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[期刊] 中国农业科学
[作者]
范子玲 许楚楚 舒适 肖鑫焕 王刚 白云龙 张江 赵畅 夏成
【目的】运用代谢组学中气相色谱/质谱联用技术(GC/MS)筛选卵巢静止奶牛和正常发情奶牛的血浆差异代谢物,探究奶牛发生卵巢静止时其体内代谢的变化。【方法】在黑龙江省某集约化牛场选取产后60—90 d,年龄、胎次、体况相近的经产高产奶牛为实验动物。根据奶牛的发情表现、直肠检查、B超检查及激素检测的结果,将奶牛分为发情组(A)22头和卵巢静止组(B)20头。应用GC/MS对两组奶牛的血浆样品进行检测得到其代谢组图谱,利用Chroma TOF软件对得到的峰图进行分析,得到原始数据。将标准化的GC/MS数据矩阵导
[期刊] 中国农业科学
[作者]
李亚娟 王东升 张世栋 严作廷 杨志强 杜玉兰 董书伟 何宝祥
【目的】利用气相色谱／质谱联用技术（ｇａｓ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈ ｔａｎｄｅｍ ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ｇｃ－ｍｓ）对奶牛血浆进行代谢组学分析，以明确奶牛发生蹄叶炎时血浆中代谢物的变化，进一步揭示其发病机制。【方法】根据蹄叶炎奶牛的临床症状和活动量情况，选取蹄叶炎患病组ｓ和健康对照组ｃ奶牛各１０头，采集血浆样品，经衍生化处理后，利用ｇｃ－ｍｓ方法对两组奶牛的血浆进行全部代谢物检测。用ｓＩｍｃａ－ｐ １１．５软件进行主成分分析（ｐｒＩｎｃＩｐａｌ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ ａｎａｌｙｓＩｓ，ｐｃａ）和偏最小二乘法分析（ｓｕｐｅｒｖＩｓｅｄ ｐａｒｔＩａｌ ｌｅａ．．．
[期刊] 中国农业科学
[作者]
李影 徐闯 夏成 张洪友 孙玲伟 许楚楚
【目的】运用代谢组学中1H NMR技术方法筛选出Ⅰ型酮病、Ⅱ型酮病与健康对照组之间血浆差异性代谢物。【方法】选取产后7—28 d,平均胎次为2—3胎的实验奶牛50头。根据血糖(Glc)、β-羟丁酸(BHBA)和游离脂肪酸(NEFA)的含量与临床发病特点分为Ⅰ型酮病、Ⅱ型酮病与健康对照组,其中Ⅰ型酮病20头,Ⅱ型酮病为20头,健康对照组为10头。当患病牛血中BHBA>1.20 mmol?L-1,Glc0.50 mmol·L-1时,被认为患I型酮病;当患病牛血浆中BHBA>1.20 mmol?L-1,Glc>2.80 mmol?L-1,NEFA>0.50 m...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
梁光华 邓敏 刘贤侠 谷新利 高树 徐雷
【目的】研究促孕散对持久黄体和卵巢静止奶牛雌二醇(E2)、促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)和孕酮(P4)4种生殖激素的影响,探讨促孕散治疗奶牛持久黄体和卵巢静止的作用机理。【方法】用促孕散治疗奶牛持久黄体和卵巢静止,统计发情率,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测奶牛血清中的E2、FSH、LH和P44种生殖激素,并与正常奶牛对比。【结果】促孕散治疗持久黄体牛发情有效率为91.67%,治疗卵巢静止牛发情有效率为88.89%。促孕散处理前,持久黄体P4水平极显著高于正常组(P<0.01),卵巢静止P4极显著低于正常组(P<0.01),而两种病型在处理前E2、FSH、LH水平与正常组差异不显著(P...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
唐玉林 张博 任曼 张瑞雪 秦俊杰 朱浩 郭延生
【背景】在当前饲料禁抗的背景下，利用低残留、无毒副作用的中草药制剂进行奶牛围产期保健已备受广大养殖企业的青睐。前期研究发现，归芪益母口服液能够减轻产后奶牛炎性反应、增强免疫力和缓解能量负平衡，但其详细的作用机制尚不清楚。【目的】通过超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）代谢组学技术评价归芪益母口服液对产后奶牛瘤胃代谢的调节作用，以期从新的视角揭示该配方的作用机制。【方法】试验选择18头体况相近、2—3胎次健康待产荷斯坦奶牛，随机分为对照组和试验组，每组各9头。试验组和对照组分别在产后0 d灌服归芪益母口服液和饮用水，连续灌服6 d。产后0 d未灌服前和产后7 d晨饲前采集瘤胃液，预处理后采用UPLC-MS/MS技术对瘤胃代谢物进行定性和定量分析。两组瘤胃液代谢物数据导入MetaboAnanlyst 5.0软件进行主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘判别分析（OPLS-DA），考察两组奶牛瘤胃液代谢轮廓的变化，筛选差异代谢物进行聚类分析和通路富集分析。【结果】产后7 d，试验组瘤胃代谢轮廓较对照组发生明显改变，43种瘤胃代谢物含量发生了显著变化（VIP>1,P<0.05），其中8种代谢物含量显著上调（P<0.05），分别是9-氧代-10E,12Z-十八碳二烯酸、石榴酸、6-二甲基氨基嘌呤、L-脯氨酸、马来酸、N-乙酰基5-羟色胺、泛酰醇、刺芒柄花素，35种代谢物含量显著下调（P<0.05），包括有机酸及其衍生物、核苷酸及其代谢物、碳水化合物及其代谢物等；聚类分析结果显示差异代谢物能明显区分对照组与试验组奶牛瘤胃液；代谢通路富集分析显示归芪益母口服液明显改变了奶牛瘤胃内组氨酸代谢、戊糖和葡萄糖醛酸相互转化、精氨酸和脯氨酸代谢、色氨酸代谢、嘧啶代谢和嘌呤代谢通路。【结论】归芪益母口服液能促进产后奶牛瘤胃菌群代谢机能，是其缓解产后奶牛能量负平衡、增强免疫、抗炎和维持肠道稳态的机制之一。
[期刊] 海洋渔业
[作者]
房文红 胡琳琳 陈玉露 贾娴
采用电喷雾离子阱质谱法在正离子检测方式下,对锯缘青蟹口灌恩诺沙星给药后血淋巴中恩诺沙星和代谢产物进行定性分析。通过对血浆中恩诺沙星及其代谢产物的质谱裂解行为进行碰撞诱导解离分析,获得了各化合物的多级质谱信息,通过比较各化合物结构和质谱裂解途径的异同点,发现有三个代谢产物,其中峰面积最大的为环丙沙星,其次为羟基化恩诺沙星,另一代谢产物可能是加氧恩诺沙星;推测恩诺沙星在锯缘青蟹体内的代谢反应主要是脱乙基反应、羟基化反应和氧化反应。通过定量分析,血浆中恩诺沙星和代谢产物环丙沙星的浓度分别为19.1μg/ml和0.526μg/ml。
关键词：
恩诺沙星 代谢产物 离子阱质谱 锯缘青蟹
[期刊] 中国农业科学
[作者]
孙玲伟 包凯 李影 李兰 张洪友 夏成 吴凌
【目的】基于代谢组学的气相色谱(GC)/质谱(MS)联用技术分析临床酮病、亚临床酮病和健康的奶牛血浆代谢谱,观察奶牛体内代谢产物的变化,寻找内源性代谢分子标记物,用于发现奶牛临床和亚临床酮病的早期诊断及病情进展的特征生物标志物,并阐明该病发病机制。【方法】收集临床酮病奶牛血样24例,亚临床酮病奶牛33例,健康对照组奶牛23例,静脉采集试验奶牛血液,分离血浆,检测其β-羟丁酸、血糖等生化指标。将血浆样品预处理后,运用GC/MS联用技术检测各组奶牛血浆代谢产物,利用质谱数据库对其进行鉴定。采用主成分分析(principal component analysis,PCA)和偏最小二乘判别分析法(pa...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
徐闯 朱奎玲 陈媛媛 杨威 夏成 张洪友 吴凌 舒适 沈泰钰 于洪江 许秋实 张子扬
【目的】脂肪肝是围产期奶牛主要代谢性疾病之一，５０％产后奶牛受其影响。产后奶牛生产力降低、繁殖性能低下、免疫功能减弱、肝功能衰竭和过早死亡都与脂肪肝有关。表面增强激光解析／电离飞行时间质谱（ＳＥＬＤＩ－ＴＯＦ－ＭＳ）是一种对生物样本蛋白质研究的新型高敏感性蛋白质组学方法，文章旨在探讨脂肪肝奶牛血浆蛋白质组学特征。【方法】于黑龙江某集约化养牛场选择产后７—２８Ｄ，１—２胎次荷斯坦奶牛４０头。清晨空腹尾静脉采血１０Ｍ Ｌ，应用肝素抗凝（１５０Ｕ）迅速离心（３ ０００ ｒ／ＭＩｎ，５ ＭＩｎ）分离血浆，置于－８０℃冰箱冷冻保存。依据血浆甘油三酯（ＴＧ＞０．２０ ＭＭＯＬ·Ｌ－１），血浆β－羟丁酸（Ｂ．．．
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
王军 曹梅艳 姜才 韩苏廷 张铁锋
确定卵巢机能无障碍子宫内膜炎不孕症奶牛子宫内细菌的感染状态。在调查奶牛不孕症的基础上,对临床确诊为卵巢机能无障碍子宫内膜炎不孕症奶牛的子宫内细菌进行分离鉴定。调查的853头奶牛中患不孕症的占11.8%,其中卵巢机能无障碍子宫内膜炎不孕症奶牛占66.3%,其他原因不孕症奶牛33.7%。卵巢机能无障碍子宫内膜炎不孕症奶牛的子宫内容物均被测定有细菌存在,而对照健康奶牛子宫内容物未有分离到细菌。从临床确诊的67例卵巢机能无障碍子宫内膜炎不孕症奶牛的子宫内容物中,分离到细菌菌株119株,其中葡萄球菌36株、链球菌40株、大肠杆菌36株、变形杆菌4株、芽孢杆菌1株、化脓棒状杆菌1株。本研究卵巢机能无障碍子...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
李紫曦 牟美睿 杨仁杰 刘海学
【目的】探究产地环境对铁皮石斛生长及代谢物质的成分表征影响，筛选不同产地的铁皮石斛差异代谢物。【方法】采用气相色谱质谱联用技术(GC-MS)结合主成分分析(PCA)、偏最小二乘判别分析(PLS-DA)等多元统计分析方法对不同产地铁皮石斛样品进行非靶向代谢组学分析。【结果】对不同产地石斛代谢物进行主成分分析可以将栽培品种与除湖南外的野生品种区分开，结合偏最小二乘判别分析与T检验(Student’s t-test)对湖南野生种与室内栽培种进行差异代谢物分析，并利用聚类热图分析(HCA)进行差异代谢物的验证，最终找到包括丙酸(Propionic acid)、苏氨酸(Threonine)等在内的20种极显著差异代谢物(P<0.01)。【结论】野生铁皮石斛与栽培品种间存在20种显著差异代谢物，主要为有机酸及多糖类代谢物，本研究可为指导铁皮石斛的植源性鉴定及真伪判断提供理论依据。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
孙雨航 许楚楚 李昌盛 夏成 徐闯 吴凌 张洪友
【目的】应用1H谱核磁共振(1H NMR)技术筛选乳热奶牛血清内差异表现的小分子代谢物,从小分子水平和物质、能量代谢的角度探究奶牛发生乳热时其体内的代谢变化。【方法】选取年龄、胎次、体况和泌乳量相近的分娩当天的荷斯坦高产奶牛共32头,根据其血清中钙离子浓度及其有无临床症状分为两组。其中,24头奶牛为健康对照组(Group1,血钙浓度>2.5 mmol·L-1,无其他任何症状)和8头乳热组(Group2,血钙浓度
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
杨震 黄克和 候加法 毛鑫智 郁者华
1992年10月～1993年2月,从182头产犊前后的黑白花奶牛中筛选临床型酮病牛8头,亚临床酮病牛30头分别测定其血清中酮体(KB)、糖(Glu)、游离脂肪酸(FFA)、胆固醇(CT)、磷脂(Pho)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-CT)、谷草转氨酶(GOT)、乳酸脱氢酶(LDH)、胰岛素(Ins)、胰高血糖素(Glucagon)等。结果表明,酮病牛脂肪动员呈单峰规律,动员盛期延长。临床型酮病牛,主要表现高酮血和低血糖症并伴有肝功能障碍,GOT 和LDH 呈高值,分别为60±9.7u/L 和534.6±11.86u/L;CT、Pho、HDL-CT 值显著低于亚临床酮病牛。耐糖试验结果表明:临床...
关键词：
奶牛 临床型酮病 游离脂肪酸 脂肪动员
[期刊] 淡水渔业
[作者]
闫常春 闫玉莲 王汨 彭涛 岳南南 罗其勇 谢小军
采用流水式呼吸仪,测定了97尾大眼鳜(Siniperca kneri Garman)在不同温度条件下的静止代谢率(M),以检验温度与体重对该种鱼代谢水平的影响。结果表明,在15、20、25及30℃条件下大眼鳜的特定体重代谢率(M')分别为(74.06±6.24)、(135.24±18.27)、(186.19±29.03)、(196.78±34.31)mgO2/(kg.h)。在各温度条件下,大眼鳜的静止代谢率均与体重呈显著的双对数直线相关(P<0.01)。协方差分析表明,各回归方程的斜率(体重指数b)之间差异显著(P<0.01),且b值随温度的升高呈下降的趋势,提示体重和温度对大眼鳜静止代谢的影...
[期刊] 水产学报
[作者]
王桂香 李慷 刘如聪 姜之信 巴旭冰 宋宗诚 刘利平
星康吉鳗（Conger myriaster）是我国东海等近海常见鱼类，但随着过度捕捞和海洋环境的污染，星康吉鳗野生资源面临枯竭的风险，然而目前对于星康吉鳗繁殖的研究较少，缺乏星康吉鳗卵巢发育过程中的脂质需求的研究，因此本研究对人工诱导星康吉鳗卵巢发育组织脂质代谢进行了分析，以期为星康吉鳗人工繁殖提供理论基础。本研究使用超高效液相色谱四极杆轨道阱质谱（UHPLC/Q-Orbitrap MS）对人工诱导星康吉鳗卵巢发育不同时期肝脏、卵巢、肌肉和血浆进行了脂质组学分析，并测定了肝脏代谢酶活。通过对不同发育阶段星康吉鳗组织脂质成分分析，在肝脏、肌肉、卵巢和血浆中各鉴定出68、27、63和212种脂质标志物，主要包括磷脂酰丝氨酸（PS）、磷脂酰乙醇胺（PE）、磷脂酰胆碱（PC）、甘油三酯（TG）和鞘磷脂（SM）等。四种组织中TG、甘油二酯（DG）和神经酰胺（Cer）等脂类物质在发育过程中呈现出不同的变化趋势。肝脏代谢中，脂肪酸合成酶、肝脂酶和脂蛋白脂酶浓度呈现先升高后降低的过程，主要参与了TG、磷脂和脂肪酸的代谢。结果表明，星康吉鳗卵巢发育过程中主要组织的TG、磷脂发生了不同程度的变化，脂质代谢相关酶活性变化也与脂质代谢特征相对应。本实验初步探究了星康吉鳗卵巢发育过程中主要组织脂质调动情况，为星康吉鳗人工繁殖和可持续发展提供基础的参考。
关键词：
星康吉鳗 脂质转化 脂质组学 脂质代谢
[期刊] 华北农学报
[作者]
郑红飞 潘阳阳 刘鹏刚 彭秀梅 崔燕 余四九
为研究牦牛肿瘤抑制蛋白Tp53(TumorproteinTp53)的基因序列特征及其在牦牛卵巢中的表达情况,采集不同发情时期牦牛卵巢。根据黄牛的基因序列设计5′到3′端特异性引物,RTPCR扩增基因克隆得到Tp53基因,并对其基因结构等其他生物信息进行分析。采用RealtimePCR方法分析牦牛不同发情时期卵巢中Tp53基因的表达差异。结果显示:牦牛Tp53基因序列的编码区为1161bp,编码386个氨基酸。相似性与进化分析显示,与瘤牛Tp53基因的相似性最高,达到98.4%,与家猫的相似性最低,为80.7%,表明Tp53基因在进化中具有高度保守性;Realtime PCR检测结果显示,...
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