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[期刊] 华北农学报
[作者]
范尉尉 陈霞 马春红 李广敏 张香云 耿军义
在棉花根冠细胞生物测定过程中,棉花黄萎病病菌通过提纯复壮而达到较强的侵染能力,并制备出较多的黄萎病菌粗毒素。介绍了粗毒素的简易制备、根冠细胞培养与制备过程以及染色过程中染色剂的选择、染色时间的长短。实验与传统方法相比有几点改进:总结出细胞振荡时间在1~2 min之内;之后黑暗条件下静置培养2~6 h;选用pH为6.5的0.01%中性红染色3~5 min,之后加入一滴0.2%伊文思兰染色,伊文思兰的染色时间应严格掌握在3min以内等,为根冠细胞测定方法的推广提供了一定的理论支持。
[期刊] 华北农学报
[作者]
王凯 东保住 张贵 张键 张园园 周洪友 赵君
为了研究马铃薯黄萎病菌的侵染机制，将绿色荧光蛋白基因（ＧＦＰ）通过农杆菌介导的遗传转化方法转入马铃薯黄萎病菌ＶＤ０１２中，经过潮霉素选择性培养基的筛选和分子鉴定，获得了４７株有绿色荧光信号的阳性转化子。随机挑取８株阳性转化子，以野生型菌株为对照，对转化子的菌落形态、菌丝的生长速率、产孢量、粗毒素含量和致病力进行了研究。结果表明，８株阳性转化子中有３株微菌核产生的数量明显高于野生型，１株转化子微菌核产生量低于野生型菌株；各阳性转化子的生长速率和野生型菌株差异不显著；阳性转化子的产孢量与对照相比，有２株差异不显著。其余均有不同程度的降低。保湿培养８ ｈ，所有阳性转化子的平均萌发率低于野生型菌株。相．．．
[期刊] 华北农学报
[作者]
雷宇华 闫芝芬 马春红 魏建昆
用稻瘟病菌 90 - 2菌株产生的毒素 ,处理水稻同核异质野败型雄性不育细胞质珍汕 97A及其保持系正常细胞质珍汕 97B的根冠细胞 ,以异硫氰酸荧光素 -鬼笔环肽为探针 ,观察了毒素处理前后细胞微丝骨架的形态及分布变化。结果显示 ,毒素处理前珍汕 97A ,珍汕 97B的根冠细胞中 ,微丝由内向外广泛散布 ,粗细不等 ,呈无序网络分布。毒素处理后 ,珍汕 97A的根冠细胞微丝的密集分布被破坏 ,纤丝状微丝不复存在 ,微丝集聚成粗束 ,有的呈碎片状 ;而珍汕97B的根冠细胞微丝破坏程度轻 ,微丝分布类似于毒素处理前的分布。本文研究了在毒素作用下 ,不同细胞质微丝状态及分布的变化 ,并探讨了毒素...
关键词：
毒素 微丝 雄性不育细胞质 信号转导
[期刊] 中国农业科学
[作者]
崔晓艳 魏太云 陈新
马铃薯Y病毒属(Potyvirus)是包含范围广、增殖过程复杂但基因组简单的一类重要病毒,对农业生产造成重大的经济损失。笔者介绍了马铃薯Y病毒属病毒的细胞生物学研究进展,并对potyviruses的复制模型、运动方式和途径等作了相关总结。
关键词：
马铃薯Y病毒属 细胞生物学 增殖
[期刊] 华北农学报
[作者]
刘建芬 雷煜 张振楠 胡广 唐叶 张宁 司怀军 吴家和
为了防治棉花黄萎病对棉花生产的危害,利用抗病基因培育抗病品种是最经济有效的方法。从陆地棉中克隆了1个WRKY转录因子基因,命名为GhWRKY48;其编码序列全长为882 bp,编码293个氨基酸残基,预测分子质量和等电点分别为32.68 ku和6.10。qPCR组织特异性表达分析结果表明,GhWRKY48在根、茎和叶中均表达,而在茎中为优势表达;同时GhWRKY48表达受到大丽轮枝菌、茉莉酸和水杨酸的诱导。通过病毒诱导基因沉默技术获得GhWRKY48基因沉默植株。对基因沉默植株接种大丽轮枝菌进行抗病性分析,结果显示,沉默植株的病株率和病指均低于对照植株,表明沉默GhWRKY48基因能够提高棉株抗病性。综上所述,GhWRKY48是一个负调控转录因子,抑制下游抗病基因的表达,从而参与棉花对大丽轮枝菌的抗性;因此,GhWRKY48基因可以作为一个理想的候选基因用于棉花的抗病育种。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
马春红 范尉尉 董文琦 李运朝 崔四平 贾银锁
【目的】对黄萎病菌毒素滤液诱导棉花体内抗病性相关酶的研究,探索棉花黄萎病菌诱导抗性的生理机制。【方法】以4种浓度[病菌滤液原液(VD)、1﹕20、1﹕40、1﹕50]的黄萎病菌毒素液,在0、12、24、48、60、72 h预处理后,观察4～6叶龄棉苗叶和根的外部表现及发病情况,测定其植株形态的4～6片真叶萎蔫指标和体内相关抗性酶的变化。【结果】(1)不同浓度的毒素液浸泡棉根48 h后,1﹕20组,真叶萎蔫,子叶倒挂;1﹕40组,真叶轻度萎蔫,子叶萎蔫;1﹕50组,仅表现为子叶失水,1～2片真叶略显失水,大多数真叶完好;而VD对照组表现为3级危害,严重萎蔫。当毒素液浓度降至1﹕50时,预处理棉苗...
[期刊] 华北农学报
[作者]
范强 王乐 谢彩玲 张宁 司怀军 吴家和
为了解决黄萎病对棉花的危害,利用基因工程技术培育抗病棉花品种是当前育种的主要目标。从棉花中克隆了一个黄萎病抗性基因GhCOI1,其编码冠菌素不敏感因子。GhCOI1基因序列全长2 213 bp,编码一个600氨基酸的多肽,分子量为68 k Da,等电点p I是7.06。GhCOI1含有典型的F-box和LRR结构域。组织表达分析表明,该基因在根器官优势表达,并且其表达受到大丽轮枝菌浸染诱导。利用病毒诱导基因沉默(Virus-induced gene silencing,VIGS)技术,抑制了GhCOI1基
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
魏大为 王建新 章元寿
章元寿等1991年提出用大丽轮枝菌(Verticillium dahliae Kleb.,简称VD)培养滤液或粗提毒素处理棉苗,根据对棉苗的致萎活性快速测定棉花品种的抗病性,为加速抗黄萎病品种筛选、育种提供了一条新的途径。大批量测定棉花抗病性时,需将菌株多次转移培
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
张月学 杨茹冰 徐香玲 李集临 韩微波 唐凤兰 刘杰淋 李道明 蒿若超
分别利用0,1000,1500和2000Gy60Coγ射线处理3个品种的紫花苜蓿种子,对同一剂量不同品种或同一品种不同剂量间辐射情况进行比较,研究苜蓿根尖细胞的遗传学效应.结果表明,γ射线辐射苜蓿种子可以抑制根尖细胞有丝分裂,并诱发根尖细胞产生单微核、双微核、多微核、小核、染色体断片、染色体粘连、单桥、双桥、多桥、游离染色体、落后染色体等多种畸变.同一辐射剂量下,龙牧803苜蓿对γ射线辐射敏感性最强.在0～2000Gy范围内,随剂量的增加,各种畸变率不断提高,至2000Gy辐射剂量时,各种畸变率达到最高.
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
武爱波 赵纯森 瞿波 廖玉才
综述了近年来国内外关于小麦赤霉菌主要致病菌种禾谷镰刀菌毒素的形成与致病力的关系、毒素生 物检测及免疫化学检测方法、脱毒技术及毒素代谢途径的分子生物学研究的一些进展。
关键词：
镰刀菌 毒素 致病力 分子生物学
[期刊] 中国农业科学
[作者]
朱荷琴 冯自力 李志芳 师勇强 赵丽红 李彩红 刘义杰 王玲飞
【目的】已知引起植物萎蔫病的轮枝菌有5个"种",本研究旨在澄清在中国引起棉花黄萎病的轮枝菌的"种"类。【方法】从中国12个省84个县分离获得310个轮枝菌菌株,采用生物学性状观察和分子鉴定相结合的方法,对其进行"种"的鉴定。【结果】298株均产生黑色微菌核和轮枝状分生孢子梗,为典型的大丽轮枝菌,另有12个菌株培养性状较为特殊(不产生微菌核,出现黑色菌丝或厚壁孢子),经温度敏感试验、PCR特异扩增及ITS序列进一步鉴定,2株被确定为变黑轮枝菌,其它10株被确定为大丽轮枝菌,没有出现黑白轮枝菌。【结论】在中国三大棉区,棉花黄萎病主要是由大丽轮枝菌引起的。但在长江流域和黄河流域棉区均分离到1株变黑轮...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
田晓莉 杨培珠 何钟佩 李丕明
植物的根、冠之间除了物质（矿质元素、光合产物等）的交流外，还存在着重要的信息通讯，如化学信号、电信号、水信号等。根、冠之间通过这些信号的交流，协调植物的正常生长。本试验选用2个生育特性不同的短季棉品种，研究了根系伤洗液和叶片中内源激素的动态变化，以此探讨了棉花根-冠之间的关系。结果表明，初花期后，伤流液中几种激素的流量均达到峰值，与地上部鲜重的快速增长和幼铃的发育有关；中棉所20号伤流液中iP＋iPA，IAA，ABA的高峰出现时间早于中棉所16号，与其产量器官发育较早相吻合；中棉所16号伤流液中几种生长促进型激素的含量在开花后高于中棉所20号，另外，其叶片中的Z＋ZR，iP＋iPA含量高于后者...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
马春红 李秀丽 董文琦 李运朝 崔四平 贾银锁 王立安
将玉米同核异质体不育细胞质CB37及其正常保持系NB37的离体根冠细胞分为4组,其中3组分别用质量浓度50μg/mL、100μg/mL和150μg/mL的玉米小斑病菌C小种(HMC)毒素诱导,1组用pH6.5PBS诱导作为对照,诱导时间分别为1h、4h和7h。然后采用中性红与伊文思蓝染色、吖啶橙(AO)与溴化乙啶(EB)复染和Hoechst33258染色3种方法检测玉米根冠细胞的凋亡状况。结果表明:HMC毒素诱导玉米根冠细胞发生凋亡,并出现凋亡小体与染色体边集形态特征。中性红与伊文思蓝染色,只能检测出活细胞和死细胞,且在3种毒素浓度、3种处理时间下,CB37的根冠细胞死亡率均高于NB37;采用...
关键词：
玉米小斑病菌C小种 毒素 细胞凋亡 检测
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
董婧 郭昕 杨淑华 THERESA Hickey 程荣杰 张雅楠 陈月蕾 李林 WAYNE Tilley
犬乳腺肿瘤是犬类的一种常见肿瘤性疾病,目前治疗多为手术结合放、化疗法,但结果多易转移复发。双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)是中药提取物,近年来其抗肿瘤作用越来越受到重视。为探求双氢青蒿素是否影响犬乳腺肿瘤细胞的侵袭及其影响机制,本试验取对数增长期状态相同的犬乳腺肿瘤细胞CHMm,使用低(5μM)、中(10μM)、高(20μM)浓度DHA处理并分别培养24,48,72h。收集各组细胞,使用CCK-8法检测细胞活性;利用细胞划痕试验检测细胞迁移性;利用transwell检测细胞侵袭性
关键词：
双氢青蒿素 犬 乳腺肿瘤 侵袭性
[期刊] 华北农学报
[作者]
马春红 郑秋玲 董文琦 李秀丽 张红心 李运朝 商闯 范尉尉 贾银锁
采用根冠细胞测定法,以玉米小斑病菌C小种毒素(HMC-toxin)处理基因型为B37的同核异质体(Homo-caryon)雄不育C细胞质和正常N细胞质玉米的根冠离体细胞后,采用吖啶橙荧光染色,荧光显微镜下发现HMC毒素可引起细胞凋亡,C细胞质中的凋亡细胞,多于N细胞质中的凋亡细胞,在对照中未观察到凋亡现象。还记载了玉米根冠细胞凋亡的具体过程。
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