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[期刊] 草业科学  [作者] 何鸟飞   赵绪涛   李开祥  
基于InDel标记对青海主栽春油菜品种和近几年新选育的春油菜品种的亲本材料及其F1进行研究,以15份青海主栽春油菜品种亲本为材料,从190对InDel标记中筛选出13对多态性的标记作为核心InDel标记,分别用13对标记对供试材料进行PCR扩增,对15份供试材料进行遗传多样性分析、聚类分析、DNA指纹图谱的构建及对供试材料的杂交种进行纯度鉴定。结果表明:13对引物共扩增出48个位点,每对引物平均位点为3.7个,有效等位基因平均6.39个,总体遗传多样性平均0.38,Shannon’s 指数平均2.09。遗传相似系数0.58处,15份供试材料被分为3类,其中C类包含的材料最多,占总供试材料的73%。杂交种的纯度鉴定结果显示,InDel标记鉴定结果比大田育性调查结果低2~5.5个百分点。本研究为青海省近几年新选育的油菜品种和其他主栽油菜品种亲本以及杂交种的纯度鉴定提供理论依据。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 杨宏  刘小俊  梁根云  李跃建  
为了快速而准确地鉴定杂交黄瓜种子的纯度和真伪,用164对全基因组覆盖的SSR引物对黄瓜品种‘川绿2号’及其亲本进行多态性筛选。结果表明,28对引物在亲本间具多态性,这些引物在1~7号染色体均有分布,其中2、6号染色体上分布有较多多态性位点。28对多态性引物中共显性引物22对,缺失多态性引物6对。共显性引物中有10对引物在杂交后代表现为清晰、稳定的父母本互补的带型,特异性强,可分辨程度高,可以用来区别其中混杂的母本、父本及其他种子,为‘川绿2号’及其亲本指纹图谱的核心引物。利用这10对引物对1批‘川绿2号’种子进行检测,分子标记鉴定纯度为96.0%,真、假杂种编号与田间鉴定结果一致。这28对引物...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 曲亮  陈卫江  李莓  王同华  
利用简化的SSR标记技术对甘蓝型油菜杂交种丰油701、丰油730和湘杂油4号的制种样进行纯度分析,并将丰油701收获样各单株的SSR分析结果与其育性表现进行了比对.结果筛选了38对SSR引物,其中引物Na10-D09在3个品种的不育系与恢复系间的扩增片段大小均存在差异.种植鉴定和SSR鉴定的纯度比较分析表明,SSR技术得到的纯度鉴定结果较种植鉴定的结果更为可靠.
[期刊] 华北农学报  [作者] 宋顺华  郑晓鹰  
应用随机扩增多态性DNA(RAPD)标记鉴定大白菜杂种商品种子的纯度。用 50个随机引物检测了 2个杂交种北京 57号和北京 10 6号及其亲本 ,引物OPE - 2 0在北京 57号杂交种中产生了有别于双亲的特殊标记 ,引物OPH - 0 6及OPH - 0 7在北京 10 6杂交种中产生了有别于双亲的特殊标记 ,能清楚地区分杂交种及其双亲 ,并将这些引物应用在北京 57号和北京 10 6号杂交种样品的纯度检测中。这个结果显示了RAPD标记在大白菜杂交种商品种子纯度检测上的实际用途
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 胡辉林  党润盈  王军  
建立了种子酯酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定向日葵杂交种及自交系的技术 ,并对 3对自交系及 8个向日葵品种进行了鉴定。结果表明 :(1 )自交系与其杂交种酶谱有明显区别 ,杂交种酶型具双亲互补性 ;(2 ) 8个向日葵品种可从酶谱区分 ;(3)该法快速、成本低 ,具一定适应范围 ,鉴定向日葵品种纯度效果良好
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 王玺  曹萍  
选用铁单9号等18个玉米杂交种的35份样品分别进行电泳鉴定和田间小区种植鉴定,并对鉴定结果进行统计分析,结果表明:两种方法鉴定的结果存在明显差异,但它们相关性达到极显著水平。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 姚宗泽  李阳  郭宗娟  李军萍  聂贵芳  赵自仙  李云波  
【目的】验证SNP分子标记中HRM技术鉴定结果的可靠性,为杂交玉米种子纯度鉴定方法的选择提供参考。【方法】以杂交种家佳荣2号及其父母本、近似杂交组合JR02为材料,采用田间小区种植鉴定和SNP分子标记中的HRM技术两种方法对杂交玉米家佳荣2号的同一批种子样品进行纯度鉴定。【结果】田间小区种植纯度鉴定结果为97.8%,SNP分子标记纯度鉴定结果为97.1%。【结论】SNP分子标记中的HRM技术鉴定结果可靠,可作为杂交玉米种子的纯度鉴定方法之一。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 蒋莉莉  张高原  张建农  
【目的】研究有效的西瓜杂交组合种子纯度的SSR标记鉴定方法,为室内鉴定的实际应用提供理论依据。【方法】以西瓜杂交组合T-1及其亲本自交系P-1、M-13为材料,在子叶展平期采用CTAB法提取DNA,利用优化的西瓜SSR标记方法进行杂交种子的纯度鉴定,并与田间表型鉴定进行比较。【结果】从36对SSR引物中筛选出3对(MCPI-5、MCPI-16、MCPI-17)稳定性强、可重复性好、在杂交种及其母本之间具有多态性的引物。将这3对引物中的MCPI-5和MCPI-16用于267株T-1杂交种群体纯度鉴定,显示种子纯度为97.75%,与田间种植鉴定结果一致。【结论】3对SSR引物MCPI-5、MCPI...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 段院生  刘平武  杨光圣  
通过对杂交组合H990 9两亲本的指纹图谱分析 ,初选出 4个引物S374、S1334、S136 5和UBC5 2 3用于杂种纯度鉴定。引物S1334和UBC5 2 3在两亲本中均扩增出特异带 ,引物S374和S136 5能扩增出父本标记带。以两亲本和手工杂种F1为模板对上述 4个引物再一次进行RAPD扩增 ,S1334并没有在F1的RAPD图谱产生理想的双亲型或偏父型标记带 ,UBC5 2 3在F1扩增得到的父本标记带和在母本中扩增的标记带大小相近 ,不易辨别 ;引物S374、S136 5均能使F1扩增出父本的特异带 ,进一步确定引物S374和S136 5可用于杂种鉴定。引物S374的RAP...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 李益  马先锋  唐浩  李娜  江东  龙桂友  李大志  牛英  韩瑞玺  邓子牛  
【目的】筛选出一套SSR核心引物,用于构建柑橘品种的DNA指纹图谱库,为柑橘种苗认证、品种登记和植物新品种保护提供技术支撑。【方法】以柑橘属8个主要栽培种类为试材进行PCR扩增,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测,筛选出多态性丰富、扩增条带稳定的引物对部分参试品种进行PCR扩增,扩增产物通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳进行进一步的引物筛选;筛选得到的引物进行荧光标记,并选用部分柑橘品种进行PCR扩增,扩增产物利用基因分析仪检测,分别计算各引物的PIC值、等位基因数目,选取一套多态性丰富的适合进行荧光毛细管电泳检测的SSR引物组合,进而对所有参试品种进行分析,构建柑橘品种的DNA指纹图谱库,同时利用筛选的SSR标记对参试品种进行鉴定。【结果】初期以柑橘属8个种的代表品种(太田椪柑、沙田柚、沅江酸橙、大红甜橙、邓肯葡萄柚、枸橼、费米耐劳柠檬和墨西哥来檬)为材料,用362对SSR引物进行PCR扩增,扩增产物经4%琼脂糖凝胶电泳检测,初步筛选出80对种间多态性高、扩增稳定的SSR引物;进一步从8个种类里选择不同类型的64个柑橘品种,用上述筛选出的80对SSR引物进行PCR扩增,扩增产物经6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,再筛选出60对品种类型间多态性高、扩增稳定、条带清晰的SSR引物,并分别进行荧光标记;另以168份柑橘品种为材料对上述60对SSR引物进行PCR扩增,经荧光毛细管电泳检测,依据各引物的PIC值、等位基因数目、峰图读取难易程度、扩增稳定性及染色体位置等,最终筛选出21对SSR引物作为指纹图谱库构建的核心引物。为消除不同仪器、不同试验批次等引起的误差,为21对SSR引物各主要等位变异选择相应的参照品种。根据各引物标记的荧光颜色及扩增片段大小进行合理组合,21对SSR引物可分成5组进行多重电泳,共采集500份柑橘品种的DNA指纹。利用SSR标记,有111份品种仅用1对引物即可鉴别,86份品种用2对引物组合即可鉴别,24份品种用3对引物组合即可鉴别,另外279份品种虽无法单独一一鉴别,但可分为87个小组,组内品种无法区分,组间品种易鉴别。【结论】利用筛选出的21对SSR核心引物,构建了包含500份柑橘品种的DNA指纹图谱库,筛选出部分品种的特异标记,可以鉴别221份柑橘品种和87个品种组合,构建了基于毛细管电泳平台的柑橘SSR分子标记品种鉴定体系。
[期刊] 华北农学报  [作者] 郑晓鹰  黄为平  
用聚丙烯酰胺均匀胶和等电聚焦电泳技术,分析了甜椒种子及种苗的过氧化物同功酶谱和种子水溶蛋白图谱。在过氧化物酶谱带的两个位点PRX-1和PRX-2上,自交系亲本与F1杂交种有明显的差异。水溶蛋白的一个位点PROT亲本与F1有明显差异。供试甜椒组合的过氧化物酶和蛋白的图谱,分别具有这些位点。利用这些鉴别图谱,对甜椒商品种子样品进行的杂交种纯度检验,纯度范围在8%~99%,与田间检测结果一致。这一电泳检测技术可以有效地用于甜椒杂交种纯度的检验
[期刊] 西南农业学报  [作者] 李阳  范梦伟  季晓坤  贾相初  吴彬  赵自仙  王德海  
【目的】玉米杂交种子的纯度直接影响农作物的产量、品质和农户的收成,建立一套简单、快速、准确、可靠的纯度鉴定方法十分必要。【方法】本试验以‘家佳荣2号’玉米杂交种及其父母本为材料,采用幼叶CTAB法和碱煮法提取DNA两种方法,利用SSR标记技术从20对玉米纯度鉴定标准SSR引物中筛选应用于‘家佳荣2号’种子纯度鉴定的引物,同时人为掺入其他品种籽粒以验证特异引物的可靠性。此外,同步采用公认的田间小区种植鉴定法研究‘家佳荣2号’的种子纯度,比较室内和田间种植鉴定的纯度差异。【结果】采用幼叶CTAB法提取得到的DNA比碱煮法效果更好;筛选得到引物phi072k4和bnlg2291k4是‘家佳荣2号’种子纯度鉴定的特异性引物,掺杂验证结果可靠,‘家佳荣2号’室内SSR鉴定纯度为96.4%,田间种植鉴定的纯度为97.5%,2种方法结果高度一致。【结论】幼叶CTAB法提取DNA更适合玉米种子纯度的分子鉴定;SSR方法可用于玉米杂交种纯度的室内快速鉴定。
[期刊] 华北农学报  [作者] 郑晓鹰  李丽  邢宝田  
用 10种同工酶和蛋白质分析体系 ,分析了 7种重要蔬菜的 71个杂交种与其亲本之间的差异位点 ,以及这些差异位点用于杂交种纯度检测的可能性和存在的问题。试验表明 ,作物的不同种类 ,杂交种与亲本之间的亲缘关系以及作物种类的遗传多态性 ,都会影响同工酶差异位点产生的多寡 ,从而影响到这一技术是否能用于此种作物的纯度检测。分析了不同同工酶在不同蔬菜中的多态性以及在蔬菜种子纯度检测中的表现
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 包文泉  乌云塔娜  赵罕  杜红岩  
【目的】基于SSR分子标记评价仁用杏遗传多样性,并利用SSR标记鉴别仁用杏品种,构建仁用杏SSR指纹图谱,为仁用杏资源的合理利用与开发提供依据。【方法】利用9对多态性高、重复性好且条带清晰的SSR标记,对我国16个仁用杏主栽品种进行荧光毛细管电泳检测,评价其遗传多样性,并鉴别仁用杏品种和构建指纹图谱。【结果】利用9对SSR引物在16个供试仁用杏品种中共检测到68个等位基因(Na),平均每位点7.56个;位点MA039a检测到的等位基因最多(10个),位点UDP97-401检测到的等位基因最少(6个);多态
[期刊] 中国农业科学  [作者] 宋海斌  崔喜波  马鸿艳  朱子成  栾非时  
【目的】建立甜瓜品种的DNA指纹图谱数据库,实现对甜瓜品种进行快速、准确的鉴定。【方法】应用SSR分子标记技术,首先利用20份具有代表性的甜瓜品种(系)筛选SSR引物,然后对105份不同甜瓜品种(系)进行指纹图谱的构建。【结果】从1 219对SSR引物中筛选出18对引物为105份材料形成了多态性的指纹图谱,其中每对引物可以检测到4—14条数目不等的多态性条带,平均为9条;多态性信息含量(PIC)平均为0.68,变化范围为0.55—0.82。105份材料间的相似系数为0.70—0.99。利用这18对SSR核心引物构建的指纹图谱库能够有效区分所有供试材料,并且为每份材料建立了一份独特的指纹图谱。【...
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