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[期刊] 海洋渔业
[作者]
唐鹏杰 吴雪 董婷婷 杨升平 郭锐华 马明 包春玲 包斌
以印度洋鸢乌贼(Symplectoteuthis oualaniensis)胴体分离蛋白为原料,基于分子量分布和营养价值分析,优化制备抗氧化肽的酶解工艺参数。碱溶酸沉法从鸢乌贼胴体提取分离蛋白;以底物浓度、酶底比、酶解时间等3个因素为单因素实验;Box-Behnken中心法则设计响应面实验;DPPH自由基清除率结合水解度为响应指标。鸢乌贼胴体分离蛋白相对分子量分布在30～240 kDa;必需氨基酸占总氨基酸42.56%;最佳酶解工艺参数是底物浓度4%、酶底比9 U·mg~(-1)、酶解时间4 h。5 mg·mL~(-1)的鸢乌贼胴体分离蛋白酶解物的DPPH自由基清除率为55.60%,羟自由基清除率为53.21%,ABTS自由基清除率为40.12%。鸢乌贼胴体分离蛋白符合FAO/WHO世界卫生组织提出的理想蛋白营养价值模式,鸢乌贼胴体能制备出营养价值高和抗氧化活性强的海洋功能蛋白肽。
关键词：
鸢乌贼 分离蛋白 响应面设计 抗氧化肽
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
张元元 汪之和 陈敏 施文正
本文研究了３种不同的蛋白酶（木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶）分别水解南极磷虾得到多肽的体外抗氧化活性，以清除超氧阴离子、羟自由基和ＤＰＰＨ的能力为指标。结果表明，木瓜蛋白酶水解制备的多肽抗氧化活性比较好，其次是碱性蛋白酶。用响应面法优化木瓜蛋白酶水解南极磷虾制备多肽的工艺参数，经凝胶电泳测定其分子量，显示该多肽有３个明显条带，其分子量大多位于３～７ ｋｕ。将上述多肽溶液脱氟后经超滤系统分离，按分子量（ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｗｅｉｇＨｔ，ｍｗ）大小分为ｍｗ≥１０ ｋｕ，５～１０ ｋｕ，ｍｗ≤５ ｋｕ的３种多肽，并比较其抗氧化活性的强度。在本实验体系浓度范围内，３种不同分子量的多肽对超氧阴离子、羟．．．
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
牛瑞 孙谧 于建生 郑媛 王海英
以扇贝裙边抗氧化肽为研究对象,制备纳米柔性脂质体,考察其主要影响因素。采用薄膜-超声分散法,以包封率为指标,分别考察卵磷脂与胆固醇的质量比、不同温度、不同样品浓度、不同pH值、不同转速、不同超声时间等对脂质体的影响,在此基础上采用L9(34)正交设计对条件进行优化。制得的纳米脂质体为单室脂质体,平均粒径为255±60nm,包封率为58.39%±0.34%,4℃下粒径稳定性无明显变化。因此,抗氧化肽脂质体包封率和稳定性较高,重现性好。
关键词：
抗氧化肽 脂质体 包封率
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
陈艳 吕春茂 韩金晶 刘璐 付沁璇 徐嘉一
为选出最佳的水解蛋白酶,选用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶3种蛋白酶水解榛子粕蛋白,研究单一蛋白酶和复合蛋白酶水解产物的水解度、DPPH自由基清除能力和氨基酸含量,对榛子粕抗氧化肽制备工艺进行优化,分析体外模拟消化前后榛子粕抗氧化肽DPPH自由基清除能力和氨基酸含量的变化。结果表明:木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶水解产物水解度分别为2.89%,6.26%,9.50%。1N复合蛋白酶水解产物、1A复合蛋白酶水解产物、2NA复合蛋白酶水解产物和2AN复合蛋白酶水解产物水解度分别为6.31%,7.20%
关键词：
榛子粕 蛋白酶 抗氧化肽 氨基酸
[期刊] 中国水产科学
[作者]
牛瑞 孙谧 于建生 郑媛 王海英
以扇贝(Chlamys farreri)裙边为研究对象,通过海洋碱性蛋白酶水解获得抗氧化肽。研究酶解温度、pH值、固液比、加酶量、酶解时间对酶解效果的影响。在单因素实验的基础上选取实验因素和水平,采用L16(45)正交试验,根据Box-Behnken设计原理采用三因素三水平的响应面分析法,对酶解条件进行优化研究。结果表明,最佳酶解条件为:固液比1:3.26(m/V),加酶量0.44%(W/V),温度31.20℃,pH值为9.0,酶解时间为1 h,羟自由基清除率为83.78%,与预测值的相对误差为0.29%,理论值与预测值基本一致,预测模型能较好地反映实际情况。本研究旨在为今后扇贝裙边蛋白的开发...
关键词：
扇贝裙边 抗氧化肽 酶解 响应面分析
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
胡润锋 李浚哲 李鹏飞 周军 李湘洲
【目的】优化硒化桑叶多糖的制备工艺，获得抗氧化活性更高的硒化桑叶多糖。【方法】以硒含量为指标，利用HNO_3-Na_2SeO_3法对桑叶多糖（MLP）进行硒化修饰制备硒化桑叶多糖（MLP-Se），单因素实验分别考察Na_2SeO_3与MLP的质量比、HNO_3体积分数、反应温度和反应时间对制备的MLP-Se中硒含量的影响，进一步利用响应面法优化MLP-Se的制备工艺。对MLP和MLP-Se进行扫描电镜-能谱（SEM-EDS）分析、凝胶色谱（GPC）分析、粒径和zeta电位分析、红外光谱（FT-IR）分析，探究硒化改性对桑叶多糖结构的影响，最后还研究了MLP和MLP-Se的体外抗氧化活性。【结果】制备MLP-Se的最佳工艺条件为反应时间7 h、反应温度85℃、HNO_3体积分数0.54%、Na_2SeO_3与MLP的质量比1.27，此条件下制备的MLP-Se中硒含量为3.147 mg·g~(-1)，建立的响应面模型可用于分析预测MLP-Se的制备；SEM-EDS分析表明硒化修饰改变了MLP的表观形貌且MLP-Se中存在硒元素；GPC分析表明MLP和MLP-Se的相对分子质量分别为2.099×10~3和2.385×10~3 k Da，硒化修饰增大了MLP的分子量；硒化修饰后桑叶多糖的粒径减小，zeta电位绝对值增大，硒化修饰提高了MLP在溶液体系中稳定性；FT-IR分析表明MLP已被成功硒化，且硒与多糖是通过C-O-Se和Se=O结合；体外抗氧化活性分析表明硒化修饰可以提高MLP的抗氧化能力，MLP-Se对DPPH自由基和ABTS自由基的IC_(50)值分别为0.883和0.681 mg·g~(-1)，明显低于MLP对DPPH自由基和ABTS自由基的IC_(50)值2.157和1.792 mg·g~(-1)(P<0.05）。【结论】硒化修饰可以改良MLP的理化性质，提高MLP的抗氧化能力，研究有利于桑叶多糖在功能性食品、保健品和药物等领域的开发利用。
[期刊] 海洋渔业
[作者]
胡昂 段蕊 刘志东 林娜 张俊杰 李磊 蒋玫
采用响应面法优化中性蛋白酶酶解海湾扇贝(Argopecten irradias)副产物蛋白制备抗氧化酶解物工艺。以DPPH自由基清除率和还原能力为响应值,在底物浓度、温度、时间、酶与底物比4个单因素实验基础上,优化确定3个显著性因素。获得实验条件下最佳制备工艺为:底物浓度25 mg·mL~(-1)、温度50℃、时间3.8 h、酶与底物比1.5%。在此条件下,实验验证酶解海湾扇贝副产物蛋白制备抗氧化酶解物的DPPH清除率为81.93%(预测值为83.19%),还原能力为58.12%(预测值为58.92%),DPPH自由基清除率和还原能力的IC_(50)值分别为0.264 mg·mL~(-1)和3.136 mg·mL~(-1),且表现出较强的抗氧化活性。研究表明,优化后的回归模型用于预测中性蛋白酶酶解海湾扇贝副产物蛋白制备抗氧化酶解物是可行的。
关键词：
海湾扇贝 副产物 抗氧化酶解物 响应面
[期刊] 中国农业科学
[作者]
陈思远 刘永祥 曹小舟 张逸婧 陈海娟 沈新春
【目的】探究能有效地从小麦胚芽清蛋白二步双酶酶解物中分离得到高活性抗氧化肽的工艺。【方法】以小麦胚芽清蛋白为原料，ＤＰＰＨ自由基清除率和Ｆｅ～（２＋）螯合能力为抗氧化活性的评价指标，通过胰蛋白酶进行酶解，依次采用超滤膜和凝胶过滤色谱（ＳｅＰＨａＤｅｘ Ｇ－７５）对酶解产物进行分离纯化，筛选出活性较高的组分；采用碱性蛋白酶对获得的活性较高组分进行酶解，通过凝胶过滤色谱（ＳｅＰＨａＤｅｘ Ｇ－１５）和反相高效液相色谱（ＲＰ－ＨＰＬＣ）分离纯化其酶解产物；采用质谱技术（ｅＳＩ－ＴＯＦ ＭＳ／ＭＳ）对抗氧化活性最高的组分进行结构鉴定。【结果】分离得到３个活性组分（峰）Ｐ＿ａ、Ｐ＿ｂ、Ｐ＿Ｃ，采用ＤＰＰ．．．
[期刊] 水产学报
[作者]
谭洪亮 郁迪 王斌 胡发远 马剑茵
为制备金枪鱼鱼骨胶原肽,并对其抗氧化活性进行研究,利用酶解、超滤、凝胶色谱和反相高效液相色谱制备抗氧化胶原肽,采用氨基酸序列分析仪测定其氨基酸序列,利用质谱(ESIMS)确定其分子量,采用羟自由基、DPPH自由基、ABTS自由基和超氧阴离子自由基清除实验和脂质过氧化抑制实验对胶原肽抗氧化能力进行评价。结果显示,金枪鱼鱼骨胶原蛋白经胃蛋白酶和胰蛋白酶2步酶解和分离纯化得到1个十肽(TFCH-P2),经氨基酸序列分析和质谱(ESIMS)确定其氨基酸序列为Gly-Pro-Ala-Gly-Pro-Ala-Gly-Glu-Gln-Gly(GPAGPAGQEG),分子量为839.87 u([M+H]+84...
关键词：
金枪鱼 鱼骨 多肽 抗氧化活性
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
宗绪岩 刘长江 李丽 刘玲
为了更好地了解和研究啤酒糟蛋白的酶水解特性,选取了4种微生物蛋白酶(Alcalase、Flavourzyme、Neutrase和Protamex)对啤酒糟蛋白进行水解试验,并监测反应过程中水解度的变化和中间产物的还原力改变。结果表明:Alcalase的水解啤酒糟蛋白能力最强,在水解接近3h时基本达到DHmax。水解度的变化同还原力的变化并不完全符合对应关系,在接近DHmax时,还原力的变化随着水解的进行波动很大,还原力的极值点也基本都出现在水解度曲线的拐点附近,说明抗氧化活力同水解度的变化并不完全符合对应关系。
关键词：
啤酒糟 蛋白 蛋白酶 水解度 还原力
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
孙骞 胡鑫 罗永康 刘昌蓉 白涛
为建立猪血红蛋白抗氧化活性肽的酶法制备工艺,采用6种食品级商业蛋白酶Alcalase 2.4L、胰蛋白酶、风味蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和AS1398中性蛋白酶在各自最适反应条件下分别酶解猪血红蛋白8 h,结果显示:采用AS1398中性蛋白酶获得的产物水解度最高,其酶解过程中第2小时获得的抗氧化活性肽(NDAPⅡ)还原力最高,较猪血红蛋白还原力高31.8%;AS1398中性蛋白酶的酶解条件为底物5%(质量分数),底物中含酶400U/g,温度45℃,pH 7.0。NDAPⅡ的还原力随浓度的增加基本呈线性增长趋势,虽然在低浓度下其还原力较阳性对照物BHT及VC弱,但在40 mg/mL质量浓度条件...
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
张翀 李致瑜 田玉庭 郑宝东
以大黄鱼为原料,采用不同蛋白酶(碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶和复合蛋白酶)分别水解鱼肉,制备抗氧化肽;研究不同酶的水解效果,筛选出最佳的水解用酶;采用单因素试验,以蛋白水解度及水解液的还原力和超氧阴离子自由基(O-·2)清除力为指标,研究不同水解p H、酶添加量、水解温度、底物浓度和水解时间对水解效果的影响;在此基础上,采用Box-Behnken响应面设计法,以水解液的还原力为评价指标,对水解工艺参数进行优化.结果表明,中性蛋白酶为水解大黄鱼的最适用酶,其最佳工艺条件为:底物浓度26.55%、水解温度46℃、水解时间7.2 h、p H 7.0、酶添加量2400 U·g...
关键词：
大黄鱼 水解 抗氧化能力 响应面优化
[期刊] 水产学报
[作者]
杨帆 栗丽 陈荫 王斌 王加斌
以孔鳐软骨为材料,采用盐酸胍抽提、丙酮分级沉淀,制备孔鳐软骨蛋白;以DPPH·和HO·清除活性为导向,采用胰蛋白酶酶解、膜超滤、DEAE-52阴离子交换层析、Sephadex G-15凝胶层析和反相高效液相色谱(RP-HPLC)等技术,制备抗氧化肽,并对其活性进行系统评价。结果显示,孔鳐软骨蛋白经胰蛋白酶酶解和分离纯化得到2个抗氧化肽RCPE-A和RCPE-B,经氨基酸序列分析确定其序列分别为Gly-Glu-Glu-Gly-ProArg-Gly (GEEGPRG)和Gly-Glu-Glu-Gly-Thr-Met-Gly-Leu (GEEGTMGL),质谱(ESI-MS)测定其分子量分别为700.71和792.87 u。体外自由基清除实验结果显示,RCPE-A与RCPE-B对DPPH·(EC50 2.94和1.16 mg/mL)、HO·(EC_(50) 0.34和0.54 mg/mL)、ABTS~+·(EC_(50) 0.34和0.10mg/mL)和O_2~-·(EC_(50) 0.11和0.03 mg/mL)具有良好的清除作用,RCPE-A与RCPE-B亦显示出较强的脂质过氧化抑制作用。研究表明,孔鳐软骨蛋白酶解物及制备多肽可用于抗氧化相关的功能食品开发,也可以用作抗氧化剂延长相关产品的货架期。
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
李芙蓉 施文正 李燕
采用复合蛋白酶酶解南极磷虾得到虾粉多肽,经超滤分离和高速逆流色谱技术进行分离纯化并检验其体外抗氧化活性。结果表明:经超滤分离后的多肽在分子量范围为5～10 ku时多肽抗氧化活性最好,当浓度为10 mg/m L时,其超氧阴离子自由基清除率达到21. 28%,DPPH自由基清除率为86. 52%,对羟基自由基清除率为53. 49%,Fe~(2+)螯合率为85. 35%。对分子量范围在5～10 ku的多肽进行高速逆流色谱分析,采用体积比为氯仿∶丁醇∶甲醇∶水=4∶0. 75∶3∶2作为两相溶剂体系,下相作固定相,上相作流动相;反转,转速900 r/min,恒温水浴温度为25℃,在流动相的流速1. 5 m L/min,进样浓度20 mg/m L的条件下分离得到5个组分。经测定:当浓度为5 mg/m L时,P3组分清除超氧阴离子自由基的能力和Fe~(2+)螯合能力均显著高于其余4个组分,分别为37. 18%和92. 33%,P2组分的DPPH自由基清除率最高,为90. 33%,P5组分的羟基自由基清除率最高,为70. 11%。与未经HSCCC分离的对照组相比,抗氧化活性均得到明显增强。
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
周杏子 王子娜 曾红胜 夏尔东 陈林 任迪峰 鲁军
核桃粕作为核桃油加工的副产物,含有丰富的蛋白质、脂肪和维生素等营养物质。通过对核桃粕的预处理、菌种驯化、稳定性研究以及发酵工艺的优化,确定核桃粕乳酸菌发酵乳的最优制备工艺,并通过体外试验确定其抗氧化活性。结果表明:核桃粕预处理适宜料液的体积比为1∶10,打浆温度为80℃,蔗糖酯添加量为0.3%;乳酸菌经渐进驯化法驯化培养后,产酸量比驯化前提高了50%,活菌数比驯化前提高约17倍;核桃乳在115℃、15 min的杀菌条件下稳定性较高,为最适杀菌条件;相对于羧甲基纤维素钠和卡拉胶,蔗糖酯对核桃乳具有很好的稳定作用,其适宜添加量为0.3%;核桃乳发酵的最优接种量为3%,发酵温度37℃,发酵时间10 ...
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