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[期刊] 浙江林学院学报
[作者]
金则新 李钧敏 钟章成
在进行大血藤遗传多样分析时,首先要建立大血藤RAPD反应优化体系,有必要就反应条件进行探索。以改进SDS法抽提藤本药用植物大血藤叶片总DNA,进行随机扩增多态DNA(RAPD)分析,分别测试了镁离子、dNTP、模板DNA含量、引物浓度、DNA聚合酶量和牛血清白蛋白浓度对反应结果的影响。通过各因子的组合研究,得出大血藤RAPD分析较适宜的扩增条件是:15μLPCR反应体积,1×Taq酶配套缓冲液(10mmol·L-1Tris·HClpH9 0,50mmol·L-1KCl,0 1%TritonX 100,1 5mmol·L-1MgCl2);25 01×10-9mol·s-1Taq酶(上海华美公司)...
关键词：
大血藤 RAPD 化学成分 药用植物
[期刊] 林业科学研究
[作者]
邢新婷 傅懋毅
以麻竹DNA为模板,对影响麻竹RAPD扩增的重要参数进行了优化试验,以期建立麻竹RAPD反应的最适体系。最终得出的麻竹RAPD反应体系为:20μL反应体系,2μL10倍反应缓冲液,模板含量为50ng,2 5mmol·L-1的Mg2+,1 5U的Taq酶,dNTP为1 75mmol·L-1,引物浓度为0 4μmol·L-1。优化后的RAPD反应程序为:94℃3min→[94℃1min→37 5℃1min→72℃1min20sec]40个循环→72℃8min→4℃保持。
关键词：
麻竹 DNA RAPD PCR 优化
[期刊] 林业科学研究
[作者]
李发根 杨华 尹光天 许煌灿 甘四明
Genomic DNA was successfully extracted from leaf tissues of two rattan species,Calamus simplificifolius and Daemonorops margaritae,using a modified CTAB method.This method could remove phenolic compounds,polysaccharides and proteins,and the quality and quantity of DNA extracted were reliably charact...
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
吴少华 张大生 潘东明 赖钟雄
提取了木奈基因组 DNA,并以其为模板对影响 RAPD扩增的重要参数进行优化试验 ,以期建立木奈 RAPD反应的优化体系 .结果表明 ,PCR扩增体系最佳条件是 :2 0 μL体积中 ,2 0 0 μmol·L- 1 d NTP、2 .5 mmol· L- 1 Mg Cl2 、0 .2 μmol· L- 1随机引物、2 5 .0 ng·μL- 1 DNA模板、1 -2 U Tag酶
关键词：
木奈 基因组DNA RAPD
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
徐佳瑜 王晓红 杨胜伟 吕享 张智仙 张明生
以钩藤叶为材料,在干燥温度、提取时间和提取剂浓度3个单因素试验的基础上,采用Box-Behnken中心组合进行3因素3水平试验设计,建立回归方程,优化出钩藤叶中钩藤碱和异钩藤碱的最佳提取条件。模拟得到钩藤叶干燥温度为54.95℃时,钩藤碱和异钩藤碱的最优提取条件为超声时间60 min、甲醇浓度73.35%。在此条件下,钩藤碱的最高提取率为133.342μg·g~(-1),异钩藤碱的最高提取率为429.746μg·g~(-1)。为了方便实际操作,校正条件为干燥温度55℃、超声提取60 min、甲醇浓度73%。通过验证试验得到钩藤碱平均提取率为130.8μg·g~(-1),异钩藤碱平均提取率为425.6μg·g~(-1),与模型预测值较为接近。因此响应曲面法可以对钩藤叶中钩藤碱和异钩藤碱的提取条件进行优化。
[期刊] 浙江林学院学报
[作者]
葛明菊 金则新 李钧敏 钟章成 张利龙
大血藤为一种传统药用植物。为了了解大血藤的药用成分,利用聚酰胺薄层层析及HPLC法分析了大血藤各器官黄酮类化合物的组成。聚酰胺薄层层析及HPLC法分析都显示大血藤叶片含有10种不同的黄酮甙,而嫩茎、叶柄与老茎中分别含有10种、8种及5种不同的黄酮甙;大血藤叶片黄酮类化合物经盐酸水解后HPLC分析显示有8种不同的黄酮类化合物。大血藤叶片及嫩茎的黄酮类化合物组成成分较多,具有一定的应用开发前景。图3表1参8
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
陈玉琼 李安琪 孟燕
采用二次回归正交旋转组合设计方法,研究了温度、时间、料液比、乙醇浓度对藤茶黄酮、二氢杨梅素浸提率、粗黄酮纯度及其对超氧阴离子自由基清除率的影响。结果表明:温度、时间和料液比均能极显著影响藤茶黄酮提取率;建立的黄酮及二氢杨梅素回归模型显著性检验达极显著水平,回归模型的预测值与实测值拟合较好。结合粗黄酮的纯度和对超氧阴离子自由基清除率活性分析,藤茶黄酮的最佳浸提条件:乙醇浓度67%~85%,浸提温度控制在52.5~77.5℃,浸提时间60~100 min,料液比1∶31;二氢杨梅素的最佳提取条件:提取温度控制在65℃,浸提时间94 min,料液比1∶35,乙醇浓度74%。
关键词：
藤茶 黄酮 二氢杨梅素 提取
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
李建光 李荣生 李发根 尹光天 杨锦昌 邹文涛
以蛇皮果顶梢嫩叶为材料,比较了CTAB法、改良CTAB法、CTAB-free法和SDS法对基因组DNA的提取效果,并对蛇皮果RAPD反应体系进行优化。结果表明,CTAB法、改良CTAB法和CTAB-free法均能提取出蛇皮果基因组DNA,其中NaCl浓度为5 m ol/L的改良CTAB法因可更有效地去除多糖及酚类物质,并能满足PCR扩增的要求而被认为是蛇皮果基因组DNA提取的最适方法;在15μL的PCR扩增体系中,Mg2+、dNTPs和Taq DNA聚合酶的最优浓度分别为1.4 mmol/L、0.12 mmol/L和0.12 U/μL;PC R反应程序的最适退火温度为39℃。
关键词：
蛇皮果 DNA提取 RAPD优化
[期刊] 浙江林学院学报
[作者]
杨敬元 熊丹 梁宏伟 王玉兵 廖明尧 陈发菊
以采自湖北省神农架地区的14株香果树Emmenopterys henryi为材料,提取其叶片基因组DNA,并以其基因组DNA为模板进行随机扩增多态性DNA(RAPD)反应条件的优化。RAPD反应条件中的各个因子,包括模板DNA质量浓度、引物浓度、dNTP浓度、DNA聚合酶浓度和Mg2+浓度。结果表明,香果树基因组DNA在以下条件有较好的扩增效果:25μL体系中,Taq酶1.33×10-3kat.L-1;随机引物0.5μmol.L-1;Mg2+2.6 mmol.L-1;dNTP 220μmol.L-1;DNA模板4.40 mg.L-1。聚合酶链式反应(PCR)程序为:94℃预变性5 min,94...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
陈书霞 房玉林 王晓武
通过对影响RAPD标记稳定性的引物浓度梯度、退火温度梯度、dNTP浓度梯度、Taq酶浓度梯度等外部条件的优化研究,确定了RAPD反应适宜的引物浓度为0.1~0.2pmol/μL,退火温度为48~52℃,dNTP浓度为0.3~0.15mmol/L及Taq酶浓度为0.3U/μL,提高了该反应体系中RAPD的稳定性。
[期刊] 林业科学研究
[作者]
杨华 尹光天 甘四明 白嘉雨 李荣生 杨锦昌 陈和明
利用RAPD标记从DNA水平对收集的4个天然黄藤种群进行遗传多样性分析。15条引物扩增得到154条片段,整个种的多态性位点比率为75.97%,Ne i’s指数为0.258 4,Shannon信息指数为0.388 8。黄藤种的遗传多样性为0.257 8,种群间的Ne i遗传分化系数为0.141 2,各种群间的遗传变异非常小。4个种群间的遗传相似性分析结果显示:毛感乡和尖峰岭种群间的遗传相似度最高,吊罗山和坝王岭种群间的遗传相似度最低。AMOVA分析结果表明:种群间基因分化系数为0.026 2,大部分遗传变异(97.38%)来源于群体内。研究结果揭示:收集的天然黄藤种群具有较高的遗传多样性,有良好...
关键词：
黄藤 RAPD 遗传多样性 遗传分化
[期刊] 林业科学研究
[作者]
尹光天 许煌灿
红藤(Daemonorops margaritae(Hance)Becc.),俗名黄藤,属棕榈科有刺攀缘藤本植物,是我国重要的商品藤种之一。天然分布于华南地区的海南省和广东、广西南部地区,分布海拔为0～1200m,是仅分布于我国的特有藤种。但由于对野生资源的过度开发利用,目前天然资源已近枯竭,亟待发展人工栽培。红藤种子在自然条件下容易丧失活力,如即采即播,发芽率低且极不整齐,发芽期可长至10～12个月,甚至更长,致使苗木来源缺乏,价格较高,这势必限制人工栽培的推广。因此,提高红藤种子发芽率,促使种子发芽整齐和降低苗木成本,已成为急需解决的生产问题。本试验旨在探索种子储藏温度和湿度对种子...
关键词：
红藤种子 储藏条件 含水率 发芽率
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
刘春林 阮颖 官春云 周小云 王学军
针对 RAPD反应体系中 Taq聚合酶、d NTP和引物这 3个影响较大的因素 ,设计了一组 3因素 3水平试验 .根据试验结果 ,筛选出了油菜 random amplified polymorphic DNA(RAPD)反应体系中 3因素的最佳浓度配比 ,即 Taq 1.6 U ,d NTP 0 .2 mm ol/ L ,引物 0 .3μm ol/ L .
[期刊] 浙江林学院学报
[作者]
王正加 黄坚钦 郭传友 杨萍 王华芳
建立山核桃RAPD反应优化体系是进行山核桃遗传多样性分析的前提。通过对影响PCR扩增结果的主要因子的组合研究,确定了山核桃Caryacathayensis的最适反应体系和扩增程序,即在20μL反应体系中,含2 5mg·L-1(50ng)模板,2 0μL10×Buffer,16 67pmol·s-1TaqDNA聚合酶;各0 2mmol·L-1dNTPs,3 0mmol·L-1MgCl2,0 3μmol·L-1引物。扩增程序为:94℃预变性300s,94℃变性30s,38℃退火30s,72℃链延伸90s,38次循环,72℃后延伸420s。图5表2参6
[期刊] 西南农业学报
[作者]
侯万伟 刘玉皎
利用正交设计L16(45)对蚕豆RAPD-PCR反应的5因素(Taq酶、Mg2+、dNTP、模板DNA、引物)在4个水平上进行优化试验,结果表明蚕豆最佳的RAPD-PCR的反应体系(20μl)为:10×缓冲液2.0μl,1.0 UTaqDNA聚合酶、1.5 mmol/L Mg2+、0.4mmol/L dNTPs、3 mmol/L引物、200 ng模板DNA。
关键词：
蚕豆 RAPD 反应体系
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