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[期刊] 华北农学报
[作者]
李秋伶 王省芬 马峙英 张桂寅
以农大KB18的茎尖分生组织为受体材料,利用基因枪轰击法将植酸酶基因(PhyA)导入棉花茎尖分生组织,经过再生、筛选、分子检测等过程获得若干转基因植株。通过研究碳源、外源激素、活性炭、轰击距离和轰击次数以及茎尖的恢复培养与抗性筛选等,建立了较为完善的棉花基因枪茎尖转化体系。结果表明,植株再生率与再生培养基的成分,如激素的有无、活性炭的含量和碳源等有关,轰击距离以及筛选程序中卡那霉素的起始筛选时间、筛选浓度和浓度梯度等因素对转化周期和转化率有直接影响。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
曹团武 朱建楚 亢福仁 陈耀锋 曹鑫 赵云祥 任慧莉 李春莲
以小麦愈伤组织为受体材料,用基因枪法将报告基因GUS和目的基因Psag12-IPT导入小麦中。GUS基因表达检测表明,金粉用量越高,转化频率越高;质粒DNA用量以2.0μg/枪最佳;随着愈伤组织培养时间的延长,GUS基因瞬时表达呈明显下降趋势,至第28天以后趋于稳定。另外,GUS基因瞬时表达检测应在24h内进行。
[期刊] 华北农学报
[作者]
刁现民 陈振玲 段胜军 刘玉乐 赵连元 孙敬三
通过 Ｇｕｓ 基因 在谷子 胚性愈伤 组织中 的瞬时表 达检测， 分析 了影 响谷 子愈 伤组 织基 因枪转化效 率的几个 因素。钨 粉的包 被质粒 Ｄ Ｎ Ａ 用量以 ３ μｇ／ ｍ ｇ 钨粉 ， Ｃａ Ｃｌ２ 浓度１５ ｍ ｏｌ／ Ｌ，亚 精胺浓度４０ ｍ ｍ ｏｌ／ Ｌ 为最 佳，过高 的 Ｄ Ｎ Ａ 、 Ｃａ Ｃｌ２ 和亚精 胺加入量 均显著降 低转 化率 ； Ｊ Ｑ７００ 基因 枪样品室高度 ７ ｃ ｍ ，轰 击速 度 ４００ ～４５０ ｍ ／ｓ 转 化， 较其 它 速度 和样 品 室高 度下 转 化 Ｇｕｓ 基因 表 达率高；每 次转化的 愈伤组织 用量对 转化...
关键词：
谷子 基因枪 瞬时表达 参数优化
[期刊] 华北农学报
[作者]
黄冰艳 刘文轩 刘新涛 海燕 罗鹏 和现昌
根据不同基因型甘薯茎尖分生组织在不同激素水平的生长反应，将４个河南主栽甘薯品种分为３类：激素不敏感易成苗型、激素敏感易成苗型和激素不敏感难成苗型。光照时数不是甘薯茎尖培养成苗的限制因素，以不低于１４ｈ／ｄ为好。
[期刊] 华北农学报
[作者]
贾炜珑 杨丽莉 周小梅 王景雪 孙毅
以玉米愈伤组织为受体 ,借助GUS基因的短暂表达 ,优化了PDS 10 0 0 /He型基因枪和自制基因枪的基因枪转化参数。PDS 10 0 0 /He型基因枪转化玉米愈伤组织的最佳轰击参数为 135 0psi压力 ,2 5In·Hg真空度 ,6cm射击距离。自制基因枪转化玉米愈伤组织的最佳轰击参数为0 6MPa ,10cm射击距离
[期刊] 华北农学报
[作者]
陈梁鸿 王新望 张晓东 胡道芬 刘广田
用基因枪进行ｇｕｓ基因转化，研究了小麦幼穗、幼胚愈伤组织不同诱导培养时间的转化效果。结果表明，幼穗以诱导培养１６ｄ的转化效果最佳，幼胚以诱导培养１５ｄ的转化效果最好。比较幼穗和胚的组织培养结果发现，幼穗较幼胚更耐继代和形成再生植株。
关键词：
基因枪,小麦,转化,幼胚,幼穗
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
张献龙 林双龙 吕复兵 董新国
对陆地棉无菌苗的微茎尖（０．５～１．０ｍｍ）进行了培养，结果表明，ＭＳ较ＳＨ具较好的成苗效果，活性炭显著地促进了茎尖成苗，不同激素水平对成苗率和苗的发育有不同影响，在使用的碳源中，葡萄糖明显好于蔗糖，光下萌发的幼苗茎尖易于培养成苗，陆地棉茎尖培养在供试品种间没表现出明显差异。
关键词：
陆地棉,微茎尖,离体培养
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
唐琳 徐莺 赵婷婷 颜钫 徐是雄 陈放
用高压氦气式基因枪将CaMV35S启动子驱动下的gus基因导入经济植物番红花的叶鞘和叶、芽来源的愈伤组织块中 ,4 8h后染色检测到了gus基因的瞬间表达 ,2 0d后仍检测到极少量表达 .研究发现 ,轰击前在加有 0 5mol L甘露醇的液体愈伤组织继代培养基上处理 6h ,明显增加了gus基因表达的数量 ;选择 110 0psi× 9cm的轰击条件 ,转化效果最好 ;高浓度卡那霉素 (5 0 0～ 80 0mg L)可以作为筛选剂 .结果表明 ,基因枪法是有效的番红花遗传转化方法 ,gus基因可以作为番红花基因工程研究的报告基因 ,CaMV35S启动子能有效驱动外源基因在番红花组织中表达
关键词：
番红花 gus基因 基因枪法 瞬间表达
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
赵燕 易自力 洪亚辉 任春梅 李祥
为了提高农杆菌转化水稻的频率 ,对粳稻品种台北 30 9的幼穗和成熟胚的愈伤组织诱导频率和粒子轰击时其愈伤组织转化频率的影响进行了研究 .结果表明 ,水稻幼穗是诱导愈伤组织的最佳外植体 ,通过粒子轰击可以有效地提高农杆菌转化水稻愈伤组织的频率 ,其中以每个样品轰击两次的效果最好 ,其转化率比对照提高5 4.5 %
关键词：
水稻 愈伤组织 粒子轰击 农杆菌转化
[期刊] 世界农业
[作者]
郭新红 姜孝成 陈良碧
[期刊] 华北农学报
[作者]
王晓春 季静 王萍 王罡
以大豆品种合丰25的球形期体细胞胚为受体,以CpTI基因为目的基因,应用基因枪法进行了遗传转化,同时以抗性体细胞胚筛选率作为转化率的指标,对影响基因枪转化的几个参数进行了优化研究。结果表明,氯化钙浓度2.5 mol/L、氦气压力1 100 Psi、轰击次数为2次,有利于提高转化率;经卡那霉素筛选得到抗性植株,经PCR分析鉴定有2株为阳性,初步证明外源基因CpTI已转到大豆基因组内。
[期刊] 华北农学报
[作者]
董福双 张艳敏 杨帆 梁新朝 刘桂如 王海波
为建立简易的不依赖组织培养和抗性筛选的小麦转基因技术,以小麦品种石4185为对象,以gus和badh/bar为外源基因,围绕适于基因枪转化的种子芽生长点受体的制备、基因枪轰击参数的优化等开展了试验,建立了"用解剖刀去除种子根、用镊子把芽鞘掰去、用镊尖扫去包盖生长点的未展开叶、将带生长点的部分与胚乳分离"为特点的受体制备方法;确定1100 Psi+9 cm为最佳轰击参数组合。对轰击后的小麦芽生长点(70个×3批)进行gus基因瞬时表达检测,以受体数统计时,转化率为22.9%~35.7%;以生长点数统计时,转化率为5.7%~8.6%。用含badh/bar的pABH9质粒转化1000个受体,发育成了...
关键词：
小麦 芽生长点 基因枪 转化
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
任春梅 董延瑜 洪亚辉 赵燕
为了建立基因枪介导的西瓜遗传转化系统 ,以西瓜顶芽为受体 ,p BI12 1为供体 ,采用正交试验设计 ,研究了基因枪的扩散腔类型、轰击次数、受体的预培养和高渗处理对转化率的影响 .经方差分析与差异显著性测验 ,预培养时间与轰击次数对转化率影响显著 ,而扩散腔类型和甘露醇处理质量浓度对转化率的影响不显著 .经组织化学检测 ,有 33.3%抗 Kan试管苗为 GUS阳性
关键词：
西瓜 顶芽 基因枪 转化
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
李贞霞 张兴国
利用基因枪轰击法建立了魔芋的遗传转化体系。试验结果表明 ,氦气压力 /轰击距离以 7.5 8GPa/9cm最适。在轰击前 4h和轰击后 16h用附加有 0 .4mol/L甘露醇的MS培养基进行高渗处理、轰击后恢复培养6～ 7d ,有利于减少逆境伤害 ,增加转化成功的几率。早期选用 1mg/LBasta作为选择压 ,而后期的筛选使用 2mg/L较高浓度的Basta可以获得真正的转化子。对获得的 91株抗性植株进行了PCR检测 ,结果显示 2 1株呈阳性 ,表明PAT基因和AGPS1反义基因均已整合进魔芋基因组。
关键词：
魔芋 基因枪 遗传转化
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