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[期刊] 水产学报  [作者] 刘青  魏华  张高峰  吴楠  
研究了环境激素壬基酚(4-NP)在雌鲫体内的对雌激素受体的表达和雌二醇水平的影响。雌鲫腹腔注射1、50、100 mg.kg-1的4-NP或1 mg.kg-1的E2,分别在24 h和48 h提取肝脏RNA用RT-PCR查看α型雌激素受体(ER-α)和CYP1A的表达情况和提取血清用荧光免疫法测定E2浓度。结果表明:1 mg.kg-1E2处理组的ER表达在24 h和48 h有显著性增加(P<0.05),但...
[期刊] 上海水产大学学报  [作者] 李惠云  刘鹏威  魏华  
运用定量PCR技术和免疫荧光法研究了内分泌干扰物双酚A(BPA)对雌鲫的雌激素效应。以不同浓度的BPA[质量分数分别为1 mg/kg,50 mg/kg,100 mg/kg(注射剂量/鱼体重)]对雌鲫进行腹腔注射,然后分别于24 h和48 h检测肝脏中的α型雌激素受体(ERα)mRNA表达以及血清雌二醇(E2)水平。结果表明1 mg/kg和50 mg/kg BPA处理组ERαmRNA水平与对照组相比在48 h内均没有明显变化;100 mg/kg BPA处理组ERαmRNA水平在注射后24 h显著上调(P
[期刊] 上海水产大学学报  [作者] 刘青  魏华  
研究两种温度下(6℃和17℃)壬基酚(4-NP)对雌鲫血清雌二醇(E2)水平的影响。对雌鲫(卵巢处于第Ⅲ期)腹腔注射100 mg/kg体重的4-NP,分别在24 h和48 h提取血清,采用荧光免疫法测定E2浓度。结果显示,在6℃和17℃条件下,4-NP均能使E2水平下降。在6℃条件下,4-NP处理组E2浓度在24 h与对照组比较有显著性下降(P<0.01)。在17℃条件下,对照组E2浓度与6℃条件下的对照组相比有极显著增加(P
[期刊] 水产学报  [作者] 杨丽丽  张晶  方展强  
以唐鱼卵黄蛋白原(Vtg)为检测指标,利用Native-PAGE电泳、唐鱼Vtg特异性脂蛋白染色和间接酶联免疫吸附(ELISA)技术分别检测了17β-雌二醇(E2)、壬基酚(NP)、多氯联苯(PCBs)、Cd2+、Zn2+及其混合物对唐鱼的雌激素效应。Native-PAGE结果显示,10μg/L、50μg/L E2水体暴露7、14 d均诱导雄性唐鱼体内合成了Vtg,E2对唐鱼的雌激素效应具有时间累积效应,并随浓度升高而增强。而ELISA检测结果则显示0.1、0.5、1.0μg/L E2 7、14 d和200、300μg/L NP 14 d暴露使唐鱼合成了Vtg。结果表明,NP、Cd2+、Zn2...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 左敬  甘瑞  张国升  张姣姣  朱峰伟  孙燕  王鲜忠  张家骅  
【目的】确定雌激素是否通过雌激素受体以及在cAMP-细胞外调节的蛋白激酶(ERK1/2)调节培养条件下,未成熟仔猪睾丸支持细胞中cyclinA2 mRNA的表达。【方法】以培养的仔猪睾丸支持细胞为试验材料,通过添加雌激素受体抑制剂以及各种信号通路的抑制剂,应用实时荧光定量PCR检测cyclinA2 mRNA的相对表达量。【结果】17beta-雌二醇(10-9 mol.L-1)以时间依赖的方式促进了cyclinA2 mRNA的表达(P
[期刊] 草业科学  [作者] 刘佳美  路婷婷  姚婷  要荣宇  李发弟  乐祥鹏  李万宏  
为深入了解不同阴囊围度的湖羊公羔类固醇激素生成和曲细精管生精环境差异,本研究选择137只165日龄湖羊公羔作为试验对象,根据阴囊围度大小分成小围度组[S组,(18.53±0.42) cm]和大围度组[L组,(27.29±1.13)cm],每组9只,共18只。结果表明:1) L组的睾丸重量、睾丸体积、睾丸系数、附睾重量、曲细精管直径、附睾尾部精子数量均极显著高于S组(P
[期刊] 海洋渔业  [作者] 张纪亮  王占彬  孙平  熊建利  朱文文  
尽管三苯基锡(triphenyltin,TPT)能够影响鱼类生殖功能以及性腺的发育,但其作用机制并不十分清楚。由于鱼脑在生殖调控中具有重要作用,本研究以海洋鱼类褐菖鲉(Sebastiscus marmoratus)为研究对象,研究TPT对脑中芳香化酶(Cyp19b)、雌激素受体(ERα和ERβ)、视黄酸X受体α(RXRα)和过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)基因表达的影响。暴露48 d后,TPT对雌性和雄性褐菖鲉脑中Cyp19b和PPARγ的表达均未产生显著性影响。TPT诱导了雄性褐菖鲉脑中ERα的表达并抑制了ERβ的表达;尽管TPT也抑制雌性褐菖鲉脑中ERβ的表达,但对ERα的表达却未...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 杨桂香  彭险峰  曾振灵  陈杖榴  
根据雌激素类化合物在机体内的作用机理,以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因为报告基因构建了4个启动子不同的表达载体(pERE-SV-EGFP,pERE-TA-EGFP,pERE-CMV-EGFP,pERE-TK-EGFP)。以这些表达载体瞬时转染MCF-7细胞,报告基因的基础表达与启动子的强度相关。以17β-雌二醇(E2,10-9mol·L-1)诱导表达载体瞬时转染的MCF-7细胞,发现在表达载体pERE-TA-EGFP、pERE-TK-EGFP、pERE-SV-EGFP转染的MCF-7细胞中,E2能诱导2倍以上的报告基因的表达。这表明在这些瞬时表达系统中报告基因的表达是雌激素依赖性的,因此这...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 崔培  宋爽  王尧尧  王瑞瑞  王云  蒋书东  方富贵  李福宝  
为研究雌二醇(Estradiol,E2)对大鼠下丘脑神经激肽B(Neurokinin B,NKB)表达的影响,采用免疫组化PV-9003二步法以及DAB显色技术,对外源性E2处理组(E2组)、花生油处理组(C组)、卵巢摘除+E2组(OVX+E2组)和卵巢摘除组(OVX组)大鼠下丘脑的NKB进行检测。结果表明:大鼠阴门开启时间E2组(29.00±0.707)与OVX+E2组(30.20±0.084)早于对照组(43.60±2.074)(P<0.01)。NKB主要分布于所有大鼠下丘脑的弓状核、腹内侧核和室旁核,且OVX组和C组室周核上也有少量表达(P<0.05),但各组间NKB的平均光密度值有差异...
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 上官宵兆  刘美玲  毛颖睿  王晓强  王雅昱  汪桂玲  李家乐  
本实验通过RACE技术、实时荧光定量(qRT-PCR)技术,原位杂交和17β-雌二醇注射来探究17β-HSD11基因在三角帆蚌性腺发育和性激素合成中的表达特性和作用。结果显示17β-HSD11基因的cDNA全长为1134 bp, 其中5' UTR 40 bp,开放阅读框(ORF)923 bp,3' UTR 171 bp,编码307个氨基酸。17β-HSD11基因在肝胰腺、性腺中表达量较高,且卵巢极显著高于精巢(P < 0.01)。原位杂交结果显示雌性三角帆蚌卵母细胞、滤泡膜和卵膜上均存在杂交信号。注射不同浓度17β-雌二醇之后发现17β-HSD11基因在雌雄性腺中的相对表达量均被抑制,其中低浓度注射后,17β-HSD11基因的表达量在卵巢中下降33.38%,在精巢中下降37.74%。而高浓度注射后,17β-HSD11基因的表达量在卵巢中下降57.78%,在精巢中下降61.31%。由此推测17β-HSD11可能与三角帆蚌性腺发育和雌激素合成相关。
[期刊] 水产学报  [作者] 陶贤继  魏华  
采用活体注射和卵巢体外培养添加多氯联苯(PCB1254)两种方式研究了PCB1254对异育银鲫血清中和离体卵巢分泌睾酮及雌二醇的影响。注射PCB1254后,血清中睾酮浓度随作用时间延长而降低,随PCB1254浓度的增加而减小;血清中雌二醇随作用时间延长而增加,随PCB1254浓度增加而增加。体外培养时卵巢时,培养液中雌二醇含量随培养时间延长而增加,随PCB1254浓度增加而增加。结果表明PCB1254促进雌二醇分泌,抑制睾酮分泌。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 张国升  左敬  甘瑞  朱峰伟  孙燕  王鲜忠  张家骅  
【目的】确定FSH和雌激素联合作用是否可通过ERK1/2级联调节培养条件下未成熟仔猪睾丸支持细胞中Skp2的表达。【方法】以培养的仔猪睾丸支持细胞为试验材料,通过添加各种信号通路的抑制剂,应用Western blotting和实时荧光定量PCR检测Skp2蛋白、mRNA的表达。【结果】FSH(50 ng.mL-1)和17β-雌二醇(10-9 mol.L-1)联合作用时以时间依赖的方式促进了Skp2蛋白和mRNA的表达(P
[期刊] 中国水产科学  [作者] 翁幼竹  张为民  方永强  刘丽丽  
用免疫细胞化学双重染色技术和鼠抗人芳香化酶抗体、兔抗人雌激素α受体与β受体亚型(ER α和ER β)抗体、兔抗人雌激素(E2)抗体,对鲻鱼(Mugilcephalus)脑各部位进行定位研究。结果显示,芳香化酶和E2、芳香化酶和ER α、芳香化酶和ER β、ER α和E2的双染免疫活性物质分布在鲻鱼嗅脑、大脑、间脑和小脑的神经细胞的胞核或胞质及其突起或神经纤维上。值得指出的是,鲻鱼下丘脑视前区芳香化酶免疫活性细胞上共存有雌激素α受体与β受体亚型,提示E2诱发鲻鱼雌性化的作用机制是,E2先与芳香化酶样神经细胞上的雌激素受体结合,而后激发与性分化相关的芳香化酶基因的表达。
[期刊] 水产学报  [作者] 魏薇  魏华  刘青  
The precociousness of Chinese mitten-handed crab(Eriocheir sinensis) is correlative with the level of estradiol in the hemolymph and gonad.In female,the hemolymph estradiol level of immature crab was(118.75?11.25) pg?mL~(-1),which was much lower than those of precocious and mature crab((291.84?33.71...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 王根林  陈杰  N.Parvizi  
用不同浓度的大豆黄酮(Da,处理Ⅰ394nmol/L,处理Ⅱ7874nmol/L)和雌二醇(E2,处理Ⅲ100pmol/L,处理Ⅳ200pmol/L)体外灌流公猪垂体前叶组织,观察其对促黄体素(LH)分泌的影响。灌流24和48h后,Da和E2灌流组与对照组(处理Ⅴ)相比,垂体LH体外分泌水平都无明显差异。但在促性腺激素释放激素(GnRH)诱导下,各组LH分泌水平显著增加,诱导后20~30min出现分泌峰。GnRH诱导后1h,LH平均水平处理Ⅲ显著高于其他组(P<0.05或P<0.01);诱导后2h,处理Ⅱ和Ⅲ显著高于对照组(P<0.01),处理Ⅲ亦高于处理Ⅰ(P=0.05);诱导后3h,各组L...
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