- 年份
- 2024(117)
- 2023(156)
- 2022(141)
- 2021(129)
- 2020(131)
- 2019(333)
- 2018(374)
- 2017(673)
- 2016(431)
- 2015(532)
- 2014(524)
- 2013(542)
- 2012(552)
- 2011(512)
- 2010(494)
- 2009(496)
- 2008(469)
- 2007(423)
- 2006(337)
- 2005(262)
- 学科
- 济(2372)
- 经济(2371)
- 方法(1617)
- 数学(1490)
- 数学方法(1488)
- 业(1024)
- 管理(984)
- 企(846)
- 企业(846)
- 学(713)
- 地方(514)
- 中国(469)
- 财(433)
- 贸(416)
- 贸易(416)
- 易(394)
- 农(387)
- 地方经济(380)
- 水产(291)
- 业经(272)
- 关系(270)
- 农业(256)
- 动物(253)
- 融(248)
- 金融(248)
- 环境(246)
- 理论(242)
- 和(239)
- 银(229)
- 制(228)
- 机构
- 大学(7062)
- 学院(6872)
- 研究(2525)
- 济(2398)
- 农(2395)
- 经济(2353)
- 科学(2226)
- 管理(2023)
- 农业(2006)
- 理学(1856)
- 理学院(1807)
- 业大(1782)
- 管理学(1755)
- 管理学院(1746)
- 中国(1663)
- 所(1599)
- 研究所(1506)
- 农业大学(1375)
- 京(1337)
- 室(1271)
- 实验(1218)
- 实验室(1186)
- 重点(1130)
- 业(1057)
- 江(1018)
- 财(1016)
- 省(963)
- 技术(962)
- 中心(951)
- 科学院(912)
共检索到9122条记录
发布时间倒序
- 发布时间倒序
- 相关度优先
文献计量分析
- 结果分析(前20)
- 结果分析(前50)
- 结果分析(前100)
- 结果分析(前200)
- 结果分析(前500)
[期刊] 中国农业科学
[作者]
郑武 陈继圣 郑士琴 刘文德 陈晓 周洁 鲁国东 王宗华
【目的】Rho GTP酶是Ras超家族小G蛋白最主要成员。不同生物均含多种Rho GTP酶,相互之间存在密切关系,并共同参与调控多个信号转导途径。稻瘟菌基因组中存在7个Rho GTP酶,分析它们相互关系意义甚大。【方法】通过RT-PCR分析了MgCdc42不同状态下以及MgRho3插入失活状态下其它Rho GTP酶基因的表达变化。【结果】结果表明MgCdc42可能处于MgRho1、MgRho2和MgRhoX上游,对这些蛋白起正调控作用,对MgRac1和MgRho4起着负调控作用;MgRho3对MgRho1和MgCdc42的表达起正调控,对MgRac1和MgRho4的表达则起负调控作用;MgRh...
关键词：
稻瘟菌 RhoGTP酶 调控机制
[期刊] 中国水产科学
[作者]
付国良 黄玛娇 谢金珠 胡燕红 晏燕花 黄镇 黄晓红
对刺激隐核虫（ＣｒｙｐｔｏＣａｒｙｏｎ ｉｒｒｉｔａｎｓ）的小Ｇｔｐ酶ｒａｎ基因（Ｃｉ ｒａｎ）进行研究，以期为刺激隐核虫病原生物学研究及其防治提供理论基础。从刺激隐核虫滋养体／包囊前期ＣＤｎａ文库中筛选出Ｃｉ ｒａｎ基因的克隆，利用生物信息学方法对Ｃｉｒａｎ基因及其编码的蛋白进行结构与功能的预测；通过逆转录ｐＣｒ检测Ｃｉｒａｎ的ｍｒｎａ。结果表明其在刺激隐核虫的各个发育阶段均有表达。对Ｃｉｒａｎ基因开放阅读框内的非通用密码子进行改造，并构建重组质粒ｐ ＧＥＸ－４ｔ－１／Ｃｉｒａｎ，将其转化到大肠杆菌（Ｅ．Ｃｏｌｉ）后成功表达分子量为５１．３ ｋＤ的重组融合蛋白ｒＣｉｒａｎ。用ｒＣｉｒａｎ蛋白．．．
[期刊] 华北农学报
[作者]
张云欢 郑文博 赵美 王陈骄子 周而勋 舒灿伟
通过生物信息学方法及表达分析对水稻纹枯病菌谷胱甘肽S转移酶基因(Rsgst)的功能进行探索。通过水稻纹枯病菌RSIADB基因组数据库查找Rsgst序列,确定该基因在水稻纹枯病菌基因组中的精确位置。利用生物信息学软件预测Rsgst编码蛋白氨基酸序列的基本信息,并使用MEGA 5.0软件构建同源蛋白的系统发育树,最后用qRT-PCR检测Rsgst在菌核发育过程中的基因表达量,同时测定GST的酶活性。结果表明,Rsgst全长1 207 bp,该基因共编码277个氨基酸残基,其编码蛋白分子量为30.90 ku,理
[期刊] 中国农业科学
[作者]
于洁 王登杰 雷仲仁 王海鸿
【目的】鉴定烟粉虱（Ｂｅｍｉｓｉａ ｔａＢａｃｉ）体内的溶菌酶基因，并对其序列特征、进化关系和表达模式进行分析，探索该基因在烟粉虱应对球孢白僵菌侵染过程中的作用，为进一步解析烟粉虱先天免疫过程提供理论依据。【方法】以第２代高通量测序的结果为依据，比对非冗余核苷酸数据库，筛选ｅ值
[期刊] 华北农学报
[作者]
赵丽华 豆献英 赵志光 蔡伟明
克隆并分析了水稻中两个可能的硝酸还原酶基因在多种非生物胁迫和重力刺激下的表达变化。AK102363(OsNR1)和AK102178(OsNR2)是水稻中两个可能的硝酸还原酶基因。在盐胁迫处理下,两基因均下调表达。OsNR1在100 mmol/L NaCl处理24 h时表达下调最显著,而OsNR2也是在100 mmol/L NaCl处理24 h时表达下调最显著。用15%PEG模拟干旱处理,两基因表达下调,24 h时差异最显著。低温处理24 h后,基因OsNR1同样下调表达。不同浓度的NO供体SNP处理,两基因均受诱导而上调表达,在0.1 mmol/L的SNP处理12 h时表达量最高。向重性刺激处...
关键词：
一氧化氮 胁迫 重力 基因相对表达量
[期刊] 中国农业科学
[作者]
张小蒙 肖宁 张洪熙 冯彦侠 刘知晓 高勇 戴正元 陈建民
【目的】分析水稻强、弱优势组合的基因差异表达模式特征,探讨其与杂种优势之间的关系。【方法】以扬稻6号、明恢63、特青配置的9个杂种F1为材料,利用差异显示PCR技术(differential display polymerase chain reaction,DD-PCR)分别分析分蘖期(叶片)、孕穗期(幼穗)、抽穗期(剑叶)的基因差异表达模式。【结果】同一时期内强优势组G1(父本扬稻6号)、中优势组G3(父本特青)以及弱优势组G2(父本明恢63)在母本特异表达(UNP1)、父本特异表达(UNP2)、F1特异表达(UNF1)、F1特异缺失表达(ABF1)4个基因差异表达模式上存在明显差异;相关...
关键词：
水稻 杂种优势 表达模式
[期刊] 中国农业科学
[作者]
宋娜 戴青青 宋娜 黄丽丽 韩青梅
【目的】利用反向遗传学方法构建苹果树腐烂病菌(Valsa mali)中表达GTP-环化水解酶II基因Vmgtp1的敲除载体,通过同源重组的方法进行基因敲除分析目标基因的功能,为全面解析苹果树腐烂病菌致病的分子机制奠定基础,并为有效控制苹果树腐烂病的方法技术和药剂研制提供理论依据。【方法】通过对笔者实验室苹果树腐烂病菌转录组数据的分析比对得到GTP-环化水解酶II基因Vmgtp1(暂命名),该基因在接种5 d后,在病组织中表现出一定的上调表达,推测该基因可能与苹果树腐烂病菌致病相关。采用Double-joint PCR方法,将目标基因Vmgtp1的上游片段UP、下游片段DOWN及筛选标记潮霉素磷...
关键词：
苹果黑腐皮壳 同源重组 PEG 致病性
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
王海光 张洪亮 段俊枝 李自超
为研究水稻肌醇加氧酶基因在植物水分胁迫分子应答中的作用,采用RT-PCR技术克隆了水稻肌醇加氧酶基因的cDNA编码区,命名为OsMIOX。该基因由927个碱基组成,编码308个氨基酸,与拟南芥肌醇加氧酶的氨基酸序列相比,同源性为78%。将克隆的OsMIOX基因连接pCAMBIA-1301载体,成功构建了35 s启动子驱动的植物超表达载体。实时定量PCR分析结果表明,水分胁迫下OsMIOX基因在旱稻IRAT109中上调表达,在旱稻(IRAT109和毫格劳)中的表达量显著高于水稻(越富和日本晴)。这说明水稻和旱稻的水分胁迫分子反应机制的确存在差异,而这种差异很可能就是水、旱稻抗旱性不同的原因之一。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
熊炜 杨波 刘薇茵 王荃 孔晓聪 靳亚军 梁闪闪 栾维江 张泗举
【目的】农作物对逆境胁迫的耐受能力与产量息息相关,是作物育种要考虑的重要因素。文中对水稻顺式还原酮加双氧酶基因Os ARD1进行研究,分析其表达模式,明确其在水稻应对非生物胁迫中的功能,为水稻耐旱品种的分子设计及育种提供参考依据。【方法】提取不同组织器官的总RNA,利用RT-PCR方法分析Os ARD1表达的组织特异性。利用不同的非生物胁迫处理14 d大小的野生型(中花11)植株,在不同时间点提取总RNA,利用RT-PCR方法分析Os ARD1表达的受诱导情况。通过农杆菌遗传转化法转化水稻愈伤组织,经过一
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
乔醒 唐红玲 张凯岳 李鑫 曾汉来 何莹
为探讨水稻碳酸酐酶(carbonic anhydrase,CA,EC 4.2.1.1)对光合作用的影响,选取不同光合特性的4个水稻品种,测定灌浆期不同时段(开花后5、15和25d)剑叶OsCA基因的相对表达量、CA的活性和叶片净光合速率,分析CA活性及相关基因转录与光合作用之间的关系。结果表明:水稻剑叶的OsCA基因表达量、CA活性与叶片净光合速率显著相关,其相关程度在不同类型品种间存在差异,高光合特性品种R49在测定期各指标均处于最高水平。各品种的CA活性随着灌浆进程的推进呈现先升后降的动态趋势,并于灌浆中期(开花后15d)达到最大值;剑叶净光合速率在灌浆期呈现逐渐下降的趋势,而下降幅度存在...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
朱忠珂 王建华 汪儆 张春雷 蔡青和
为了探讨重组犬溶菌酶的活性及临床应用前景,人工合成犬溶菌酶基因,构建其原核重组表达载体pPROHTa-rcLYZ,进行原核表达并对表达产物进行活性分析。结果表明,合成的犬溶菌酶基因全长396 bp,编码132 aa;构建的表达载体pPROHTa-rcLYZ含有犬溶菌基因完整的ORF;重组犬溶菌酶的相对分子质量为16 ku;重组犬溶菌酶约占全菌总蛋白32％,纯化后占全菌可溶性蛋白的95％;重组犬溶菌酶最适pH值为6．2,最适温度为38℃,对溶壁微球菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌有较强的溶菌活力,对铜绿假单胞菌、链球菌、枯草杆菌等有一定的抑制作用,对白色念珠菌无抑制作用,对人工感染的犬大肠...
关键词：
犬溶菌酶基因 犬溶菌酶 原核表达
[期刊] 华北农学报
[作者]
张元臣 苏圣盈 张家祺 薛爽 王景顺
克隆东方黏虫C型溶菌酶基因MseLYS,构建MseLYS基因的原核表达载体，检测该基因在东方黏虫不同龄期和组织的表达情况，旨在为探究MseLYS基因的功能和结构提供理论参考，也为进一步研究该基因的抗菌功能和生理机制奠定基础。以东方黏虫为研究对象，通过反转录PCR(RT-PCR)和末端快速扩增技术(RACE),获得了溶菌酶基因MseLYS的全长核苷酸序列，之后将去掉信号肽的开放阅读框架(ORF)序列连接到表达载体pET-30a(+)上，并用IPTG进行了诱导表达，最后用荧光定量PCR明确了该基因的时空表达模式。序列分析表明，此基因全长729 bp, ORF全长426 bp, 5′和3′非编码区分别为75,228 bp,共编码141个氨基酸残基，其蛋白质的等电点和分子质量分别为7.72,16.13 ku。系统进化树分析结果表明，MseLYS与其他物种的C型溶菌酶聚集在一起，且与其他昆虫的氨基酸序列具有高度一致性，表明MseLYS为C型溶菌酶。SDS-PAGE电泳结果表明，MseLYS在表达菌BL21(DE3)内表达的蛋白质分子质量与预期大小一致，约20 ku,说明MseLYS在大肠杆菌中能够高效表达。龄期表达谱分析表明，MseLYS基因在东方黏虫幼虫、雄虫和雌虫不同发育阶段表达量显著不同，在末龄幼虫、蛹中表达量较高，其他发育时期表达水平较低。组织表达分析结果表明，MseLYS基因在雄虫不同组织表达量存在着显著差异，其中脂肪体和胸内表达量较高；在雌虫不同组织表达量也存在显著差异，其中触角、翅和体壁中表达量较高。综上，成功克隆了东方黏虫C型溶菌酶MseLYS基因的全长序列，构建了该基因的原核表达载体并能够高效表达蛋白质，明确了该基因在不同组织和不同龄期的表达模式。
[期刊] 华北农学报
[作者]
张鹏 江明锋 马晓瑞 方毅 王永
基于物种同源性,应用PCR和RT-PCR技术,克隆得到藏山羊瓣胃溶菌酶基因cDNA编码序列,并命名为TGOLyz,应用生物信息学软件对TGOLyz基因核苷酸序列及预测的蛋白序列进行了分析,并预测该蛋白的三级结构;应用qRT-PCR技术检测了TGOLyz在5个组织中的定量表达。结果表明,藏山羊瓣胃溶菌酶基因TGOLyz cDNA编码区长444 bp(Accession No.KC558501),编码147个氨基酸,分子量为16.29 kDa,等电点为6.08。同源性对比显示,TGOLyz与牛胃1(Cow stomach 1)的同源性最高,达95.24%,与牦牛胃(Yak stomach)的同源性...
[期刊] 华北农学报
[作者]
周倩怡 黄思杰 田洁
中性/碱性转化酶作为植物蔗糖代谢的关键酶，主要参与植物生长发育、逆境胁迫响应等过程。为探究大蒜AsNI对逆境胁迫的响应模式，以乐都紫皮大蒜为试验材料，克隆得到2个中性/碱性转化酶基因，并进行了生物信息学和表达特性分析。结果表明，AsNI1和AsNI2的开放阅读框分别为522,1 203 bp,编码173,400个氨基酸；AsNI1与AsNI2均为亲水性蛋白，预测定位于细胞质，具有Glyco＿hydro＿100结构域；但二者的氨基酸序列相似性仅为25.75%,AsNI2含有1个糖基化位点，而AsNI1未检测到糖基化位点，二者的亲缘关系较远。蛋白互作网络分析结果表明，AsNI2与AsNI1可能参与不同的生化过程。启动子序列分析发现，AsNI1和AsNI2的启动子区域含有多个与响应相关的顺式作用元件，其中AsNI2启动子的干旱和低温胁迫响应元件个数显著大于AsNI1。通过对启动子转录因子结合位点进行预测发现，二者含有不同种类及数量的结合位点，表明AsNI1和AsNI2可行使不同的基因功能。qRT-PCR检测发现，AsNI的表达具有明显的组织特异性，AsNI1和AsNI2分别在根和鳞茎中表达量最高。同时，逆境胁迫能够诱导AsNI表达，低温和干旱处理下均以AsNI2的响应程度强于AsNI1。其中，低温胁迫以诱导叶片AsNI2的表达为主，干旱胁迫以诱导根系AsNI2的表达为主。通过分析AsNI的序列特征和表达模式，验证了AsNI的抗逆功能。
[期刊] 淡水渔业
[作者]
姚佳俊 李忠 梁宏伟 罗相忠 王丹 邹桂伟
为了解c型溶菌酶基因与长丰鲫(Chang Feng Carassius auratus)的抗菌效应关系,本研究利用同源克隆方法获得长丰鲫c型溶菌酶基因cDNA全长序列。结果显示:c型溶菌酶基因全长698 bp,包括5'端非翻译区60 bp,3'端非翻译区200 bp,开放阅读框438 bp,编码145个氨基酸。长丰鲫c型溶菌酶基因在肾脏组织中表达量最大,在脾脏、肠道、心脏和脑中大量表达,在肝脏和鳃中表达量相对较低,在皮肤和肌肉中几乎不表达。长丰鲫在感染迟钝爱德华氏菌、嗜水气单胞菌和金黄色葡萄球菌后,在肝脏
文献操作()
导出元数据
文献计量分析
导出文件格式：WXtxt
删除
