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[期刊] 渔业科学进展  [作者] 钱焜  温海深  迟美丽  倪蒙  张冬茜  丁玉霞  
对花鲈(Lateolabrax japonicas)成鱼腹腔注射促黄体激素释放激素类似物(LHRH-A3)和人体绒毛膜促性腺激素(HCG),利用放射性免疫激素测定方法(RIA)检测了花鲈血清中类胰岛素生长因子(Insulin-like growth factor 1,IGF-1)在注射后6、12、24、48 h内的变化情况,同时还利用荧光实时定量PCR技术检测了花鲈肝脏中IGF-1和类胰岛素生长因子结合蛋白1(Insulin-like growth factor-binding protein 1,IGFBP-1)mRNA的相对表达量的变化情况。结果表明,注射LHRH-A3的花鲈血清中IGF-...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 陈乃松  周洁  靳利娜  周恒永  马建忠  仇小洁  
运用实时荧光定量PCR技术,研究禁食对体质量为(100±1)g的1龄大口黑鲈(Micropterus salmoides)的生长和肝脏中类胰岛素生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)mRNA表达丰度的影响。在为期6周的实验期间,对照组每天表观饱食投喂2次;禁食组禁食3周后恢复投喂3周。实验期间对照组鱼体质量和体长逐渐增加。6周后,对照组鱼体增重率为10.99%,体长增加率为3.07%。禁食组禁食3周期间,鱼体质量下降了5.08%、体长减少了1.79%。同时肝组织IGF-ⅠmRNA表达水平呈下降趋势,禁食结束时仅为对照组的29.93%。恢复投喂2周后肝组织IGF-ⅠmRNA的表达量仍显著低于对照组(P<0....
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 孟星宇  李婷  李沐  刘宁  田玉华  胡薇  
【目的】克隆梅花鹿(Cervus nippon)胰岛素样生长因子1(Insulin-like growth factor 1,IGF-1)的成熟肽基因,并对其进行原核表达及纯化,以获得具有生物学活性的蛋白,为研究IGF-1在梅花鹿鹿茸生长发育中的调控作用及机理提供参考。【方法】以GenBank中的梅花鹿IGF-1基因序列(登录号:HQ890468)设计1对引物,以构建的梅花鹿pMD-18T-IGF-1重组质粒为模板,克隆IGF-1成熟肽的基因序列,构建重组质粒pMD-IGF-1,将其插入pET-32a表达载体后,构建pET-32a-IGF-1质粒,鉴定后,将pET-32a-IGF-1转入Ros...
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 姚玉园  刘海英  袁缨  丛玉艳  
为研究不同剂量的IGF-1和EGF对辽宁绒山羊毛囊体外生长及毛囊形态的影响,采用显微分离法分离绒山羊初级毛囊,分别测定不同浓度IGF-1(0.1,1,10,100ng.mL-1)、不同浓度EGF(0.2,2,20,100ng.mL-1)和联合添加IGF-1与EGF(分别添加10ng.mL-1和20ng.mL-1)对毛囊形态变化及生长长度的影响。结果表明:IGF-1刺激毛乳头和毛母质细胞分裂增殖;EGF促进毛囊外根鞘细胞分化;联合添加刺激毛球部增大。IGF-1和EGF对毛囊体外生长均具有正向调节作用,作用大小与剂量有关,最适宜浓度IGF-1为10ng.mL-1,EGF为20ng.mL-1,10d...
[期刊] 渔业科学进展  [作者] 周朝伟  胡续雯  雷骆  刘晓庆  任胜杰  杨旻珉  曹高祥  陈国梁  邓星星  李岩  李路宽  
本研究旨在探讨热应激对银鲫(Carassius auratus gibelio)生化指标及肝脏HSP70 mRNA表达的影响,选取平均体重为(72.8±10.1) g的银鲫,分别在热应激前(25℃,对照组)、热应激后(32℃,0 h、2 h、6 h、10 h)和恢复适温后6 h (25℃,恢复组)的条件下,测定机体血浆乳酸(LD)、血浆葡萄糖(Glu)、肝糖原(Gly)、己糖激酶(HK)、丙酮酸激酶(PK)和肝脏HSP70 m RNA表达量变化。研究表明,实验组乳酸含量从热应激开始至恢复期,差异始终不显著(P>0.05);实验组血浆葡萄糖水平在热应激后0 h、2 h、6 h,极显著高于对照组(P0.05);己糖激酶活力在热应激后2 h,显著高于对照组(P>0.05);丙酮酸激酶活力在热应激后6h,极显著高于对照组(P0.05)。本研究为进一步探究银鲫的高温应激作用机制及调控机理提供参考数据,同时,也为银鲫养殖和育种等生产实践提供相应参考依据。
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 王尧尧  李冉  李运生  蒋书东  王勇  时代  岳晓琳  方富贵  李福宝  
为探究侧脑室注射Nesfatin-1对雌性大鼠促性腺激素水平及其mRNA表达的影响,对初情期前雌性大鼠的侧脑室注射Nesfatin-1,采用实时荧光定量PCR法检测促黄体素(Luteinizing hormone,LH)和促卵泡素(Folliclestimulating hormone,FSH)mRNA在垂体中的变化,采用酶联免疫分析法检测血清LH和FSH的浓度。结果表明:在初情期前的雌性大鼠中,Nesfatin-1可促进初情期启动、增加卵巢重量、血清LH水平、垂体LH mRNA和FSH mRNA的表达增加(P<0.05);但Nesfatin-1对FSH水平的影响不突出,注射后15min时增加...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 王尧尧  李冉  李运生  蒋书东  王勇  时代  岳晓琳  方富贵  李福宝  
为探究侧脑室注射NesfatiN-1对雌性大鼠促性腺激素水平及其mRNa表达的影响,对初情期前雌性大鼠的侧脑室注射NesfatiN-1,采用实时荧光定量PCR法检测促黄体素(LuteiNiziNg hoRmoNe,Lh)和促卵泡素(foLLiCLestimuLatiNg hoRmoNe,fsh)mRNa在垂体中的变化,采用酶联免疫分析法检测血清Lh和fsh的浓度。结果表明:在初情期前的雌性大鼠中,NesfatiN-1可促进初情期启动、增加卵巢重量、血清Lh水平、垂体Lh mRNa和fsh mRNa的表达增加(P<0.05);但NesfatiN-1对fsh水平的影响不突出,注射后15miN时增加...
[期刊] 上海水产大学学报  [作者] 曲宪成  杨艳红  刘颖  周正峰  崔严慧  
运用Sybr Green I荧光定量RT-PCR方法和放射免疫方法(RIA)分析了外源性皮质醇(cortisol)对异育银鲫促甲状腺激素β亚基(TSH-β)mRNA表达和血清甲状腺激素水平的影响。实验设计为10周,实验组每两周注射一次0.2 mg/kg体重的cortisol(用57%酒精溶解),对照组注射同剂量的57%酒精。实验期间没有投喂饲料。在本实验条件下,研究结果显示:注射3次外源性cortisol后,异育银鲫TSH-βmRNA表达量与对照组相比略有下降;注射5次后,与对照组相比显著降低(P<0.05)。另一方面,RIA结果显示:注射3次外源性cortisol后,实验组与对照组相比,血清...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 李永洙  CUI Yong-quan  
为探讨热应激对我国地方鸡种与国外培育蛋鸡品种繁殖性能、血液生殖激素及相关基因mRNA表达量的影响,试验选择体况相近的112日龄济宁百日鸡和海兰褐鸡各96只,随机分为适温组((25±0.26)℃)和高温组((38±0.26)℃)2个处理,在人工环境气候舱中饲养,每个处理各设8个重复,每个重复6只,试验持续28d。测定112、119、126和140日龄时的卵巢重量、卵泡总数和血液生殖激素浓度及生殖轴相关基因mRNA相对表达量。结果表明:1)适温条件下海兰褐鸡的卵巢、总卵泡发育好于济宁百日鸡,而热应激第7天济宁百日鸡和海兰褐鸡只出现明显的卵巢发育受阻、总卵泡数量增生缓慢(P<0.05)。2)在整个热...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 杨海明  巨晓军  王志跃  丁家桐  王信喜  陈永华  
【目的】研究光照时间和环境温度对扬州鹅种鹅繁殖系统及相关激素m RNA表达、分泌的影响,探明光照时间和环境温度对种鹅繁殖机能的作用特点。【方法】取接受自然光照且日照时长逐渐缩短的200日龄种鹅作为试验对象,试验初期日照时长约为9.7 h·d-1、气温5℃左右。采用2×3完全随机试验设计,设2个温度处理(0—5℃、25—30℃)和3个光照时间处理(8、12、16 h),其中光照时间处理在正常白昼基础上进行增减,将120只成年母鹅随机分至6个处理组,每个处理组20只,全封闭饲养,自由采食、饮水。试验第30天,从每个处理随机取5只鹅翅静脉采血3 m L,用于测定相关激素指标,同时从每个处理中随机取3...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 张姣姣  王怡  张会琼  孙思  孙燕  王鲜忠  张家骅  
【目的】确定FSH是否能调节支持细胞cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA的表达及可能的机制。【方法】以培养的仔猪睾丸支持细胞为试验材料,通过添加各种信号通路的抑制剂,应用实时荧光定量PCR检测cyclinD1 mRNA和cyclin E1 mRNA的相对表达量。【结果】不同浓度的FSH(0—100 ng.mL-1)均可促进cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA的表达(P
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 廉红霞  卢德勋  高民  
试验选用84头10 kg左右杜洛克×长白×大约克(DLY)三元杂交阉公猪,随机分成2组,组内设6个重复,每个重复7头猪,研究了在NRC(1998)标准(对照组)、荣昌猪(GB 7223-1987)饲养标准(试验组)2种饲粮条件下营养水平对DLY猪生长肥育期背最长肌I MF含量、HSL及FAS mRNA表达量和血液激素含量的影响。结果表明:降低饲粮营养水平可降低35、80及110 kg DLY猪血清胰岛素含量和35及80 kg猪生长激素含量;同时可升高20、50及110 kg DLY猪血清肾上腺素含量和35、50及110 kg DLY猪胰高血糖素含量。各阶段试验组背最长肌肌内脂肪含量均高于对照组...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 孙文强  胡艳  刘宏祥  姬改革  李慧芳  陈宽维  
【目的】以金定鸭为研究对象,孵化前向蛋清内注射三碘甲腺原氨酸(triiodothyronine,T3),检测鸭出雏前后体重、胸浅肌重、血清中甲状腺激素(thyroid hormones,THs)水平的变化,分析肝脏中I型脱碘酶(deiodinases I,D1)和Ⅲ型脱碘酶(deiodinasesⅢ,D3)m RNA表达、蛋白水平及酶活性的变化,探究外源性T3对鸭出雏前后生长发育及肝脏中脱碘酶表达的影响。【方法】将200枚金定鸭种蛋随机分为对照组和试验组,在孵化前从蛋的锐端往试验组种蛋蛋清内注射100μL含250 ng T3的生理盐水,对照组注射不含T3的100μL生理盐水,两组种蛋在相同条件...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 许生友  陈兴勇  姜润深  耿照玉  
研究优质黄羽肉鸡热应激期间肝脏和下丘脑组织中热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)基因mRNA的动态表达规律,为揭示该类型优质鸡种热应激反应机理提供参考。64日龄Anak 40(♂)×岭南黄(♀)杂交后代母鸡置于(38±1)℃恒温室内进行持续热应激处理,采取荧光定量PCR方法分别测定热应激起始(0 h)、热应激后12、24、36、48和60 h肝脏和下丘脑组织中HSP70 mRNA的表达水平。随着热应激时间的延长,肝脏和下丘脑组织中HSP70 mRNA表达水平均显著上升,至热应激36 h时表达水平达高峰值,约为应激起始表达水平的7倍,差异显著(P<0.05);...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 王换换  申正杰  肖航  刘小倩  艾阳  张源淑  
[目的]本试验旨在探讨热应激对泌乳期奶牛肝脏及抗氧化应激信号通路Keap1-Nrf2-ARE基因表达的影响。[方法]6头泌乳期荷斯坦奶牛饲养于南京地区夏季炎热季节,试验从6至8月持续5周,在第1周(平均气温26℃)和最后1周(平均气温32℃)采集颈静脉血液和肝脏组织样品。检测血液中相关生化指标和皮质醇及肝脏组织中MDA等的含量,并检测奶牛肝脏HSP70、Keap1-Nrf2通路及其下游HO1、GCLM、NQO1、GCLC等基因的表达。[结果]与常温时相比,热应激奶牛血液中皮质醇含量和AKP活性极显著升高(
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