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[期刊] 中国农业科学
[作者]
朱常香 宋云枝 温孚江
【目的】利用RNA介导抗性培育抗多种植物病毒的转基因烟草。【方法】分别以马铃薯Y病毒(PVY)、烟草花叶病毒(TMV)和黄瓜花叶病毒(CMV)全长衣壳蛋白(CP)基因为模板,通过设计PCR引物和亚克隆获得PVYCP3′端长度100bp、TMVCP3′端长度100bp和CMVCP3′端长度200bp的cDNA片段并拼接成嵌合基因,并以此为模板构建反向重复结构嵌合基因的植物表达载体pRHPTC。将pRHPTC通过冻融法导入农杆菌LBA4404,采用叶盘法转化烟草NC89,然后测定转基因烟草对3种病毒的抗性。【结果】经卡那霉素筛选和PCR检测,共获得276株转基因烟草。Southern和Northe...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
崔红 慕平利 李雪君 刘梦林
为研究fps基因在烟草发状根中的表达对发状根生长及物质代谢的影响,对fps转基因发状根株系k-3离体培养条件下的生长特性及抗菌性进行了研究.在摇瓶悬浮培养过程中,发状根生长呈现"S"型曲线,最初生长缓慢,到第10天开始迅速生长,25 d进入生长平台期;利用气升式内环流生物器,在25℃通气量为2 L/min,接种量为1 g的条件下培养25 d,发状根鲜重达94.7 g/L;以赤星病菌(Alternaria alternata)粗毒素为诱导子对发状根诱导培养,转基因发状根浸提液在黑胫病根刺接种试验中,能够明显提高烟草幼苗对黑胫病的抗性.
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
丁永乐 许自成 杨铁钊 闫新甫 刘学芝 叶红潮 张涵 陈贵岭
对转基因抗虫烟草品系抗虫 931及其原受体品种NC89(对照 )两种烟叶香气基础物质、化学成分和农药残留量进行了测定和分析 ,结果表明 :抗虫 931和NC89品种烟叶中均测出了相同的 2 2种香气物质 ,两者香气物质含量和内在化学成分的差异均未达到显著水平 ,说明在这些品质性状方面二者具有等同的安全性 ;抗虫 931烟叶中农药残留量则较对照低 ,其中六六六的残留量显著低于对照
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
杨丽娜 刘兴娜 卢宝慧 吴庠玉 白庆荣 王雪 高洁
【目的】 将来源于大豆细菌性斑点病菌（Pseudomonas syringae pv.glycinea）Psg12菌株的hrpZPsg12基因导入烟草“云烟87”，对转化植株进行烟草普通花叶病毒（TMV）、烟草马铃薯Y病毒病（PVY）和烟草野火病（Pseudomonas syringae pv.tabaci）的抗病性鉴定，为培育多抗烟草新品系奠定基础。【方法】采用农杆菌介导法，将hrpZPsg12基因转入烟草“云烟87”中，对T0和T1代转基因植株进行PCR检测、Southern杂交，并对T1代转基因植株的抗病性进行评价。【结果】hrpZPsg12基因成功转入“云烟87”中，PCR检测表明共获...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
杨丽娜 刘兴娜 卢宝慧 吴庠玉 白庆荣 王雪 高洁
【目的】将来源于大豆细菌性斑点病菌(Pseudomonas syringae pv.glycinea)Psg12菌株的hrpZPsg12基因导入烟草"云烟87",对转化植株进行烟草普通花叶病毒(TMV)、烟草马铃薯Y病毒(PVY)和烟草野火病菌(Pseudomonas syringae pv.tabaci)的抗病性鉴定,为培育多抗烟草新品系奠定基础。【方法】采用农杆菌介导法,将hrpZPsg12基因转入烟草"云烟87"中,对T0和T1代转基因植株进行PCR检测、Southern杂交,并对T1代转基因植株的抗病性进行评价。【结果】hrpZPsg12基因成功转入"云烟87"中,PCR检测表明共获得...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
杨丽娜 刘兴娜 卢宝慧 吴庠玉 白庆荣 王雪 高洁
【目的】 将来源于大豆细菌性斑点病菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｙｒｉｎｇａｅ Ｐｖ．ｇｌｙｃｉｎｅａ）Ｐｓｇ１２菌株的ｈｒＰＺＰｓｇ１２基因导入烟草“云烟８７”，对转化植株进行烟草普通花叶病毒（Ｔｍｖ）、烟草马铃薯ｙ病毒病（Ｐｖｙ）和烟草野火病（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｙｒｉｎｇａｅ Ｐｖ．Ｔａｂａｃｉ）的抗病性鉴定，为培育多抗烟草新品系奠定基础。【方法】采用农杆菌介导法，将ｈｒＰＺＰｓｇ１２基因转入烟草“云烟８７”中，对Ｔ０和Ｔ１代转基因植株进行Ｐｃｒ检测、ｓｏｕＴｈｅｒｎ杂交，并对Ｔ１代转基因植株的抗病性进行评价。【结果】ｈｒＰＺＰｓｇ１２基因成功转入“云烟８７”中，Ｐｃｒ检测表明共获．．．
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
杨丽娜 刘兴娜 卢宝慧 吴庠玉 白庆荣 王雪 高洁
【目的】将来源于大豆细菌性斑点病菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｙｒｉｎｇａｅ Ｐｖ．ｇｌｙｃｉｎｅａ）Ｐｓｇ１２菌株的ｈｒＰＺＰｓｇ１２基因导入烟草＂云烟８７＂，对转化植株进行烟草普通花叶病毒（Ｔｍｖ）、烟草马铃薯ｙ病毒（Ｐｖｙ）和烟草野火病菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｙｒｉｎｇａｅ Ｐｖ．Ｔａｂａｃｉ）的抗病性鉴定，为培育多抗烟草新品系奠定基础。【方法】采用农杆菌介导法，将ｈｒＰＺＰｓｇ１２基因转入烟草＂云烟８７＂中，对Ｔ０和Ｔ１代转基因植株进行Ｐｃｒ检测、ｓｏｕＴｈｅｒｎ杂交，并对Ｔ１代转基因植株的抗病性进行评价。【结果】ｈｒＰＺＰｓｇ１２基因成功转入＂云烟８７＂中，Ｐｃｒ检测表明共获得．．．
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
李鑫 吴元华 顾晶晶 李立梅
采用病情指数调查、DAS-ELISA和生理生化指标测定的方法,研究了铁元素对烟草抗马铃薯Y病毒脉坏死株系(PVYN)的室内效果及对植株抗病性的诱导作用。结果表明:当烟草叶面喷施铁元素浓度为33.60 mg·L-1时,烟株显症时间要迟于对照,使病毒含量降低至7.31mg·mL-1,仅为对照的45%。单独喷施铁元素和喷施铁元素后再接种PVYN处理,均能提高烟株体内过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和多酚氧化酶(PPO)活性,并且在短时间内使活性氧的生成速率提高1.6倍,叶绿素a的含量提高1.4倍,表明铁元素能诱导烟株防御反应的应答,但对苯丙氨酸解氨酶(PAL)影响不大。此外,铁元素处理后再...
关键词：
烟草 铁 马铃薯Y病毒 诱导抗性
[期刊] 西南农业学报
[作者]
吴纯清 张兴国 梁国鲁 苏承刚
为了分析CBF3和COR15a双价基因的抗寒价值,通过模式植物烟草抗寒性的改良,为其他经济作物的抗寒改良提供理论和实践依据。将低温诱导启动子AtRD29a分别控制的拟南芥CBF3低温应答转录激活因子基因和COR15a冷诱导基因一起转入烟草,通过低温处理实验、生理生化指标测定分析转基因烟草的抗寒性。结果表明:外源基因已经整合到烟草基因组中,转基因植株在1℃48 h未出现萎蔫,而非转基因植株1℃12 h即出现萎蔫状态;转基因植株LT50为-1.01℃左右,非转基因植株LT50为0.86℃,转基因植株的细胞膜伤害率比非转基因植株低20%,半致死温度低约1.87℃;转基因植株的POD活性、可溶性糖含量...
[期刊] 华北农学报
[作者]
毕玉平 单蕾 王兴军 徐平丽 周钟信 米景九
在构建 Ｔ Ｍ Ｖｃｐ 和 Ｃ Ｍ Ｖｃｐ 双价表 达载体和 建立 辣 椒高 效转 化 体系 的基 础 上用 农杆 菌 介导法转化 辣椒栽培 品种农 大４０ 和湘 研一号。 对５２ 个抗 卡那霉 素再生植 株进行点 杂交 鉴定 ，结果 １６株为 Ｔ Ｍ Ｖｃｐ 和 Ｃ Ｍ Ｖｃｐ 阳 性，而 Ｐ Ｃ Ｒ 检测发 现 其中 有 ２ 株 为假 阳性 株。 进一 步 温室 攻毒 试 验 表明有７ 个 阳性转基 因植株 对 Ｔ Ｍ Ｖ 和 Ｃ Ｍ Ｖ 同时表 现为免疫 。
关键词：
双抗 TMV CMV 辣椒 转基因植株
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
韩彦莎 鲁彦君 于瑞 赵瑞 沈昕 陈少良
【目的】克隆胡杨木葡聚糖内转糖苷酶/水解酶基因PeXTH,并研究该基因和植物抗Cd2+性之间的关系。【方法】利用RT-PCR方法从胡杨中克隆一个木葡聚糖内转糖苷酶/水解酶基因PeXTH,将该基因的全长cDNA克隆到植物表达载体pGreen0029上,然后通过农杆菌介导法,将重组表达载体转入烟草,并对转基因烟草的抗Cd2+能力进行初步分析。【结果】PeXTH基因的开放阅读框(ORF)长867bp,含ATG起始密码子和TAG终止密码子,编码由288个氨基酸组成的蛋白;多重氨基酸序列比对结果显示,PeXTH蛋白含有木葡聚糖内转糖苷酶/水解酶(XTHs)的保守催化活性域DEIDFEFLG和N-糖基化位...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
周文丽 唐永红 陈耀锋 成巨龙 王会强 杨梅
【目的】利用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens,GV3101)介导法获得转芪合酶基因烟草,改良烟草对根黑腐病的抗性。【方法】以普通烟草品种"97204"叶片为受体,采用根癌农杆菌介导法,将芪合酶基因导入烟草基因组并进行分子检测,利用灌根法对4株转芪合酶基因烟草植株接种烟草根黑腐病菌,观察烟草地上部分和根部的变化,并测定苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)活性。【结果】通过根癌农杆菌介导、抗性选择和分子检测,获得32株转芪合酶基因烟草。从中选取长势一致的4株转基因烟草用于抗病性鉴定,结果表明,2株在灌根接种后生长正常,另外2株在接种第7天时出现轻微黄化,3株...
[期刊] 华北农学报
[作者]
吴中心 沈金昌 王振坤 杨永斌 王廷晓 周瑞宽
对同时表达黄瓜花叶病毒外壳蛋白(CMV CP)和卫星RNA的转基因烟草NC89新品系(NC89-B)及单一表达CMV CP的转基因NC89新品系(NC89-T),在大田生产条件下进行了品比及示范试验.结果表明,在抗病性方面,转基因NC89明显高于未转基因NC89,其中B品系对CMV的相对防效达80%左右,T品系对CMV的相对防效达20%左右;在农艺性状方面,转基因NC89较对照有较显著改善,产值、产量、上等烟比例均有提高,但种性未变;在原烟品质方面,转基因NC89与对照基本一致.
关键词：
烟草 转基因NC89 抗病性 农艺性状
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
李鑫 吴元华 顾晶晶 赵秀香
通过气相色谱(GC)、高效液相色谱(HPLC)及生理生化指标的测定,研究了铜(Cu)元素诱导感染PVYN的烟株信号物质的积累及对系统抗性的影响。结果表明:喷施Cu元素能延迟烟株显症和叶脉出现褐色坏死时间,降低发病程度,病毒增殖受到抑制,烟株体内的与抗性相关物质如脯氨酸及可溶性糖含量升高,电解质的外渗减少。此外,Cu元素处理能诱导信号物质水杨酸和乙烯的积累,水杨酸含量在接种后15d达到最大量3.93μg·g-1,为接种对照的1.3倍;而乙烯释放量在3～9d内均高于接种对照,在12d时乙烯释放量显著低于接种对照,分析认为前期Cu元素处理后诱导了乙烯释放的增强,进行抗性信号的传递。因此,喷施Cu元素...
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