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[期刊] 西南农业学报  [作者] 杨微  覃金花  唐兴富  孙祖东  
为建立一个大豆子叶节高效再生体系用于大豆的遗传转化,以桂春豆1号、桂早2号、桂夏1号和桂夏豆2号4个大豆品种为材料,子叶节为外植体诱导丛生芽,再生完整植株。实验研究了大豆种子的消毒方法,基因型以及培养过程中植物激素的浓度等影响大豆子叶节再生的因素。结果表明在适宜的条件下,4个大豆品种的丛生芽分化率都可达到90%,丛生芽数基本都在4~6个范围内,4个大豆品种均为子叶节器官发生途径的理想基因型。最适合的种子灭菌方法是双氧水灭菌法;桂春豆1号和桂早2号的适宜芽诱导培养基为B5+6-BA 1.6 mg/L+IBA 0.2 mg/L,桂夏1号和桂夏豆2号为B5+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.2...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 李文霞  宁海龙  吕文河  李文滨  
【目的】研究影响大豆(Glycine maxL.)子叶节外植体遗传转化的因素。【方法】以农杆菌转化系统为平台,用直接筛选法和延迟筛选法确定卡那霉素的筛选方法和浓度,以GUS基因的瞬时表达计算子叶节区GUS阳性率。【结果】延迟7d进行Km选择、筛选压力为75mg·L-1时选择效果最好;菌株培养阶段和侵染浓度分别在OD600为0.6和0.5时子叶节区GUS阳性率最高;黑农35、绥农14和合丰35为易感的大豆基因型;农杆菌菌株EHA101对大豆的转化能力好于LBA4404和AGL1;共培养培养基中添加的硫醇类化合物对T-DNA的转移有极强的影响效应。【结论】本实验方法可以优化农杆菌介导的大豆子叶节转...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 聂王星  於丙军  
以栽培大豆品种‘Jackson’为试材,用萌发5 d的子叶节作外植体,接种于不同激素配比的萌发培养基和诱导培养基中,分析和比较TDZ(噻二唑苯基脲)和6-BA(6-苄基腺嘌呤)单独和复配使用时对大豆子叶节再生体系中丛生芽的诱导效应,并对其优化组合进行了筛选。结果表明:在种子萌发培养基中,0.5 mg·L-16-BA或TDZ单独使用时,前者能使丛生芽诱导率达到75.56%,诱导效应好于后者,但每个子叶节出芽数低于后者。在诱导培养基中,0.5 mg·L-16-BA和1.0 mg·L-1TDZ复配使用时,丛生芽诱导率最高且每个子叶节出芽数最多,分别为84.75%和3.04。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 杨宏  刘小俊  梁根云  房超  刘独臣  蔡鹏  李跃建  
以华北型黄瓜‘川翠3号’、华南型黄瓜9361和9149为试材,开展了黄瓜子叶在不定芽诱导和不定苗分化两个阶段所需的激素配比研究。结果表明,在MS+1.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L ABA的不定芽诱导培养基上诱导20 d左右,转入MS+6-BA 0.3mg/L的不定苗分化培养基,3种黄瓜都能获得较高的植株再生率,平均外植体成苗数在2.2以上。从外植体接种到再生苗移栽仅需8周。再生苗移栽后能正常生长,开花结实。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 樊明琴  朱月林  朱丽华  
以 2个日本优质结球白菜爱知结球白菜 (C1 ) 和新理想白菜 (C2 ) 的子叶为外植体, 研究了不同激素配比、AgNO3浓度和苗龄对不定芽再生的影响。结果表明, 与 6 BA相比, TDZ对子叶不定芽再生的效果更好。在MS+0 5mg·L-1 NAA+1mg·L-1 TDZ培养基中, 2个品种的子叶不定芽再生率分别达到 75 0%和 55 0%。在此基础上, 添加 5mg·L-1 AgNO3 时, C1 和C2 子叶不定芽再生率分别达到 96 7%和 80 0%, 并以 5~8d为子叶不定芽再生的最佳苗龄。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 范爱丽  孙艳  徐凌飞  梁东  邹志荣  
研究了TDZ和IBA浓度、苗态、外植体切割和接种方式及基因型对黄瓜子叶节再生体系建立的影响。结果表明,最佳芽诱导培养基为M S+0.005 m g/L TDZ+0.05 m g/L IBA;两片子叶脱离种壳且与下胚轴处于弯曲状态的子叶节再生频率最高;保留单片子叶、下胚轴纵切、切除此子叶的2/3且竖直插入为最佳切割和接种方式;农城3号为最佳基因型,每块外植体再生芽数可达1.89。
[期刊] 华北农学报  [作者] 魏爱民  杜胜利  赵晶  韩毅科  刘楠  张桂华  崔兴华  
以华北类型自交系L04-203为材料,通过对外植体类型、不定芽诱导培养基、芽伸长培养基等进行研究,建立了以子叶节为外植体通过器官发生方式的黄瓜离体体细胞再生体系。研究表明:附带短下胚轴子叶节为最适外植体;BA/NAA比例对愈伤形成和再生频率有直接影响,NAA为零或低浓度时,在外植体切口处直接形成再生芽,随着NAA浓度增加,切口处愈伤量增大,最佳芽诱导培养基为MS+BA/NAA(2/0.2 mg/L),每外植体出芽数可达3.8;芽伸长培养基为MS+BA 0.5 mg/L。该体系可用于相关转基因研究。
[期刊] 林业科学  [作者] 吴延军  张上隆  谢鸣  陈俊伟  秦永华  秦巧平  
以玉露桃和湖景蜜露桃幼胚及幼胚子叶为试材,研究基本培养基类型、激素、损伤方式等因素对再生的影响。结果表明:培养基是影响幼胚诱导愈伤组织的最重要因素,MS适合供试材料诱导愈伤组织;激素诱导愈伤组织因品种而异,NAA1.0mg·L-1对45d、0.5mg·L-1对55d玉露,BA0.5mg·L-1对55d湖景蜜露效果较好,在试验浓度范围内2,4-D对供试幼胚均无明显效果;幼胚的发育状态是影响诱导愈伤组织的另一因素,玉露桃45d愈伤组织诱导率最高,达96.6%,而55d诱导率为81.6%。愈伤组织可在MS+0.05mg·L-1NAA+1.0mg·L-1BA培养基上分化成芽,再生芽在1/2MS+1.0...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 郭阳鑫  卫志明  佘跃辉  朱木兰  
[目的]建立大豆叶柄外植体的离体再生体系,为大豆遗传转化体系的改进和提高提供技术基础。[方法]以大豆品种‘K06-82’无菌苗叶柄为外植体,比较不同种类的植物生长调节剂及其组合对叶柄愈伤组织诱导、不定芽分化、不定芽伸长及生根等过程的影响,建立大豆叶柄离体再生体系。[结果]大豆品种‘K06-82’的叶柄愈伤组织形成的适宜培养基为改良MS+2.0 mg·L(-1)α-萘乙酸(NAA),愈伤组织形成率为74.21%,愈伤组织密度为0.72 g·cm(-3);不定芽分化的适宜培养基为改良MS+2.0 mg·L(-
[期刊] 中国农业科学  [作者] 周瑞莲  赵哈林  杨树德  Westgate E Mark  
【目的】本研究通过种子快速生长期对3个不同基因型大豆(Evans-低蛋白品种;PI132.217-高蛋白稳定品种;Proto-高蛋白品种)供氮以了解供氮是否能提高种子蛋白质含量并改变种子组分,为大豆合理施氮和育种提供参考。【方法】采用液体组培法,即在植株开花后第18天,采集体积相同的种子,将子叶培养在含氮量不同的营养液中(0、37、75和150mmol·L-1谷氨酰胺)。在植株开花后的第24,30,36和42天以及在液体组培的第6,12,18和24天,分别收集种子和子叶测定干重(DW)和种子组分。【结果】供氮条件下种子鲜重(FW)和干重的积累速率明显比在植株上快。与植株上种子相比,Evans和...
[期刊] 林业科学  [作者] 吴延军  谢鸣  蒋桂华  陈俊伟  吴江  张上隆  
A method for adventitious shoot regeneration from mature cotyledons and leaves of seed-derived Loquat (Eriobotrya japonica cv. ‘Dahongpao') in vitro has been developed. The results showed that: 1) GA pre-treatments could shorten the time of seed germination. 2) Shoots regeneration occurred when matu...
[期刊] 华北农学报  [作者] 刘鹏  张立军  张春兰  黄凤兰  李国瑞  陈永胜  
利用前期构建的P450基因的RNAi植物表达载体侵染蓖麻受体材料,旨在获得转P450基因的阳性株。以蓖麻品种通蓖5号为试验材料,利用根癌农杆菌介导法转化蓖麻子叶节,研究影响子叶节遗传转化的若干因素。结果表明:子叶节对Kan较为敏感,适宜筛选质量浓度为250 mg/L;外植体预培养2~3 d,侵染用农杆菌菌液OD600=0.8,侵染时间10 min,共培养3 d,可获得较高的遗传转化效率。再生植株经PCR和Southern Blot检测,证明为转基因植株。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 孙跃峰  韩明玉  范崇辉  张满让  王淑莉  
 以早熟油桃华光和曙光为材料,研究了培养基(MS,G,WPM)、细胞分裂素(BA,TDZ,ZT,KT)、生长素(NAA)、子叶发育的不同时期(花后30,40,50,60d和采收期)等因子对早熟油桃子叶再生植株的影响。结果表明,华光花后60d为最佳取材时期,其子叶在MS+TDZ2mg/L+NAA0.04mg/L培养基上的再生率为75%;而曙光的最佳取样时间为采收期,其子叶在MS+BA8mg/L+NAA0.04mg/L培养基上的再生率为66.7%。子叶暗培养28d后转入光下进行光暗交替培养,华光、曙光子叶再生率均达到最高。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 陆璐  赵长增  陆婷  
为了通过不定芽发生途径建立甜瓜‘黄蛋子’体细胞再生完整植株的技术体系,并了解掌握该品种的再生能力和再生特点,以‘黄蛋子’的幼龄子叶作为外植体,进行了组织培养条件下的再生试验。试验结果表明,在MS+6-BA2.0mg/L不定芽诱导培养基上外植体发出的再生芽(丛)为不定芽来源。58块外植体的不定芽分化频率平均为44.8%,并产生质地、数量不等的愈伤组织。在MS+6-BA0.05mg/L不定芽伸长培养基上,分化的不定芽(丛)能够伸长长大,但存在程度不同的玻璃化现象。在1/2MS+IAA0.5mg/L生根培养基上无根苗发根,生根率可达99%。与相关文献中报道过的其他甜瓜厚皮品种相比较,‘黄旦子’属再生...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 谢启鑫  黄美连  吴晓萍  庄东红  
【目的】建立君迁子叶片离体再生体系,为转基因操作奠定基础。【方法】以君迁子幼叶为外植体,研究适合其再生植株的叶片部位、放置方式、基础培养基、植物生长调节剂以及暗培养时间等条件。【结果】叶片基部上表面朝下接种于1/2MS+ZT5.0mg·L-1+IBA0.01mg·L-1的培养基,先期暗培养5周后转移至正常光照下培养效果最好,愈伤组织形成率、不定芽再生率和外植体平均不定芽数分别为100.0%、85.3%和2.8±0.6个。再生芽接种于不含植物生长调节剂的1/2MS培养基上,30d时生根率达100%,平均根数和平均根长分别达5.4条和3.7cm。再生植株炼苗后移栽,30d时成活率达98.5%。【结...
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