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[期刊] 海洋水产研究
[作者]
王海英 孙谧 王颖
以壳聚糖为固定化载体,采用吸附交联法,以戊二醛为交联剂,对海洋低温碱性蛋白酶YS-80-122进行固定化。通过单因素和正交试验优化得到最佳固定化条件为pH7·0,戊二醛终浓度0·2%,吸附时间50min,酶载体比例40mg/g,交联时间16h,交联温度10℃,固定化酶酶活回收可达47·52%。固定化酶和游离酶的最适作用温度均为30℃,最适作用pH分别为9·0和10·0,相比游离酶,固定化酶可在更宽的温度和pH范围内发挥高活性,且其温度和pH稳定性得到显著提高。室温下经冷冻干燥的固定化酶贮存90d后活性基本保持不变,贮藏半衰期约为190d。以酪蛋白为底物,重复使用7次后酶活仍保留有79·2%,操...
关键词:
海洋低温碱性蛋白酶 固定化 壳聚糖
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
张权 盛军 刘均忠 郑鸿飞 孙谧
采用壳聚糖为载体,优化了海洋微生物YS2071脂肪酶的壳聚糖固定化条件。结果显示,在壳聚糖浓度为2%(m/v)、氢氧化钠浓度为12%(m/v)、乙酸浓度为1%(v/v)、戊二醛浓度为0.25%(v/v)、与戊二醛交联的时间为12 h及添加2 ml(1120 U)的游离脂肪酶时,固定化脂肪酶的活力最高,其活力回收率达到69.4%。对游离脂肪酶与固定化脂肪酶的酶学性质进行比较,结果显示,游离脂肪酶的最适反应温度为40℃,而固定化脂肪酶的最适反应温度为45℃,固定化脂肪酶的温度稳定性明显优于游离脂肪酶。最适反应p H均为8.0,脂肪酶经过固定化之后,酸碱耐受性增大。重复利用10次的固定化脂肪酶的酶活...
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
张权 盛军 刘均忠 郑鸿飞 孙谧
采用壳聚糖为载体,优化了海洋微生物YS2071脂肪酶的壳聚糖固定化条件。结果显示,在壳聚糖浓度为2%(m/v)、氢氧化钠浓度为12%(m/v)、乙酸浓度为1%(v/v)、戊二醛浓度为0.25%(v/v)、与戊二醛交联的时间为12 h及添加2 ml(1120 U)的游离脂肪酶时,固定化脂肪酶的活力最高,其活力回收率达到69.4%。对游离脂肪酶与固定化脂肪酶的酶学性质进行比较,结果显示,游离脂肪酶的最适反应温度为40℃,而固定化脂肪酶的最适反应温度为45℃,固定化脂肪酶的温度稳定性明显优于游离脂肪酶。最适反应p h均为8.0,脂肪酶经过固定化之后,酸碱耐受性增大。重复利用10次的固定化脂肪酶的酶活...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
王斌 谢苗 曾竞华 邓海燕 甘纯玑
利用反相悬浮交联法制备磁性壳聚糖微球(magneticchitosanmicrospheres,M-CS),并对褐藻酸酶进行固定化研究。结果表明,M-CS呈规则的圆球形,具有较好的磁响应性,可稳定地保存在弱酸和弱碱中。其弱碱交换量随着戊二醛用量的增加而减少,悬挂醛基则相应地增加。M-CS对褐藻酸酶的吸附动力学实验表明,M-CS容易吸附褐藻酸酶,但吸附的酶量受载体与酶的比例、溶液的离子浓度、戊二醛的用量、溶液pH的影响明显,而温度对吸附的酶量的影响则相对较弱。酶学性质研究表明,相对于游离的褐藻酸酶,固定化酶的最适温度略有升高,可明显改善其热稳定性和酸碱稳定性,与底物的亲和力也有所增强。
[期刊] 中国水产科学
[作者]
王海英 林洪 叶眉 薛长湖
木瓜蛋白酶经戊二醛固定于自制的甲壳质上制成固定化木瓜蛋白酶 ,其水解甲壳胺的最佳条件是 :4 5℃ ,pH 4 .0的 1%的甲壳胺溶液 (醋酸缓冲液配置 ) ,酶 /底物比 1∶3.5 (质量比 )。震荡反应 2 4h后 ,用超滤器分离不同分子量的甲壳胺低聚糖产物 ,结果产物中分子量小于 10 0 0 0的甲壳胺低聚糖得率约为 4 5 .5 5 % ,分子量小于 5 0 0 0的约为 34 .0 % ,优于游离木瓜蛋白酶水解甲壳胺的效果。此固定化酶可反复使用至少 10次以上 ,总反应时间达 192h ,提高了酶的使用效率和酶解效果。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
张富新 张媛媛 党亚丽 于月英
探讨了中性蛋白酶在海藻酸钠中的固定化技术,并对影响固定化酶的固定化率和固定化酶活性的 因素进行了研究。结果表明,固定化酶的质量受海藻酸钠浓度、固定化酶量、固定化时间以及CaCl2浓度的影响,其 最佳工艺条件为:海藻酸钠浓度3.0%,固定化酶液量与海藻酸钠体积比1:2,固定化时间2.5 h,CaCl2浓度 3.0%,由此制得的固定化酶的固定化率可达97.5%,固定化酶活性为3 600 U/g,其热稳定性、pH值稳定性均极显 著高于游离酶。
关键词:
海藻酸钠 固定化 中性蛋白酶
[期刊] 中国水产科学
[作者]
张琇 孙谧 王清印 李国保
以海洋低温蛋白酶生产菌株YS-9412-130为研究对象,从传代、菌龄、溶菌酶浓度与酶解时间、甘氨酸与EDTA预处理以及稳定剂对该菌原生质体形成与再生的影响进行研究。结果表明,在相同条件下,第一代菌至第五代菌原生质体的形成率分别为86.9%、70.3%、66.8%、63.4%、60.2%,再生率分别为10.5%、18.6%、17.9%、18.2%、17.8%;取该菌对数生长前期、对数生长中后期、稳定期部分菌液制备原生质体,原生质体的形成率分别为72.1%、70.4%、60.5%,再生率为13.4%、18.9%、10.4%;溶菌酶浓度为2.5 mg/mL5、mg/mL1、0 mg/mL、20 m...
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
林白雪 黄志强 谢联辉
对氧化短杆菌15E菌株(Brevibacterium oxydans)所产的碱性蛋白酶酶学性质研究表明,15E菌株所分泌的碱性蛋白酶分子质量为49.0 ku、等电点为9.3.该酶的最适作用温度为60℃,最适pH值为7.0-9.0;Ca2+、Mg2+、K+对酶有激活作用.酶对一些变性剂如SDS、尿素、盐酸胍具有一定的耐受性;PMSF和AEBSF能抑制该蛋白酶,表明该酶属于丝氨酸蛋白酶;EDTA对该蛋白酶有抑制作用,说明该蛋白可能含有金属离子.
关键词:
海洋细菌 碱性蛋白酶 酶学性质
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
路炳声 黄志强 林白雪 谢联辉
对氧化短杆菌15E菌株(Brevibacterium oxydans)产碱性蛋白酶的发酵条件进行研究,结果表明,培养基初始pH值9.0、培养温度28℃、摇床转速200.rmin-1条件下培养40 h,菌体生长最适且总酶活力达到最大;菌株在添加5 g.L-1牛肉膏、1 g.L-1葡萄糖的酪蛋白培养基中生长和产酶均达到最佳;人工海水中的K+、Ca2+和Mg2+浓度较为适合15E菌株生长和产酶,其中K+对菌株产酶起关键作用.
关键词:
海洋细菌 碱性蛋白酶 发酵条件
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
何平 黄家乐 史清翠 巫光宏 初志战 黄卓烈
【目的】探寻疏水参数(logP)不同的有机溶剂对木瓜蛋白酶及其固定化酶活性的影响。【方法】制备固定化木瓜蛋白酶,在疏水参数不同(logP=-1.30,-1.10,-0.76,-0.33,-0.24,0.28,0.49,0.68,0.80,1.31,1.80,2.0,2.5,3.5和5.0)的15种有机溶剂及其不同体积分数(φ=5%,10%,15%,20%,25%,30%,35%,40%,50%,60%和70%)的溶液中,测定木瓜蛋白酶及其固定化酶的活性,以不含相应有机溶剂的0.1 mol/L pH 7.2磷酸缓冲液或Tris-盐酸缓冲液为对照,分析不同有机溶剂及其体积分数对酶活性的影响。【结果...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
李科 卢向阳 彭丽莎 刘强
为探明羧甲基壳聚糖对水稻氮代谢的调控效果 ,以湘晚籼 6号和湘晚籼 9号为材料 ,用 0 .2 %的羧甲基壳聚糖水溶液喷施水稻始穗期叶片 .结果表明 ,羧甲基壳聚糖对水稻氮代谢具有一定的调控作用 ,能够明显提高齐穗期叶片内硝酸还原酶、谷氨酰胺转化酶、谷氨酰胺合成酶、蛋白水解酶的活性 ,其中 ,对谷氨酰胺转化酶和蛋白水解酶活性的增强作用可持续到乳熟后期 ,并能增加叶片可溶性蛋白质含量和籽粒内全氮、蛋白氮的含量 .
关键词:
水稻 羧甲基壳聚糖 氮代谢 关键酶
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
谢桂先 荣湘民 刘强 彭建伟 朱红梅
为研制开发提高玉米籽粒蛋白质含量的新型植物生长调节剂,采用田间小区试验,研究了羧甲基壳聚糖对玉米氮代谢关键酶的调控效果.结果表明,羧甲基壳聚糖对玉米氮代谢具有一定的调控作用,可显著提高玉米功能叶硝酸还原酶、谷氨酰胺合成酶、谷氨酰胺转化酶、蛋白水解酶和玉米籽粒的谷氨酰胺合成酶活性,降低玉米籽粒的蛋白水解酶活性,并能明显增加玉米籽粒的全氮、蛋白氮含量.
关键词:
玉米 羧甲基壳聚糖 氮代谢 关键酶
[期刊] 上海水产大学学报
[作者]
王平平 周培根 王艳 周颖 刘文杰
壳聚糖是由氨基葡萄糖通过β-1,4键连接而成的天然线形高聚物,其在工业、农业尤其是医药、食品等领域都具有重要的应用价值。但由于壳聚糖相对分子质量大,水溶性差,其在人体内不易吸收,使其应用受到限制。而甲壳低聚糖(chitooligosaccharides)不仅水溶性好,易吸收,而且具有抗菌、抗癌以及促进双歧杆菌增殖、增强机体免疫等功能。目前制取方法常用盐酸水解壳聚糖来制备,但该法反应条
关键词:
壳聚糖酶 纯化 特性
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
杜志龙 高振江 吴薇 凌刚
采用清洗 +壳聚糖涂膜及不清洗 +壳聚糖涂膜的处理方法进行了鸭蛋保鲜对比试验 ,溶液壳聚糖质量浓度 ρ(壳聚糖 )分别为 5 ,10和 2 0 g/L。 2 5℃ ,相对湿度 2 0 %~ 2 5 %条件下贮藏 2 7d ,结果表明 :鸭蛋失重率与贮藏时间成线性关系 ,ρ(壳聚糖 )较高时鸭蛋失重率较低 ,且蛋黄指数较高。不清洗 + ρ(壳聚糖 ) 2 0g/L涂膜处理效果最佳 ,失重率比对照组低 3 0 % ,蛋黄指数 0 36 8,较对照高 0 0 17;清洗 +涂膜处理各组均有鸭蛋变质。壳聚糖涂膜具有一定保鲜作用 ,但 ρ(壳聚糖 ) 5~ 2 0 g/L时 ,抑菌效果不佳 ,建议保...
关键词:
壳聚糖 鸭蛋 保鲜 蛋壳处理
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
刘新育 崔世修 刘艳芳 贾新成 陈红歌
【目的】从成熟的小麦籽粒中纯化小麦木聚糖酶抑制蛋白,并研究其对木聚糖酶的抑制作用,从而探明小麦中木聚糖酶抑制蛋白对外加木聚糖酶的影响。【方法】采用硫酸铵盐析、Macro-prep cM阳离子交换层析、Macro-prep Deae阴离子交换层析以及Macro-prep 25S阳离子交换层析等方法,从小偃22小麦中分离纯化木聚糖酶抑制蛋白,通过SDS-paGe电泳检测木聚糖酶抑制蛋白的纯度和分子质量,并进一步研究了不同温度和反应时间对木聚糖酶抑制蛋白抑制活力的影响。【结果】小麦木聚糖酶抑制蛋白分子质量约为29ku,N端氨基酸序列为SVSSVVS,经NcBI BLaST比对,该抑制蛋白N端序列与其...
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