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[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 赵晓蕾  田甜  胡远亮  赵述淼  梁运祥  
通过高效凝胶过滤层析和反相高效液相色谱先后对大米渣蛋白酶解后的多肽溶液进行分离纯化,分别得到组分2和组分RF9;再经反相高效液相色谱-质谱联用对组分RF9进行分析鉴定得到抗氧化肽氨基酸序列L-Q-P-Y(Leu-Gln-Pro-Tyr),分子质量为520.277u。合成的抗氧化肽片段L-Q-P-Y质量浓度为1 mg/mL时,对DPPH自由基清除率达到85.84%。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 张名位  郭宝江  张瑞芬  池建伟  魏振承  徐志宏  张雁  
目的分离、纯化和鉴定黑米抗氧化的主要活性成分。方法以体外总抗氧化能力为活性跟踪指标,对黑米抗氧化提取物用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇等不同极性溶剂萃取分部后得到抗氧化能力最强的部分,再用SephadexLH-20分离得到抗氧化主活性成分,采用紫外-可见光谱、红外光谱、ESI-MS质谱和核磁共振(1HNMR和13CNMR)波谱法对其进行结构解析。结果黑米抗氧化提取物的5种溶剂萃取物以水部和正丁醇部的抗氧化能力最强,其总抗氧化能力分别为383和392ku·g-1,其中,从水部可得到4种抗氧化主活性成分,总抗氧化能力分别为976、878、1134和1087ku·g-1。波谱结构解析表明,4种成分均...
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 赵侠  李燕  孙慧敏  郑昌亮  宋益善  
食源性二肽基肽酶IV(dipeptidyl peptidase-IV,DPP-IV)抑制肽和抗氧化肽分别有助于清除体内自由基和调节机体血糖。为实现脱脂南极磷虾粉的高值化利用,为糖尿病治疗寻找新方法,从脱脂南极磷虾粉酶解产物中制备DPP-IV抑制肽和抗氧化肽。使用碱性蛋白酶、中性蛋白酶和胰酶水解脱脂南极磷虾粉,探究时间与水解度、活性、产率的关系,并分离纯化多肽,最后通过分子对接确定抑制作用位点。结果表明,酶解液经超滤、Sephadex G15分离纯化和液相-质谱联用技术鉴定后,得到了4条具有DPP-IV抑制和抗氧化作用的肽,氨基酸序列分别为WPPLSPFRCPR、IPDWFLNRQ、FLWLKKTPLPL和DTVPWFPR。其中IPDWFLNRQ具备较高DPP-IV抑制活性,DPP-IV抑制活性IC_(50)值为(0.616±0.097) mmol/L;WPPLSPFRCPR具有较高的抗氧化活性,DPPH EC_(50)值为(0.0983±0.011) mmol/L,ABTS EC_(50)值为(0.116±0.073) mmol/L。分子对接结果表明这4种肽主要通过氢键与DPP-IV活性中心及其以外的位点相结合,从而达到抑制DPPP-IV活性的作用。本研究基于脱脂南极磷虾粉制备食源性DPP-IV抑制肽和抗氧化肽,以期为南极磷虾粉的开发利用提供理论依据。
[期刊] 北京林业大学学报  [作者] 潘月  雷美玲  吕兆林  任美玲  王小玉  王媛媛  张柏林  
对超临界CO2流体萃取技术提取的竹叶粗多糖采用分级醇沉、脱蛋白质及纤维素柱层析等技术分离纯化,研究分离纯化后的竹叶多糖产物的物化指标。研究结果表明:经超临界CO2流体萃取技术提取得到的毛竹叶粗多糖,采用体积分数为70%的乙醇沉淀,得到预纯化产物,预纯化产物得率17.75%,多糖含量9.586 mgg,总抗氧化能力2.556 mgg VC;预纯化产物再经Sevag法脱蛋白质及DEAE-52纤维素层析柱层析,获得一种中性竹叶多糖,其平均分子量为5.051×104,IC50值为0.178 mgg竹叶多糖,与VC(IC50值为0.158 mgg)相比,具有较好的DPPH清除能力。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 黄文  谢笔钧  王益  杨尔宁  罗锐  
选用江苏省泰兴市大佛指白果为原料,采用盐溶和盐析的方法,从白果中分离制备出清蛋白(GAP)、球蛋白(GGP)和盐溶蛋白(GSP)。白果蛋白中以清蛋白和球蛋白为主,醇溶蛋白、碱溶蛋白和复合蛋白含量很少。化学成分分析表明,制得的GAP、GGP和GSP中以GAP的蛋白质纯度高,氨基酸组成丰富、合理,属于优质蛋白质。活性试验结果表明GAP的抗氧化活性远高于GGP。
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 葛智超  郎蒙  李燕  
以裸藻为原料,将粗提后的裸藻多糖(EGPS)经DEAE-纤维素和Sephadex G-100柱层析进行分离纯化,得到3个主要组分EGPS1-A、EGPS1-B、EGPS3-A,并对其进行纯度鉴定和抗氧化活性分析,将纯化后抗氧化活性较好的裸藻多糖进行分子量测定、单糖组成分析。纯度鉴定结果表明柱层析后得到的3个多糖组分纯度较高,红外光谱表明其均具有典型的糖类特征吸收峰。抗氧化实验表明3个多糖组分中EGPS1-A的综合抗氧化活性最高,EGPS1-A的分子量为136.8ku,单糖组成包括甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、岩藻糖,单糖组分间物质的量比值是0.072:0.43:0.049:0.01:0.26:0.62:0.53:0.18:1.01。
[期刊] 上海水产大学学报  [作者] 魏文志  夏文水  吴玉娟  
从小球藻中提取蛋白质,并研究了小球藻蛋白质抗氧化特性。通过反复冻融、细胞破碎、离心、盐析和凝胶层析,从小球藻中得到两种蛋白质(ProⅠ和ProⅡ),获得率分别为0.280%和0.664%。经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示为单条带,分子量分别为20.2 ku和20.4 ku。紫外可见光谱显示,ProⅠ在280 nm有一特征吸收峰,ProⅡ在280 nm和675 nm处各有一特征吸收峰。体外设计清除超氧阴离子自由基(O2?.)和羟自由基(.OH)实验,结果显示两种蛋白质能清除超氧阴离子自由基,黑暗条件下能清除羟自由基,但光照条件下生成羟自由基。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 陶正清  刘登勇  戴琛  刘源  周光宏  徐幸莲  
为了明确盐水鸭中的关键性呈味肽,对盐水鸭水提物中的小分子肽进行了分离纯化和结构鉴定。采用分级超滤、葡聚糖凝胶Sephadex G-15过滤层析对盐水鸭的小分子肽提取液进行分离纯化,结合感官评定和电子舌分析筛选出其中呈味特性最强的组分,利用纳升液相色谱-电喷雾静电场轨道阱组合式高分辨质谱联用系统对其进行进一步分离纯化和结构鉴定。结果表明:超滤和凝胶分离后得到5个分离组分(F1、F2、F3、F4和F5),经过感官评定和电子舌分析后发现F1组分的稀释因子最高,达128,且与超滤组分(F)的滋味特征相似。因此对F1组分进行液质联用分析,得到7条由6~9个氨基酸残基组成的肽链,其中3条肽链可信度和相对离...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 邢路娟  胡亚亚  周光宏  张万刚  
[目的]本文旨在研究传统发酵肉制品中粗肽的抗氧化活性。[方法]以宣威火腿为材料,通过磷酸溶解的方法提取其粗肽,测定了冻干后粗肽粉中粗肽含量、粗肽提取率及粗肽液抗氧化活性指标。以丁基羟基甲苯(BHT)和谷胱甘肽(GSH)作对照,通过体外试验检测不同质量浓度粗肽液的羟自由基(·OH)清除率、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除率、螯合金属离子能力、清除超氧阴离子自由基(O·-2)和抑制脂质氧化的能力。[结果]宣威火腿的粗肽提取率为3.44%,其抗氧化活性随粗肽液质量浓度的增加而逐步增强。当质量浓度为5.0 mg·m L-1时,宣威火腿粗肽液对DPPH自由基清除率为64.71%;亚铁...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 袁野  朱仕豪  凌志辉  曾敏  陆英  钟晓红  
以瓜蒌皮为研究对象,采用大孔吸附树脂法纯化瓜蒌皮中的多酚类化合物,对纯化工艺参数进行筛选,对纯化产物的抗氧化活性进行检测。结果表明:AB–8大孔吸附树脂对瓜蒌皮多酚具有良好的吸附和解吸性能,最佳吸附工艺参数为提取液中多酚质量浓度0.60 mg/mL,料液pH值3.0,上样流速2 BV/h,上样体积4 BV;最佳洗脱工艺参数为洗脱液乙醇的体积分数60%,体积6 BV,洗脱流速2 BV/h;纯化后产品中多酚的含量达49.52%,较纯化前提高57倍;瓜蒌皮多酚纯化前后对DPPH+自由基清除作用的IC50分别为2.01mg/mL和0.53mg/mL,对ABTS+自由基清除作用的IC50分别为0.62 mg/mL和0.13 mg/mL,纯化后抗氧化活性增强了4~5倍。
[期刊] 林业科学  [作者] 徐洪宇  张晓茹  王军辉  黄晓华  雷鸣  董娟娥  尉芹  
前期研究发现,楸树叶粗提物的乙酸乙酯萃取相具有较强的抗氧化活性。为了进一步明确其抗氧化活性成分,以硅胶柱色谱结合清除DPPH自由基法,寻找抗氧化能力较强的组分,并利用半制备液相色谱对该组分进行分离、纯化,以清除DPPH自由基、还原力和清除ABTS自由基能力作为考察指标,根据理化性质及光谱数据鉴定化合物。结果从楸树叶粗提物的乙酸乙酯萃取相中分离得到了2个化合物,分别为木犀草素(1)和芹菜素(2)。化合物1的抗氧化活性强于BHT和化合物2;化合物1清除DPPH自由基、还原力及清除ABTS自由基的IC50值分别为23.89,29.77和43.47μg!mL-1;化合物1的抗氧化活性强于化合物2,主要...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 李秉定  
茶叶抗氧化剂的初步分离采用葡聚糖凝胶 LH-20柱层析(洗脱剂无水乙醇,280nm 检测)得到12个部分,其中5个部分对亚油酸具有很强的抗氧化活性.采用高效液相色谱分析法测定了这5个抗氧性部分的组成.经过进一步层析分离,纯化后利用熔点测定、纸层析、气相色谱、高效液相色谱、红外光谱,质谱以及气-质联用分析等现代分析方法鉴定出1—(—)—表儿茶素、(—)—表棓儿茶素、(—)—表儿茶素没食子酸酯、(—)—表棓儿茶素没食子酸酯、d—(+)—儿茶素和咖啡因等6种抗氧成分。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 陈思远  刘永祥  曹小舟  张逸婧  陈海娟  沈新春  
【目的】探究能有效地从小麦胚芽清蛋白二步双酶酶解物中分离得到高活性抗氧化肽的工艺。【方法】以小麦胚芽清蛋白为原料,DPPH自由基清除率和Fe~(2+)螯合能力为抗氧化活性的评价指标,通过胰蛋白酶进行酶解,依次采用超滤膜和凝胶过滤色谱(SePHaDex G-75)对酶解产物进行分离纯化,筛选出活性较高的组分;采用碱性蛋白酶对获得的活性较高组分进行酶解,通过凝胶过滤色谱(SePHaDex G-15)和反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离纯化其酶解产物;采用质谱技术(eSI-TOF MS/MS)对抗氧化活性最高的组分进行结构鉴定。【结果】分离得到3个活性组分(峰)P_a、P_b、P_C,采用DPP...
[期刊] 西南农业学报  [作者] 王炳祥  顾国生  李鑫雨  葛利江  
本文分离并初步鉴定山羊胎盘小肽,探讨各小肽对小鼠抗氧化能力的影响。采用超滤法制得山羊胎盘小肽的粗提物(Mr≤10 kDa),经Superdex-75层析分离,Tricine-SDS-PAGE蛋白质电泳初步鉴定,分离的各种小肽及粗提物按低中高剂量分别腹腔注射小鼠,每天1次持续1周,测小鼠血清中SOD和MDA的含量。结果表明:Superdex-75层析得到4个组分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ,电泳显示其分子量分别为10.139、8.166、7.447、6.761 KDa,试验小鼠血清检测显示Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组的SOD和MDA含量与对照组没有显著差异(P(0.05),Ⅳ和粗提物能提高SOD含量和降低MDA含量,不过低剂...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 钟雅  付康  陈正望  陆婕  
以野生家蝇干燥幼虫为原料,在常规的生化提取基础上,通过反相高效液相色谱(RP-HPLC)法进一步纯化,并结合电洗脱技术,利用灵敏的杀菌活性检测手段,从家蝇抗菌肽总组分中分离纯化出1个20 ku的抗菌肽,对苏云金芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄葡萄球菌均有杀灭作用。
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