目的】采用Meta分析法评价大黄(Rheum officinale)、黄芩(Scutellaria baicalensis)、诃子(Terminalia chebula)、黄连(Coptis chinensis)4种中草药对嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)的体外抑菌效果,为水产养殖动物嗜水气单胞菌病防治的中草药筛选提供参考。【方法】使用计算机检索中国知网(CNKI)数据库,检索时限为建库至2018年1月,检索关于大黄、诃子、黄芩、黄连4种中草药对嗜水气单胞菌体外抑制效果的文献,并追溯相关参考文献。提取数据,利用Reviewer manager 5.3软件对数据进行Meta分析。【结果】共纳入8篇文献进行Meta分析,结果显示大黄对嗜水气单胞菌的抑菌效果显著高于黄芩[MD=0.85,95%CI(0.02,1.68),P=0.04];黄连的抑菌效果显著低于大黄[MD=-3.41,95%CI(-5.61,-1.21),P=0.002];黄连的抑菌效果显著低于黄芩[MD=-4.60,95%CI(-6.03,-3.17),P黄芩和诃子>黄连,分析结果稳定,使用此4种中草药治疗嗜水气单胞菌病时建议首选大黄。

研究了硫酸安普霉素(apramycin sulphate)对嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,A.h)的体外抑菌效果及饲料中添加硫酸安普霉素对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)体内抗A.h感染能力的影响。结果显示:硫酸安普霉素MIC、MBC和MBC/MIC分别为0.5μg/mL、1.0μg/mL和2;硫酸安普霉素在A.h调整期具有明显的抑菌效果,属于静止期杀菌药物,具有较长的抗菌后效应(PAE),呈明显的浓度依赖性;经过10代继代培养,其耐药性获得速率为2倍。A.h浸泡感染96 h后,对照组累积死亡率为86.7%,添加组为44.3%～66.7%,相对保...

为探究诃子在畜禽疫病防控中的作用及应用潜力，以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌3种常见致病菌为对象，对比诃子和其他11种中药提取物的抑菌圈直径和最小抑菌浓度（MIC），分析诃子培养上清液的总漏出率和电导率、蛋白浓度及诃子对细菌DNA和蛋白含量的影响。结果显示：诃子比其他11种中药的抑菌效果更强，表现为抑菌圈直径更大，MIC更低。培养上清液的电导率和漏出率增加，用2倍MIC诃子药液处理8 h后，大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌上清液蛋白浓度显著增加（P

通过纸片琼脂扩散法分别测定了42种中草药提取液pH值调节至中性前后对嗜水气单胞菌的抑菌圈直径大小,用t检验对药液pH值调节至中性前后的抑菌效果进行分析比较,结果表明差异极显著(P=0.002

用琼脂扩散法(打孔法)测定了诃子等100种中草药对嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)的抑制作用,并用二倍稀释法测定抑菌效果较强的48种中草药对嗜水气单胞菌的最小抑菌(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果显示∶大部分中草药对嗜水气单胞菌有抑制作用,诃子和秦皮的抑杀效果最好,其抑菌圈直径达20 mm以上,MIC和MBC相同,都为3.91 mg/mL(诃子)和7.81 mg/mL(秦皮);红藤、仙鹤草和覆盆子等13种中草药有中等强度的抑菌和杀菌效果;雷公藤等33种中草药抑菌作用弱;而牛蒡子等52种中草药无抑菌作用。

采用牛津杯法和二倍稀释法,选择五倍子、黄芩、杨树花等10种中草药对从四川地区患"出血病"的黄鳝(Monopterus albus)上分离的10株嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)进行了体外抑菌试验。在此基础上,按照中兽医方剂配伍的特点初步筛选了5种中草药组成4个复方(A、B、C、D),并进行了体外抑菌试验。结果表明:10株病原菌对五倍子、连翘、杨树花、黄芩、穿心莲较为敏感,其中五倍子的抑菌效果最好,抑菌圈直径大于20 cm;4个复方均具有较好的抑菌作用,其中复方C(五倍子、穿心莲、杨树花)的抑菌效果最好。

通过借鉴Meta分析法分析中国知网数据库(CNKI)中有关鱼源、鳖源嗜水气单胞菌的7种毒力基因的相关研究数据,探讨鱼源、鳖源嗜水气单胞菌毒力基因的分布特点及为研制嗜水气单胞菌多价DNA疫苗提供候选基因。分析结果表明:嗜水气单胞菌毒力基因的分布受养殖对象的种类和生长环境影响;南方和北方地区鱼源嗜水气单胞菌以毒力基因astA、altA、aerA和hlyA分布较为广泛,南方地区鳖源嗜水气单胞菌毒力基因hlyA、actA和aerA分布均较为广泛,可分别作为制备鱼源和鳖源嗜水气单胞菌多价DNA疫苗候选基因。

从患出血病的加州鲈(Micropterus salmoides)肝脏组织中分离到一株病原菌(LY4),通过人工回归感染试验确定其致病性,采用API 20E细菌鉴定系统和16S r RNA序列分析对其进行鉴定、纸片扩散法测定其耐药性、并利用二倍稀释法评价35种中草药水提取液对其产生的体外抑菌作用。结果显示:菌株LY4能够产生胞外蛋白酶,对健康加州鲈的半数致死剂量为5.7×105CFU/m L,通过生理生化特性与16S r RNA序列分析确定其为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila),药敏试验显示菌株LY4对青霉素、阿莫西林、甲氧嘧啶、四环素、多西环素、呋喃唑酮等抗生素表现出耐药性,五倍子、乌梅、地榆等中草药水提取液对其具有良好的抑菌效果。

本研究旨在探讨黄芩乙酸乙酯提取物和大黄水提物对藏细绵羊养殖过程中的抗炎、抗氧化和体内抑菌作用。选取12只10 月龄藏细绵羊（33.5±7.3 kg），分为对照组、黄芩组和大黄组三组（每组4只）进行试验，对照组绵羊只接种病菌，不饲喂中药提取物，黄芩组和大黄组绵羊在接种病菌后分别饲喂黄芩和大黄提取物。提取黄芩乙酸乙酯萃取部位和大黄水提物，连续6 d饲喂接种沙门氏菌（Salmonella）、大肠杆菌（Escherichia coli）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）三种致病菌羊只，每天每只羊饲喂10 mg干燥黄芩乙酸乙酯萃取部位和5 g干燥大黄水提物。采用体外平板抑菌试验和16S rDNA测序分析瘤胃微生物区系及实验处理对沙门氏菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌效果。通过测试血清生化、抗氧化指标和组织病理学切片分析黄芩乙酸乙酯萃取物和大黄水提物对藏细绵羊的抗炎和抗氧化作用。研究结果表明：黄芩乙酸乙酯部位主要有效成分为黄芩苷和黄芩素，含量分别为141.19 mg g^-1 DM和31.35 mg g^-1 DM；大黄水提物主要有效成分是大黄酸，含量为0.33 mg g^-1 DM。黄芩提取物中，黄芩乙酸乙酯部位体外抑菌效果最好，对沙门氏菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌都有抑制作用且抑菌圈直径分别为2.12±0.63 mm、5.94±0.68 mm、6.07±0.22 mm。体内试验结果表明黄芩组和大黄组羊血清乳酸脱氢酶和尿素水平显著降低（P<0.05），黄芩组羊血清中谷丙转氨酶和谷草转氨酶水平显著升高（P<0.05），且黄芩组谷胱甘肽过氧化物酶水平显著降低（P<0.05）。饲喂两种中药对试验羊肝脏和肾脏病变无明显改善效果，却加剧了肝脏和肾脏脂肪变性和炎性浸润，增加了瘤胃上皮厚度和减小了角质层厚度（P<0.05）。对瘤胃中饲喂的三种致病菌没有产生抑制作用，但降低了瘤胃其他菌群门或属水平的Bacteroidota、Proteobacteria、Acidobacteriota、Rikenellaceae＿RC9＿gut＿group、Christensenellaceae＿R-7＿group、Pseudobutyrivibrio、Ruminococcaceae＿unclassified、Butyrivibrio、相对丰度（P<0.05），增加了Actinobacteriota、Papillibacter相对丰度（P<0.05），丰富了瘤胃菌群间协同功能和拮抗功能，对探究瘤胃上皮吸收挥发性脂肪酸等代谢提供依据。本试验结果表明，黄乙酸乙酯萃取物和大黄水提物在体外抑菌效果明显，但治疗染菌病畜上效果不佳，建议应用时以预防为主，治疗为辅。

为建立鳗鲡外周血白细胞体外吞噬嗜水气单胞菌的数量模型,研究了感染时间一定、感染复数变化的情况下鳗鲡外周血白细胞吞噬的细菌数量和白细胞的存活率,同时还研究了感染复数一定、感染时间变化的情况下鳗鲡外周血白细胞吞噬的细菌数量和白细胞的存活率。结果发现,鳗鲡外周血白细胞对嗜水气单胞菌有较强的吞噬作用,在感染复数为100∶1、感染时间为30min时细胞吞噬的细菌量达到饱和,而细胞本身仍可维持较高活性。表明100∶1的感染复数及30min的感染时间,是研究鳗鲡外周血白细体外吞噬嗜水气单胞菌数量模型的最佳参数。本研究还通过检测吞噬速率和杀菌速率评估建立起来的数量模型发现,鳗鲡外周血白细胞吞噬嗜水气单胞菌的速...

以EPC细胞和HEp 2细胞为细胞模型 ,用嗜水气单胞菌 (Aeromonashydrophila ,Ah)J 1株进行粘附试验 ,同时以Ah4型菌毛的抗血清作粘附抑制试验 ,用以分析AhJ 1株的粘附素及其受体。EPC细胞粘附和粘附抑制试验证实 ,AhJ 1株粘附素受体具有甘露糖、胆固醇成分 ,有少量半乳糖成分 ,无葡萄糖成分。HEp 2细胞粘附和粘附抑制试验证实 ,与其它非菌毛粘附素如S层及外膜蛋白相比 ,Ah 4型菌毛的粘附作用较为显著。抗 4型菌毛抗体抑制细菌的粘附力达 80 %以上。抗S层、外膜蛋白抗体也能使细菌的粘附力下降 ,表明Ah的粘附作用由菌毛粘附素与非菌毛粘附素共同参与。

为筛选对昆明裂腹鱼源维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)有抑菌作用的中草药及复方，本研究通过煎煮法制备31种常见中草药水提取物，以牛津杯法测定各味中草药对该菌的抑菌圈直径，采用二倍稀释法测定最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC);选取体外抗菌活性较好的6种中草药，应用棋盘法进行15组二联药方的部分抑菌浓度指数(FIC)试验；按正交设计表配伍25组复方，同样进行药敏试验。结果显示，31种中草药中，五倍子、地榆、诃子、苏木、黄芩、黄连等6种中草药抑菌效果最好；15组联用药方均未发生拮抗作用，其中以五倍子+地榆、诃子+黄芩联用效果最好，FIC分别为0.31、0.50,表现为协同作用；综合复方中草药的抑菌作用，复方F16(五倍子∶地榆∶诃子∶苏木∶黄芩∶黄连=4∶4∶2∶5∶3∶1)的抑菌效果最佳，抑菌圈直径达23.2 mm, MIC与MBC分别为0.98 mg/mL、1.95 mg/mL,可作为昆明裂腹鱼源维氏气单胞菌抑菌药物的首选配伍组合。

为保证强力霉素(doxycyline)在防治水产动物疾病上的合理应用,通过建立强力霉素体外药动-药效同步(PK-PD)模型的方法,研究了强力霉素的药物动力学和抑制嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)的药效学之间的关系。结果显示,强力霉素对嗜水气单胞菌的最小抑菌浓度(M IC)和最小杀菌浓度(MBC)分别为2.0μg/mL和8.0μg/mL。在消除半衰期为38.61 h的模型内,2MIC的强力霉素对嗜水气单胞菌仅能抑制3 h,模型运行3 h后细菌出现再生长。4、8和16M IC的强力霉素对嗜水气单胞菌能够起到持续的抑制作用。结果表明,强力霉素对嗜水气单胞菌的药效与药物浓度关系...

用电镜观察嗜水气单胞菌Ｊ－１株，见有两种不同的菌毛，一种为短而硬直的Ｒ菌毛，另一种为长而易弯曲的Ｗ菌毛。Ｒ菌毛数量多，周身分布；Ｗ菌毛数量少，一个菌体仅４～６根。搅拌菌体悬液可使菌毛脱落，低速离心的上清液经ＰＥＧ沉淀、硫酸铵盐析和Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ层析后，获得纯化的Ｒ菌毛。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示，在有２－巯基乙醇存在时，Ｒ菌毛的亚单位分子量为１７０００。氨基酸组分分析表明，Ｒ菌毛含有４１％的疏水性氨基酸。用纯化的Ｒ菌毛免疫家兔获抗血清，建立菌体凝集试验和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法，检测５０个待检样本的Ｒ菌毛，两法检出率均超过６０％，符合率为８８％。

利用杂交瘤单克隆抗体技术制备了AHYT 1和AH105012株嗜水气单胞菌的菌体单抗,筛选出11个能稳定分泌抗嗜水气单胞菌单克隆抗体的细胞株,并对这些单抗进行了特性分析。经单抗类型测定,这些单抗分属IgM、IgG2α2个亚类,且均具有ELISA反应特性,腹水抗体效价在1∶104～1∶106,其中单抗4G4、2H4、GH9具有免疫荧光特性。ELISA特异性分析结果表明,4G4、2H4、FA4、GH9、CF2为嗜水气单胞菌血清型特异性单抗,4G4、2H4识别同一种血清型的嗜水气单胞菌分离株,而FA4、GH9、CF2却识别另外一种血清型的嗜水气单胞菌,并且与其他血清型的嗜水气单胞菌、温和气单胞菌以及...