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[期刊] 水产学报
[作者]
杨萍 柯虹乔 章超桦 洪鹏志
研究大眼金枪鱼头蛋白酶解物1 ku超滤组分体外的还原力、自由基清除能力及对衰老小鼠体内抗氧化能力的影响,分析1 ku超滤组分的一般成分、氨基酸组成及分子量分布,为进一步分离纯化金枪鱼头抗氧化肽提供基础。体外结果显示,1 ku超滤组分对羟基自由基、超氧阴离子和DPPH自由基的清除活性随浓度的增加而增强,IC50分别为1.38、0.73与0.93mg/mL,还原力也随浓度的增加而增大,在浓度为12.5 mg/mL时为0.763;体内结果显示,灌胃30 mg/kg的1 ku超滤组分连续42 d,D-半乳糖致衰老小鼠肝组织的超氧化物歧化酶(SOD)活性、肝组织和血清的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
周亚迪 汪之颖 姚旻晶 范鸿冰 洪惠 罗永康
为系统考察酶解时间、酶种类和酶加入的顺序对猪血浆蛋白酶解产物抗氧化性的影响,采用风味蛋白酶、碱性蛋白酶及双酶(风味蛋白酶,碱性蛋白酶不同的加入顺序)在各自最适条件下对猪血浆蛋白进行酶解,并研究酶解产物的功能特性。结果表明:0~120min内,随着酶解时间的延长,水解度升高,各酶解产物的抗氧化性均有所增强;60~180min内,双酶酶解产物的清除DPPH自由基的能力、亚铁离子螯合能力和还原力显著高于单酶酶解产物(P<0.05);90~150min内,先加碱性蛋白酶后加入风味蛋白酶酶解的酶解产物的水解度、清除DPPH自由基能力和还原力显著高于先加风味蛋白酶酶解后加入碱性蛋白酶酶解的酶解产物(P<0...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
李雪 罗永康 尤娟
为全面了解水解度(DH)、蛋白酶种类对草鱼鱼肉蛋白酶解产物抗氧化性和功能特性的影响,采用木瓜蛋白酶及Alcalase 2.4L在各自最适条件下进行酶解,制备水解度为10%和20%的酶解产物,对其功能特性进行分析。结果显示:随着水解度升高酶解产物的亚铁离子螯合能力增强,但还原力和清除DPPH自由基的能力下降(P<0.05)。2种蛋白酶酶解产物的溶解性、乳化性、起泡性均在pH4时达到最低,而后随pH升高而增大。相同pH下随着水解度的升高酶解产物的溶解性增强,乳化性下降。...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
方勇 杨方美 赵殿峰 杨文建 赵立艳 辛志宏 马宁 施瑛 胡秋辉
【目的】研究木瓜蛋白酶对条斑紫菜R-藻红蛋白的抗氧化性和肿瘤增殖抑制活性的影响。【方法】采用超声波破壁法提取条斑紫菜R-藻红蛋白,用DEAE柱层析法纯化后进行木瓜蛋白酶酶解,通过正交试验设计,以还原力A700为考察指标确定酶解反应的最佳工艺参数,进一步测定获得的R-藻红蛋白及其酶解物的还原力、清除羟自由基能力和对人肉瘤细胞U2O及人肝癌细胞HepG-2的肿瘤增殖抑制活性。【结果】R-藻红蛋白的最佳酶解工艺条件为:木瓜蛋白酶添加量25 000 U.g-1,pH 7.0,温度50℃,酶解时间4 h。在此条件下,R-藻红蛋白酶解物还原力为0.573,较未酶解的R-藻红蛋白提高了2.35倍;清除羟自由...
[期刊] 水产学报
[作者]
杨帆 栗丽 陈荫 王斌 王加斌
以孔鳐软骨为材料,采用盐酸胍抽提、丙酮分级沉淀,制备孔鳐软骨蛋白;以DPPH·和HO·清除活性为导向,采用胰蛋白酶酶解、膜超滤、DEAE-52阴离子交换层析、Sephadex G-15凝胶层析和反相高效液相色谱(RP-HPLC)等技术,制备抗氧化肽,并对其活性进行系统评价。结果显示,孔鳐软骨蛋白经胰蛋白酶酶解和分离纯化得到2个抗氧化肽RCPE-A和RCPE-B,经氨基酸序列分析确定其序列分别为Gly-Glu-Glu-Gly-ProArg-Gly (GEEGPRG)和Gly-Glu-Glu-Gly-Thr-Met-Gly-Leu (GEEGTMGL),质谱(ESI-MS)测定其分子量分别为700.71和792.87 u。体外自由基清除实验结果显示,RCPE-A与RCPE-B对DPPH·(EC50 2.94和1.16 mg/mL)、HO·(EC_(50) 0.34和0.54 mg/mL)、ABTS~+·(EC_(50) 0.34和0.10mg/mL)和O_2~-·(EC_(50) 0.11和0.03 mg/mL)具有良好的清除作用,RCPE-A与RCPE-B亦显示出较强的脂质过氧化抑制作用。研究表明,孔鳐软骨蛋白酶解物及制备多肽可用于抗氧化相关的功能食品开发,也可以用作抗氧化剂延长相关产品的货架期。
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
田宝玉 赖丽蓉 蔡婉玲 黄薇 郭菁 蓝灿华 宋永康
通过对比水产品加工蛋白酶及其底物特异性位点突变酶E156S、E156N和E156D对白鲢鱼肉蛋白水解能力及其酶解产物抗氧化性的差异,探讨底物特异性改变对酶的酶解效率和产物活性的影响.结果表明,突变酶E156D的终水解度最高(15.22%),其次为E156S(13.60%),远高于E156N与原酶的9.37%.原酶和突变酶E156S酶解白鲢鱼肉产物的抗氧化性无明显差异,分别为83.79%和84.05%.而突变酶E156N酶解白鲢鱼肉产物的抗氧化性为76.6%;E156D酶解白鲢鱼肉产物的抗氧化性最低(50.05%).说明枯草蛋白酶BPN底物特异性相关的156位点突变对蛋白酶水解鲢鱼蛋白能力和产物...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
韩晓燕 包郁明 辛凤姣 孔志强 Christophe Blecker 戴小枫
【目的】通过体外模拟动物胃肠道消化环境，对两种棉籽蛋白的酶解产物抗菌活性进行研究，为棉籽蛋白精深加工、高值化利用提供理论依据。【方法】以棉籽粕为原料，用ＯｓｂＯｒｎｅ法和传统的碱溶酸沉法分别制备棉籽蛋白（清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白及谷蛋白）和棉籽分离蛋白（ｃＯｔｔＯｎｓｅｅｄ ｐｒＯｔｅｉｎ ｉｓＯｌａｔｅ，ｃｐｉ），用凯氏定氮法测定所得棉籽蛋白的蛋白含量，ｔｒｉｃｉｎｅ－ｓｄｓ－ｐａＧｅ测定蛋白亚基组成，通过扫描电镜观察蛋白的表面微观结构，选取蛋白含量较高的球蛋白（ｃＯｔｔＯｎｓｅｅｄ ＧｌＯｂｕｌｉｎ，ｃｐＧ）和ｃｐｉ进行研究。通过体外模拟动物胃肠道消化环境，用胃蛋白酶和胰蛋白酶依次对ｃｐＧ．．．
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
曾少葵 蓝海明 章超桦 洪鹏志
以罗非鱼鳞为原料,提取酸溶胶原蛋白(acid-soluble collagen,ASC)和酶促酸溶胶原蛋白(pepsin-soluble collagen,PSC),并对PSC的理化性质及其酶解产物抗氧化性进行探讨。实验结果表明:0.1 mol/L HCl提取ASC和PSC的得率分别为3.52%和14.88%;PSC氨基酸组成中,每1000个氨基酸残基甘氨酸为351个,亚氨基酸——脯氨酸和羟脯氨酸为180;PSC强吸收峰在205 nm处,磷酸盐缓冲液检测PSC的性质,与I型胶原蛋白相符。PSC经胃蛋白酶水解3 h,过氧化抑制率达到82.8%,抗氧化效果略优于等量的Vc。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
张钺 尤留超 朱颍琨 莘余 吕尚揆 裴淼毓 傅宏庆 沈留红
为探究胰蛋白酶、胃蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解奶牛胎盘产物间差异,用此3种酶在最优条件下酶解奶牛胎盘获得胎盘酶解产物,每种酶重复3次,利用LC-MS/M技术鉴定产物中蛋白和肽段,BIO-PEP数据库匹配和测算十肽及以下的抗氧化活性多肽。结果显示:胰蛋白酶、胃蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解产物分别鉴定出541、137和86种蛋白,2 766、1 170和128个肽段,胰蛋白酶鉴定蛋白和肽段数极显著高于其余2种酶(P<0.01),木瓜蛋白酶鉴定蛋白和肽段数均显著低于其余2种酶(P
[期刊] 海洋渔业
[作者]
胡昂 段蕊 刘志东 林娜 张俊杰 李磊 蒋玫
采用响应面法优化中性蛋白酶酶解海湾扇贝(Argopecten irradias)副产物蛋白制备抗氧化酶解物工艺。以DPPH自由基清除率和还原能力为响应值,在底物浓度、温度、时间、酶与底物比4个单因素实验基础上,优化确定3个显著性因素。获得实验条件下最佳制备工艺为:底物浓度25 mg·mL~(-1)、温度50℃、时间3.8 h、酶与底物比1.5%。在此条件下,实验验证酶解海湾扇贝副产物蛋白制备抗氧化酶解物的DPPH清除率为81.93%(预测值为83.19%),还原能力为58.12%(预测值为58.92%),DPPH自由基清除率和还原能力的IC_(50)值分别为0.264 mg·mL~(-1)和3.136 mg·mL~(-1),且表现出较强的抗氧化活性。研究表明,优化后的回归模型用于预测中性蛋白酶酶解海湾扇贝副产物蛋白制备抗氧化酶解物是可行的。
关键词：
海湾扇贝 副产物 抗氧化酶解物 响应面
[期刊] 水产学报
[作者]
陈俊杰 陈季旺 谭玲 廖鄂 程水源 夏文水
为从蛋白质水平解释竹叶抗氧化物浸泡-乳清分离蛋白涂膜对富硒虹鳟的保鲜机理，将鲜活富硒虹鳟去除头、内脏和表皮，切块后浸泡在1.0%的竹叶抗氧化物（AOB）溶液中（去离子水作为对照），再进行乳清分离蛋白（WPI）溶液涂膜，25℃下鼓风吹干表面水分后置于4℃冰箱中贮藏1、4、7、10和13 d。测定鱼肉中肌原纤维蛋白和TCA-可溶性肽的含量、蛋白质的分子内价键，以及肌原纤维蛋白的总巯基含量、表面疏水性和二级结构，分析涂膜对冷藏富硒虹鳟蛋白质理化性质的影响。结果显示，冷藏期间，WPI组的肌原纤维蛋白含量和二级结构中β-折叠的含量显著高于对照组（P0.05）。3个试验组中，1.0% AOB+WPI组的肌原纤维蛋白、总巯基、氢键、二级结构中α-螺旋和β-折叠的含量在冷藏期间最高，H_(0)、TCA-可溶性肽、二硫键和二级结构中β-转角含量最低。WPI在鱼块表面形成一层薄膜，可以隔绝空气，降低微生物的污染；AOB含有黄酮类、多酚类等，可以清除自由基，抑制巯基氧化和二硫键的生成，延缓肌原纤维蛋白的变性。多酚中的亲水基团也有助于降低肌原纤维蛋白的表面疏水性，提高溶解性。这些结果表明，竹叶抗氧化物浸泡结合乳清分离蛋白涂膜，抑制了蛋白质的变性和降解，延缓了富硒虹鳟的品质劣变。
[期刊] 水产学报
[作者]
向泽敏 邱晓挺 娄永江 严小军
为有效提高鲣鳔蛋白的附加值,研究以DPPH自由基清除率为抗氧化活性评价指标,采用蛋白酶酶解制备活性多肽的工艺,选用菠萝蛋白酶、复合蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶7种酶在各自最适的条件下酶解,筛选出复合蛋白酶为最适用酶,通过单因素实验分别研究加酶量、溶液初始p H、酶解温度和时间对酶解物抗氧化活性的影响,在此基础上,根据响应面法优化鲣鳔抗氧化酶解物的制备工艺。结果显示,最佳酶解工艺条件为加酶量8.53 U/mg,p H 5.54,温度50.03°C,时间5.07 h。此外,利
关键词：
鲣 鳔 酶解 抗氧化活性 响应面法
[期刊] 中国农业科学
[作者]
杨华 刘玉花 马俪珍 孔保华
【目的】利用羊骨中胶原蛋白以获得免疫调节活性肽。【方法】利用木瓜蛋白酶对羊骨蛋白进行酶解,采用四元二次通用旋转设计,考察酶用量(E/S)、水解温度(Temp)、水解时间(t)和底物浓度(S)对免疫活性的影响,并选出最佳的酶解条件。同时采用Folin-酚法测定了酶解产物中可溶性肽的含量,采用SAS软件分析可溶性肽含量与免疫活性之间的相关关系。经Design expert7.1.2软件优选最佳酶解条件。【结果】得出木瓜蛋白酶的最佳水解条件为:酶用量(E/S)1576U·g-1,水解温度为(Temp)64.05℃,水解时间(t)7.22h,底物浓度为(S)0.271kg·L-1。可溶性肽含量与免疫活...
[期刊] 水产学报
[作者]
杨萍 李同刚 佘春霞 洪鹏志 周春霞
研究罗非鱼下脚料蛋白酶解物锌螯合盐(CH-0)及乙醇纯化(CH-Ⅰ)与透析纯化组分(CH-Ⅱ)的理化特性及体外自由基的清除能力,为多肽螯合盐的纯化研究提供理论基础。结果表明,CH-0的蛋白质含量(干基计)为71.86%,CH-Ⅰ和CH-Ⅱ分别为75.94%与78.83%;CH-0的锌含量为16.08%,CH-Ⅰ和CH-Ⅱ分别为14.49%与12.20%;凝胶层析结果显示,CH-Ⅰ、CH-Ⅱ与CH-0相比,有3个相同的主吸收峰,且大分子与小分子杂峰减少;氨基酸分析结果表明CH-Ⅱ中的Asp、Glu、Gly、Lys、Arg和His的含量均高于CH-Ⅰ,且都高于CH-0,与透析纯化相比,乙醇纯化必需...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
孔祥珍 周惠明 钱海峰
【目的】面筋蛋白的水不溶性极大地限制了其在食品中的广泛应用。为此,对小麦面筋蛋白进行酶法水解来提高其溶解性及其它功能性质,从而拓宽面筋蛋白的应用范围。【方法】分别采用胰蛋白酶、胃酶、胰酶和碱性蛋白酶对小麦面筋蛋白进行酶解,并对其蛋白质回收率和水解进程以及酶解物的功能性质进行比较研究。【结果】4种蛋白酶水解面筋蛋白,其蛋白质回收率变化范围为42.50%～81.33%,Alcalase能够有效水解面筋蛋白,其蛋白质回收率最高为81.33%。与面筋蛋白相比,在pH2～12范围内,不同水解度的AWGHs,其溶解性均大大提高(>60%);较低DH(5%)的乳化和起泡性能相对较好。【结论】Alcalase...
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