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[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 司文宇  宋爽  康铁柱  姚郅璆  叶菁  于童  方富贵  
【目的】研究神经激肽B(NKB)中枢给药对大鼠初情期启动、下丘脑Kisspeptin和促性腺激素释放激素(GnRH)基因及蛋白质的表达水平,以及血清中性腺激素含量的影响,以了解NKB在调节初情期方面的作用。【方法】将初情期前SD雌性大鼠分为NKB组、NKB拮抗剂组和对照组,分别侧脑室注射60 pmol/μL NKB溶液、0.3 nmol/μL NKB拮抗剂和生理盐水,注射剂量为10μL/只,每日观察阴门开启情况,统计阴门开启时间。所有大鼠均在阴门开启时采集血样,分离血清,并采集下丘脑、卵巢、子宫,称卵巢、子宫质量。分别采用免疫荧光共定位和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术,分析下丘脑中GnRH和Kisspeptin蛋白和基因的表达情况,并分别通过酶联免疫吸附法(ELISA)和放射性免疫法(RIA)检测血清中NKB和性腺激素(雌二醇、孕酮)水平。【结果】NKB使大鼠阴门开启时间显著提前(P<0.05),卵巢质量显著降低(P0.05);NKB拮抗剂使阴门开启时间显著推迟(P0.05)。与对照组相比,NKB组SD大鼠下丘脑Kiss1和GnRH mRNA的表达显著提高(P<0.05);GnRH~+细胞数量在室旁核(PVN)和正中隆起(ME)显著增加(P<0.05),而在下丘脑弓状核(ARC)中显著减少(P<0.05),Kisspeptin~+细胞数量在ARC和室周核(PeN)中显著增加(P0.05);血清中E_2和P_4水平均显著增加(P0.05), GnRH~+细胞数量在ARC中显著增加(P<0.05),在室旁核PVN和ME则显著降低(P<0.05),ARC和PeN中Kisspeptin~+细胞的数量显著减少(P<0.05),且血清中E_2和P_4水平均显著降低(P<0.05)。【结论】NKB通过调节下丘脑Kisspeptin和GnRH的表达以及提高血清中E_2和P_4水平来促进大鼠初情期启动。
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 崔培  宋爽  王尧尧  王瑞瑞  王云  蒋书东  方富贵  李福宝  
为研究雌二醇(Estradiol,E2)对大鼠下丘脑神经激肽B(Neurokinin B,NKB)表达的影响,采用免疫组化PV-9003二步法以及DAB显色技术,对外源性E2处理组(E2组)、花生油处理组(C组)、卵巢摘除+E2组(OVX+E2组)和卵巢摘除组(OVX组)大鼠下丘脑的NKB进行检测。结果表明:大鼠阴门开启时间E2组(29.00±0.707)与OVX+E2组(30.20±0.084)早于对照组(43.60±2.074)(P<0.01)。NKB主要分布于所有大鼠下丘脑的弓状核、腹内侧核和室旁核,且OVX组和C组室周核上也有少量表达(P<0.05),但各组间NKB的平均光密度值有差异...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 王尧尧  李冉  李运生  蒋书东  王勇  时代  岳晓琳  方富贵  李福宝  
为探究侧脑室注射Nesfatin-1对雌性大鼠促性腺激素水平及其mRNA表达的影响,对初情期前雌性大鼠的侧脑室注射Nesfatin-1,采用实时荧光定量PCR法检测促黄体素(Luteinizing hormone,LH)和促卵泡素(Folliclestimulating hormone,FSH)mRNA在垂体中的变化,采用酶联免疫分析法检测血清LH和FSH的浓度。结果表明:在初情期前的雌性大鼠中,Nesfatin-1可促进初情期启动、增加卵巢重量、血清LH水平、垂体LH mRNA和FSH mRNA的表达增加(P<0.05);但Nesfatin-1对FSH水平的影响不突出,注射后15min时增加...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 王尧尧  李冉  李运生  蒋书东  王勇  时代  岳晓琳  方富贵  李福宝  
为探究侧脑室注射NesfatiN-1对雌性大鼠促性腺激素水平及其mRNa表达的影响,对初情期前雌性大鼠的侧脑室注射NesfatiN-1,采用实时荧光定量PCR法检测促黄体素(LuteiNiziNg hoRmoNe,Lh)和促卵泡素(foLLiCLestimuLatiNg hoRmoNe,fsh)mRNa在垂体中的变化,采用酶联免疫分析法检测血清Lh和fsh的浓度。结果表明:在初情期前的雌性大鼠中,NesfatiN-1可促进初情期启动、增加卵巢重量、血清Lh水平、垂体Lh mRNa和fsh mRNa的表达增加(P<0.05);但NesfatiN-1对fsh水平的影响不突出,注射后15miN时增加...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 宋爽  崔培  王尧尧  蒋书东  章孝荣  方富贵  李福宝  
【目的】探究初情期启动前、启动中、启动后大鼠下丘脑、垂体和卵巢中神经激肽B(Neurokinin B,NKB)的表达变化。【方法】以SD雌性大鼠为研究对象,分别取大鼠的下丘脑、垂体和卵巢组织制作冰冻切片,运用免疫荧光染色法检测SD大鼠下丘脑、垂体和卵巢上NKB的分布。【结果】NKB主要分布于各时期大鼠下丘脑的弓状核、腹内侧核、室旁核、腺垂体以及卵巢的黄体细胞、间质细胞。但NKB在不同时期表达水平不同,在初情期启动前(出生后25d)和启动后(出生后60d)表达最强,在初情期启动中最弱(P<0.05)。同一时期不同核团之间NKB表达水平也不同,初情期启动前和启动中室旁核最强,弓状核次之,腹内侧核最...
[期刊] 西南农业学报  [作者] 梅山  杨丽  史远刚  淡新刚  
【目的】本文旨在明确kisspeptin对初情期前小鼠生殖内分泌的影响及作用机制。【方法】对初情期前的雌性小鼠体外注射不同浓度的kisspeptin,检测处理后小鼠外周血中FSH和LH浓度、卵巢重量、直径、阴道开张率以及垂体相关基因表达。【结果】3μg kisspeptin不仅能够显著增加小鼠卵巢重量、直径及阴道开张率(P<0.05),而且也能显著增加血中FSH和LH的浓度(P
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 印虹  刘蕾  蒋晓芳  孙冰  张源淑  
选用SD雄性大鼠50只,随机取42只作为糖尿病模型组,另8只为空白对照组。糖尿病模型组大鼠按60 mg·kg-1一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ),空白组大鼠腹腔注射等体积生理盐水。分别于注射STZ后24 h和72 h剪尾取血,血糖仪测定所有大鼠的空腹(禁食8 h)血糖水平。取造模成功大鼠(血糖值≥11.1 mmol·L-1)32只,随机分为阳性对照组(蒸馏水灌胃)、β-酪啡肽7组(β-酪啡肽7灌胃)、水解肽组(酪蛋白水解肽灌胃)和酪蛋白组(酪蛋白溶液灌胃),每12 h灌胃1次。每3 d空腹测血糖1次。连续灌胃15 d后断颈处死,取血浆、肝脏、心脏和腿肌等样品,观察血糖浓度以及其他影响血糖的重...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 蒋书东  张兴旺  朱晖  周伟娟  王登峰  方富贵  
【目的】研究神经激肽B(NKB)在犬生殖轴上的表达规律。【方法】以仔犬期、幼犬期、初情期母犬及成年公犬、母犬为研究对象,颈动脉放血处死后取其下丘脑、垂体、睾丸和卵巢,其中成年公、母犬的样本进行NKB免疫组化试验,观察NKB分布情况并拍照;仔犬期、幼犬期、初情期和成年期母犬样本进行RT-qPCR试验,以GAPDH为内参,测定样本中目的基因Tac3 mRNA的表达量。【结果】NKB主要分布于下丘脑外侧区和视上核、腺垂体、卵巢卵泡颗粒层细胞和卵母细胞及睾丸的间质组织和生精细胞,而神经垂体中未见分布。在母犬下丘脑、垂体和卵巢中,Tac3 mRNA表达量均表现为从仔犬期至初情期逐渐上升,于初情期达最高水平,至成年期又有所下降,且与其他各发育阶段差异显著(P<0.05)。【结论】NKB可能参与母犬初情期的启动。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 刘新颖  安志兴  吴月红  张涌  
 取新生大鼠海马组织进行原代体外分散培养,用MTT比色法检测不同浓度维生素C对神经细胞生长的影响,并观察其形态学变化和分化程度。结果表明,2和20nmol/L维生素C组对神经细胞生长的影响与对照组无显著差别(P>0.05);200nmol/L维生素C组能促进神经细胞的存活,与对照组相比差异显著(P<0.01),进一步观察发现,该处理的细胞突起数目、长度、胞体面积均显著高于对照组(P
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 赵瑾  司丽芳  徐永平  李文献  范光丽  
为了解外源性IFN-γ对植入前期大鼠下丘脑内IL-4表达的影响,通过阴道口肌肉注射不同剂量IFN-γ后观察植入前期大鼠下丘脑内IL-4表达的变化,并且用免疫组织化学SP法对其检测。结果表明:在下丘脑的视前大细胞核(POMA)、视前内侧核(POM)、交叉上核(SO)、视上核(SC)、室旁核内侧部(PVM)和室周核(HPV)等处均有IL-4阳性细胞的表达分布;试验1组(注射IFN-γ25 000 IU)和试验2组(注射IFN-γ75 000 IU)各个核团中阳性细胞数与对照组相比较少而且差异显著(P<0.05),2个试验组相比,在部分核团中阳性细胞数试验1组高于试验2组,差异显著(P<0.05)。...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 陈正礼  罗启慧  范光丽  阿依木古丽  方静  潘康成  袁朝富  
【目的】探讨雌激素对大鼠小脑内雌激素受体(ER)、神经生长因子(NGF)和胆碱乙酰转移酶(ChAT)表达的影响。【方法】运用超敏感的免疫组织化学SP法,以老年SD大鼠小脑为研究对象,通过补充17β-雌二醇对ER、NGF和ChAT在小脑中的表达和分布变化进行研究。【结果】ER、NGF和ChAT免疫阳性反应物分布于小脑的蒲肯野氏细胞层、小脑齿状核、小脑间位核和小脑室顶核,ER阳性产物主要定位于细胞胞浆和突起中,也存在于胞膜和胞核中。老年大鼠小脑皮质及小脑核中ER、NGF和ChAT的表达强度及阳性细胞数量总趋势是显著降低,而补充17β-雌二醇后三种阳性产物的强度和阳性细胞数目显著回升,蒲肯野氏细胞的...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 丁宏标  韩正康  陈杰  
用36只2月龄 Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠研究两种给药制度下 Cimaterol(CIM)对其生长、代谢及内分泌的影响。一种给药制度是日粮中添加 CIM 10mg/kg(Ⅱ组),另一种是含10mg/kg CIM 日粮和基础日粮轮流供给,每2d 变换一次(Ⅲ组)。结果发现间隔2d 添喂组大鼠30d 日增重提高幅度(21.9%)大于连续添喂组(17.2%),肌肉重也较高。同时间隔添喂组大鼠在实验期的0~10d,10~20d,20~30d 和0~30d日增重均显著高于对照组(Ⅰ组),未出现适应现象。而连续添喂组在实验中有明显适应现象。表明间隔给药可以延缓 CIM 的适应现象。两种给...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 孙耀贵  程佳  李宏全  王俊东  
【目的】"仔猪早期断奶应激综合征"给养猪业带来了巨大的经济损失。中药制剂柴术抗激散(CZKJS)通过现代制药技术制成柴术抗激颗粒(CZKJKL),已被证实其对早期断奶仔猪应激及早期断奶仔猪脂多糖(LPS)免疫应激都具有明显的缓减作用。现进一步探究CZKJKL对LPS免疫应激断奶大鼠应激相关神经递质、细胞因子和HPA轴相关激素的影响,从机理上证实其抗应激作用。【方法】选取体重相近的18日龄断奶的Wistar大鼠72只,随机分为3个处理组,即Ⅰ组(空白对照组)、Ⅱ组(LPS免疫应激模型组)、Ⅲ组(LPS+CZKJKL组)。每个处理设6个重复,每个重复4只。在18—24日龄期间,Ⅲ组的大鼠每天灌服5...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 王璐  刘红改  于得水  李晶  刘慧  赵慧英  
【目的】探讨G蛋白耦联雌激素受体(G-protein-coupled estroGen receptor,Gper)激动剂对卵巢表皮生长因子受体(epidermal Growth factor receptor,eGfr)表达的影响,为阐明Gper和eGfr在卵巢功能维持中的作用奠定基础。【方法】取间情期小鼠,将其分为40,200,1 000nG/只G-1腹腔注射组和对照组(腹腔注射等体积生理盐水),每组20只,各组小鼠进行相应的处理。注射G-1后,依次取发情前期、发情期、发情后期和间情期小鼠各5只,脱颈处死,迅速取出卵巢,采用免疫组织化学sp法和实时定量rt-pcr法,研究不同剂量Gper激...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 田光明  范光丽  田海霞  阿依木古丽  张永德  张燕  何玉龙  聂聪  王冠魁  李定强  
利用免疫组化SP法,检测了去势及去势后补充雄激素大鼠嗅球中雄激素受体(A ndrogen recep-tors,AR)和神经生长因子(N erve grow th factor,NGF)蛋白的表达情况,探讨了雄激素对嗅球的作用机制。结果表明,睾丸摘除组大鼠嗅球内AR与NGF蛋白的表达显著减少;睾丸摘除并用睾酮替代组大鼠嗅球内2种蛋白的表达接近正常水平。说明去睾丸大鼠由于缺乏内源性雄激素,会引起嗅球内AR和NGF蛋白表达减少,而补充外源性雄激素可缓解或抑制这一变化。
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