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[期刊] 中国农业科学
[作者]
赵青 郭仰东 谢华 马荣才 姚磊
【目的】通过构建能够在植物生长发育阶段经乙醇诱导将选择标记基因删除的载体,消除选择标记基因带来的潜在安全隐患。【方法】利用AlcR/alcA诱导系统和Cre/loxP位点特异性重组系统删除选择标记基因。当外源诱导物乙醇存在时,激活下游Cre的表达。Cre重组酶识别2个同向loxP位点,剔除位点之间的DNA片段,包括选择标记基因、AlcR/alcA系统和Cre/loxP系统,而目的基因gus在诱导前后均为组成型表达。【结果】拟南芥转基因植株受乙醇诱导严格控制Cre表达的"开"和"关"。经诱导的转基因植株不能在选择培养基上继续生长。分子生物学检测显示,2个同向loxP位点间序列均已删除,表明标记基...
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
贾香楠 李伟 沈俊岭 欧阳昆唏 陈晓阳
利用一套基于Cre/loxP重组系统的植物多基因表达载体系统将苏云杆菌毒蛋白基因(BtCryIAc)、甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH)、GA20氧化酶基因(pttGA20ox)和rolB基因构建于植物表达载体pYL1305上,命名为pYL1305BBGR。采用农杆菌介导的叶盘法转化烟草,经PCR和Southern blot检测发现,多基因已成功转入烟草基因组中;经半定量RT-PCR检测证实,4个基因均能正常表达。
[期刊] 图书馆建设
[作者]
张士男
知识组织体系的内容只有不断地调整和更新,才能准确反映知识的科学发展,及时删除"过时"术语能够使知识组织体系更加准确地揭示领域知识。不同知识组织体系在术语删除机制、术语删除原因、术语删除处理方式方面存在差异,但本质都是为了保持一致性,反映科学知识的最新进展。术语删除是检查知识组织体系质量的一种方式,因此要建立完善的术语删除机制,明确术语删除的原则,根据术语删除原因采取不同的处理方式。
关键词：
知识组织体系 叙词表 术语删除
[期刊] 华北农学报
[作者]
黄冰艳 苗利娟 张新友 严玫 翁海波 易明林 陈占宽
将Napin启动子与含花生FAD2基因反向重复片段的RNA干扰结构连接,亚克隆至含雌激素诱导重组系统的植物表达载体pNCX相应位点中,构建完成由Napin启动子驱动的FAD2RNAi删除筛选标记表达载体pNCX-FAD2RNAi,经酶切鉴定,获得相应的启动子片段、FAD2RNAi片段及NCX-FAD2RNAi片段。利用农杆菌介导法进行遗传转化,已获得抗性丛生芽214丛。
[期刊] 华北农学报
[作者]
张怡 徐克东 杨松 李豪 曹鹏 魏森 韦丹丹 李成伟
构建蔊菜的病毒诱导基因沉默(Virus induced gene silencing,VIGS)体系,旨在建立蔊菜的快速基因功能验证的方法。通过RT-PCR扩增出棉花、大豆、拟南芥的1-脱氧木酮糖-5-磷酸合成酶(Cloroplasto alterados,CLA)基因片段,并将其分别构建到烟草脆裂病毒(Tobacco rattle virus,TRV)介导的VIGS载体,通过农杆菌GV3101侵染蔊菜并观察蔊菜的表型变化。结果显示,3种不同的CLA基因所侵染的蔊菜均出现不同程度的白化现象,半定量RT-PCR检测显示CLA的mRNA被显著降解,表明成功构建了蔊菜的VIGS体系。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
李萌晗 王威 邹积鑫 李东栋
为开展油棕油脂代谢调控相关基因鉴定研究，以油棕八氢番茄红素脱氢酶基因（phytoene desaturase gene,PDS）作为报告基因，探索以病毒载体TRV为载体在油棕胚状体上应用病毒诱导基因沉默（virus-induced gene silencing,VIGS）的可能性，并对油棕胚状体VIGS体系的相关参数进行优化。结果显示：以EHA105为菌种、侵染菌液OD600=0.5、侵染时间5 min、乙酰丁香酮（AS）质量浓度20 mg/L、共培养48 h、侵染后培养时间为12 d能取得最佳的基因沉默效果。在此基础上，利用优化后的VIGS体系对油棕二酰甘油酰基转移酶基因（diacylglycerol acyltransferase gene,DGAT）进行沉默，取得了预期的基因沉默效果。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
李萌晗 王威 邹积鑫 李东栋
以油棕八氢番茄红素脱氢酶基因（phytoene desaturase gene,PDS）作为报告基因，探索以病毒载体TRV为载体在油棕胚状体上应用病毒诱导基因沉默（virus-induced gene silencing,VIGS）的可能性，并对油棕胚状体VIGS体系的相关参数进行优化。结果显示：以EHA105为菌种、侵染菌液OD600=0.5、侵染时间5 min、乙酰丁香酮（AS）质量浓度20 mg/L、共培养48 h、侵染后培养时间为12 d能取得最佳的基因沉默效果。在此基础上，利用优化后的VIGS体系对油棕二酰甘油酰基转移酶基因（diacylglycerol acyltransferase gene,DGAT）进行沉默，取得了预期的基因沉默效果。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
董永鑫 卫其巍 洪浩 黄莹 赵延晓 冯明峰 窦道龙 徐毅 陶小荣
【目的】在中国大豆品种上建立以苹果潜隐球形病毒（apple latent spherical virus,ALSV）为载体的基因沉默体系，为中国大豆品种的基因功能和遗传育种提供一种简便、省时、易操作的技术体系。【方法】构建以农杆菌介导接种的ALSV病毒侵染性克隆载体。从大豆品种威廉姆斯82(Williams 82)中特异扩增327 bp的八氢番茄红素脱氢酶（GmPDS）基因cDNA片段，插入病毒载体pALSV2。通过农杆菌浸润法将病毒载体导入模式植物本氏烟（Nicotiana benthamiana）,17 d后富集病毒粒子，摩擦接种大豆第一轮真叶，以接种病毒空载作为对照组，持续观察测试大豆植株系统叶表型，并结合逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）或荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ALSV衣壳蛋白基因（CP）和GmPDS的表达水平。【结果】ALSV﹕GmPDS接种大豆品种威廉姆斯82和南农1138-2,20 d后，前者系统叶未见白化表型，而后者系统叶出现明显的白化表型；qRT-PCR检测结果表明，发生白化的南农1138-2植株中GmPDS的表达水平显著降低，未出现白化表型的威廉姆斯82中GmPDS的表达水平没有出现显著变化。在此基础上，采用相同的方法，测试了ALSV在其他9种大豆品种中诱导GmPDS的沉默效率，发现在南农47、安豆203、祥斗4号、中黄13、山宁29、齐黄34等大豆品种上接种ALSV﹕GmPDS后植株系统叶均产生白化表型，而菏豆12、中黄311和山宁16等3个品种的GmPDS均不能诱导有效沉默。【结论】构建了农杆菌介导的ALSV病毒载体，利用本氏烟扩繁富集ALSV病毒，将提纯的病毒粒体摩擦接种大豆真叶，在多个中国大豆品种上成功建立了基因沉默体系。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
王征 伍江波 刘雪梅 金晓玲
【目的】研究在BA、NAA、IBA、2,4-D等激素作用下,杜仲愈伤组织诱导、愈伤组织诱导丛生芽及丛生芽诱导生根各阶段的最佳培养基配方,建立杜仲植株再生体系,为杜仲转基因研究提供基础材料。【方法】以杜仲成熟胚、幼嫩胚、叶片和茎段为外植体,使用BA、NAA、IBA、2,4-D等激素,配制成不同质量浓度的培养基,进行杜仲愈伤组织诱导,同时分析愈伤组织诱导丛生芽和丛生芽诱导生根培养基的最佳配方,建立杜仲植株的再生体系。【结果】杜仲愈伤组织诱导的培养基分别为:成熟胚MS+BA 2.0mg/L+NAA 2.5mg/L,诱导率77.8%;幼嫩胚MS+BA 0.5mg/L+2,4-D 2.0mg/L,诱导率...
关键词：
杜仲 成熟胚 继代周期 不定芽 愈伤组织
[期刊] 物流技术
[作者]
赵欣 陈珊珊
以协助应急车辆通行为目的，从交叉口信号优先控制与路径诱导两方面进行统一考虑，建立了基于多智能体系统（Ｍｕｌｔｉ－Ａｇｅｎｔ ＳｙＳｔｅＭ，ＭＡＳ）的应急车辆路径诱导策略。应用相位智能体和管理智能体实现应急车辆在交叉口的信号优先权，在路段上提出了车载智能体和路段智能体，与交叉口两智能体相协同，并以改进的ＤｉｊｋＳｔｒＡ算法为决策算法，共同完成应急车辆路径诱导过程。最后通过ＳｔＡｒｌｏｇｏ软件并借助ＭＡｔｌＡｂ完成了对应急车辆诱导过程的验证。仿真结果证明了该方法的有效性。
[期刊] 华北农学报
[作者]
杨志如 云锦凤 魏建华 徐春波
为研究冷诱导转录因子CBF1(C-repeat-binding-factor)基因对我国优良豆科牧草——苜蓿的抗寒性的改良作用,试验从拟南芥(Arabidopsis thaliana)中利用PCR方法分离了CBF1基因及其启动子,分别构建了CaMV 35S启动子和来源于拟南芥的CBF1启动子驱动的农杆菌介导的植物转化表达载体,为下一步研究利用CBF1基因改良苜蓿抗逆性奠定了基础。
[期刊] 林业科学
[作者]
贾小明 张焕玲 樊军锋
为实现杨树早期开花,缩短育种周期,利用农杆菌介导的转化方法,探讨影响热激启动子控制的FT1基因转化白杨派杂种无性系的因素,优化其转化条件,并实现FT1基因的转化,采用热激诱导方法诱导2～3个月大的转基因植株早期开花。结果表明:叶盘转化前的预培养、菌液浓度、侵染时间及共培养时间对卡那霉素抗性植株再生率的影响均达到极显著水平;叶盘在愈伤组织诱导培养基上暗培养6天,然后用活化至OD600=0.5的菌液侵染60min,再在愈伤组织诱导培养基上共培养2天,该条件下FT1基因转化白杨派杂种的卡那霉素抗性植株再生率可达29.84%;37℃每天1h持续热激3周可使FT1基因顺利表达,促进转基因植株开花;热激植...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
张国裕 程智慧 李娟 周文安 王新华
以"二细一粗"银条茎尖、叶片、茎段组织为外植体,研究了不同激素配比对其不定芽诱导与增殖效果的影响。结果表明,银条叶片组织未能再生;茎尖、茎段组织直接诱导较大不定芽的再生率较低,平均每个外植体最多可诱导不定芽5～7个。而通过茎段先诱导出不定芽芽团,再进行芽的伸长这一途径,每个外植体诱导的不定芽数平均可提高到14.3个,且芽团经5次继代后,增殖再生能力无衰退表现,且再生植株生产潜力非常巨大,是一条较优的再生途径。茎段不定芽芽团诱导培养基以添加6-BA5.0mg/L的MS培养基效果较好;增殖培养基以MS+6-BA4.5mg/L+GA31.0mg/L效果较好;不定芽伸长培养基以MS+6-BA1.5m...
关键词：
银条 组织培养 不定芽诱导 增殖体系
[期刊] 财会月刊
[作者]
李国红
本文基于microsoft visual FoxPro 6.0软件环境,简要阐述了会计科目删除处理的基本思路。具体分析与讨论了科目删除操作界面及相应的VFP表单设计,论述了会计科目数据删除处理的过程和实现方法,提供了实现会计科目数据删除功能的VFP程序代码。
[期刊] 国际贸易问题
[作者]
栾信杰
在关贸总协定(GATT)乌拉圭回合多边贸易谈判的最后阶段,作为该回合《反倾销协议》最后文本的邓克尔草案中的反规避条款却被删除了,因此反规避条款被排除在最终达成的《关于实施〈关税与贸易总协定1994〉第六条的协议》的内容范围之外。之所以会出现这样的结果,主要的原因就是邓克尔草案中的反规避条款与美国在乌拉圭回合谈判期间所提交的反规避议案有明显的差别,远
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