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[期刊] 中国水产科学  [作者] 田永胜  陈松林  严安生  
用大菱鲆(Scophthalmusmaximus)神经期胚对6种抗冻剂的毒性进行检测,发现其毒性排列为:1,2-丙二醇(PG)<甲醇(MeOH)<甘油(Gly)<二甲基甲酰胺(DMF)<乙二醇(EG)<二甲亚砜(DMSO)。以DMF为主因子配制和筛选出11种玻璃化程度较好的玻璃化液,并用大菱鲆肌节期胚对其中5种玻璃化程度最好的玻璃化液进行检测,结果显示,A4(DMSO20%+DMF25%)、A7(DMSO25%+DMF20%)较适合于大菱鲆胚胎的平衡处理,利用A4和A7平衡处理神经期胚、肌节期胚、心跳期胚、出膜前期胚,结果显示大菱鲆神经胚和肌节胚对玻璃化液的适应能力较强。实验测试出不同时期胚胎...
[期刊] 水产学报  [作者] 田永胜  陈松林  于过才  季相山  
大菱鲆隶属于鲆科(Bothidae)、菱鲆属(Scophthalmus), 自然分布于大西洋东侧欧洲沿岸以及黑海和地中海沿岸, 是欧洲的重要养殖鱼类之一,1992年黄海水产研究所自英国引进这一鱼种,目前已在我国山东、辽宁、福建等沿海地区推广养殖,成为我国工厂化海水养殖的名贵鱼种之一。对于这一引进的新鱼种,在其胚胎和仔稚幼鱼的发育,体表色素细胞形态,卵膜对DMSO的渗透性等生物学方面进行了一定的研究,而做为一个新的鱼种资源,对其种质资源的保存研究,目前国内还未有报道。冷冻保存是长期保存鱼类种质资源和遗传多样性的有效手段,但鱼类胚胎由于体积大(直径为1-6 mm),膜通透
[期刊] 水产学报  [作者] 章龙珍  鲁大椿  柳凌  郭峰  张洁明  
泥鳅胚胎 (胚孔封闭期 )用 10 #玻璃化液作为低温保护剂 ,经低温 (- 196℃ )冷冻保存 17h后 ,38℃水浴解冻 ,解冻后的胚胎获得了成活。在稀释液B1、B2、B3中分别有 2 6 .7% ,15 .0 % ,3.0 %成活的胚胎。解冻后的胚孔封闭期胚胎经过 5 0h的培养 ,胚胎从胚孔封闭期发育至尾鳍出现期。
[期刊] 中国水产科学  [作者] 黄晓荣  庄平  章龙珍  冯广朋  刘鉴毅  张涛  赵峰  
研究了中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)4个不同发育时期胚胎对A号玻璃化液的耐受性和玻璃化冷冻保存。结果表明,不同时期的胚胎对玻璃化液的耐受能力不同,其中卵裂期胚胎对玻璃化液的耐受能力较差(20~30 min),前无节幼体期和原溞状幼体期胚胎在玻璃化液中的适应时间较长(40~60 min);随着平衡时间的延长,中华绒螯蟹各个时期的胚胎成活率逐渐下降。中华绒螯蟹前无节幼体期胚胎在A号玻璃化液中平衡40 min,0.25mol/L的蔗糖分别洗脱5、10、15、20 min后,胚胎成活率无显著性差异(P>0.05)。前无节幼体期胚胎在A号玻璃化液中平衡40 min,在–196℃冷冻4...
[期刊] 淡水渔业  [作者] 章龙珍  鲁大椿  柳凌  郭峰  张洁明  
[期刊] 淡水渔业  [作者] 章龙珍  刘宪亭  鲁大椿  郭峰  张洁明  柳凌  
本文通过5种不同抗冻剂,55组不同浓度组合,筛选出11组冷冻时能形成玻璃化最低浓度的抗冻剂和10组解冻时能形成玻璃化的抗冻剂。并对11组玻璃化液在低温下的一些物理特性进行了测定。不同组合的玻璃化液其冰点和融点各不相同,最高冰点在-19.5℃,最低达-39℃。融点最高-40℃,最低-90℃。鳝鱼胚胎在5-e中心跳时间最长达30分钟,在10-c、5-e中换17号解冻液后存活最多,达89.0%以上。
[期刊] 海洋水产研究  [作者] 田永胜  刘本伟  陈松林  
为避免鱼类胚胎玻璃化冷冻过程中脱玻璃化现象发生,本文对冷冻过程中温度变化及解冻方法进行了研究。在室温13℃下,将含有玻璃化液FVS3的麦管直接投入到-196℃的液氮中,麦管内温度达到-196℃时,所用的时间为15.46±1.38s,降温速率为800℃/min。对玻璃化麦管在35~45℃水浴中解冻时间进行测定。结果显示,解冻所需时间在6.17~7.94s之间,麦管从-196℃升高到13℃的解冻速率为1500~2000℃/min。当水浴温度从37℃逐步升高到72℃时,对水浴表面蒸气温度的变化进行了测定,相应水温下蒸气温度从25.47℃升高到38.6℃。在麦管中加入不同浓度的玻璃化液FVS1、FVS...
[期刊] 淡水渔业  [作者] 章龙珍  刘宪亭  鲁大椿  柳凌  郭峰  张洁明  
通过不同抗冻剂组成的玻璃化液在室温和低温下对泥鳅胚胎的平衡处理,证实了抗冻剂在室温下对胚胎的渗透比在低温下迅速。不同组合的抗冻剂渗透速度不同,但对胚胎的作用均表现为使胚胎从一开始的透明状态逐步变成乳白色不透明状态,从乳白色不透明状态逐步变成透明状态,再从透明状态逐步变成乳白色不透明状态。在一定的时间范围内,更换解冻液后,这种反应呈“可逆反应”,胚胎能够成活。证明了胚胎在抗冻剂中,当第一次变成不透明时并不是真正死亡,真正的死亡是胚胎达到完全透明以后,第二次变成乳白色不透明状态。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 剧世强  赵雪璠  张妍婷  孔妍  李建珅  芮荣  
以小鼠卵丘细胞为供核细胞,猪体外成熟去核卵母细胞为受体,构建小鼠-猪种间体细胞核移植(iSCNT)胚胎,并以猪体细胞核移植(pSCNT)胚胎为对照,采用开放式拉长细管(OPS)法对所获iSCNT胚胎进行冷冻保存,研究不同冷冻保护液(ES、EFS和EDFS)及胚胎不同发育阶段(2-、4-、8-细胞)对冷冻效果的影响。结果显示:小鼠-猪iSCNT胚胎卵裂率与猪pSCNT胚胎相比无显著差异(P>0.05),但其8-细胞发育率则明显较低(28.1%对56.8%,P<0.05)。采用ES液作为冷冻保护液,iSCNT胚胎冻后存活率与EDFS组相似,但显著高于EFS组(28.6%和22.7%对9.5%,P<...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 刘本伟  陈松林  田永胜  孔晓瑜  王春花  
以牙鲆(Paralichthys olivaceus)不同发育期胚胎为实验材料,研究了7种渗透性和5种非渗透性抗冻剂对牙鲆尾芽期和心跳期胚胎的毒性,同时对玻璃化液在不同胚胎发育期的毒性作用,以及玻璃化颗粒冷冻过程中,冷冻颗粒降温和解冻的时间进行了研究。结果表明,单一渗透性抗冻剂对牙鲆胚胎的毒性随着抗冻剂浓度的升高、平衡时间的延长而提高,其毒性由大到小依次为乙二醇(EG)、酒精(EtOH)、甘油(Gly)、二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基亚砜(DMSO)、甲醇(MeOH)、1,2-丙二醇(PG)。非渗透性抗冻剂中聚乙烯吡咯酮(PVP)对牙鲆尾芽期胚胎的毒性最强,其次是蔗糖和D果糖,葡聚糖和葡萄糖毒...
[期刊] 西南农业学报  [作者] 龚明霞  陈小凤  方锋学  方峰  梁家作  黄熊娟  
为了找出能够克服或降低洋桔梗组培苗玻璃化的最适培养条件,以YELLOW和PINK2个洋桔梗品种为试材,研究MS培养基中添加的激素、蔗糖、活性炭及温度对洋桔梗组培苗玻璃化的产生和恢复的影响。结果表明:品种、6-BA、NAA对洋桔梗玻璃化芽的产生均有影响,玻璃化率随6-BA及NAA浓度的增大而升高;适宜浓度的蔗糖对洋桔梗玻璃化芽的恢复有促进作用,但添加0.5 g.L-1的活性炭及15℃的低温培养没有明显地促进作用。
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 李栋  毛志怀  
利用玻璃化转变理论对稻米的干燥过程进行了试验研究。在干燥过程中 ,稻米会发生玻璃化转变现象。稻米的含水率越高 ,其玻璃化转变温度越低。建立了稻米玻璃化转变温度与其含水率之间的关系方程式 :Tg=77.1- 1.7w。发生玻璃化转变以后 ,稻米胚乳组织的淀粉颗粒变得杂乱无序 ,应力裂纹率明显上升 ,稻米能够承受的破裂载荷显著下降
[期刊] 湖南农业大学学报  [作者] 张宏志  唐前瑞  周朴华  
综述了离体培养中已观察到有试管苗玻璃化现象的观赏植物种类 ,玻璃苗的形态解剖和生理生化特点 ,影响试管苗玻璃化的因素及克服试管苗玻璃化措施的研究进展
[期刊] 林业科学  [作者] 吴迪  关录凡  王秋玉  
In this study, the vitrificated plants of hybrid aspen (Populus tremula? P.tremuloides) by micropropagation were used as the materials,and ELISA method was adopted to measure the content of endogenous plant hormones in the plants. At the same time, the factors that influenced the vitrification of th...
[期刊] 北京林业大学学报  [作者] 李云  田砚亭  罗晓芳  
该文研究了试验因子与珠美海棠(Maluszumi)玻璃苗发生的关系,并利用呼吸抑制剂探索了玻璃苗产生的机理.结果表明:玻璃苗产生与多种因子有关.当光呼吸途径和磷酸戍糖呼吸途径(HMP)被抑制时,玻璃苗显著增加,初步认为是植物体内的呼吸代谢途径受阻所致
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