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[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
刘玉皎 杨菁 崔志松
蚕豆是高蛋白含酚类物质较多的作物,为了提取适于蚕豆AFLP分析的高质量的DNA,采用改良CTAB法,以β-巯基乙醇和PVP抗氧化剂浓度为因素进行了试验,通过紫外分光光度计和0.8%琼脂糖凝胶电泳检测的结果表明,用改良的CTAT法提取蚕豆DNA的质量较好,纯度高λ=260nm/280nm的平均OD值为1.923,变幅为1.81～2.08.绝大多数集中在1.9左右,而且0.8%琼脂糖电泳检测的谱带比较清晰,其中1%的β-巯基乙醇和2%的PVP的λ=260nm/280nm平均OD值为1.86,电泳谱带最清晰,说明这个组合提取的DNA质量最好,最适于AFLP技术的要求.
[期刊] 华北农学报
[作者]
张伟 谢甫绨 宋显军 曹萍 郭玉华
为了探寻大豆干种子中的DNA快速提取方法,以2个大豆品种的干种子为材料,在SDS提取液中加入蛋白酶K、NP-40、Tween-20情况下,并减少氯仿/异戊醇的抽提次数,研究对提取DNA质量的影响。结果表明,SDS提取液中加入3种试剂后,即使使用氯仿/异戊醇抽提1次,其DNA的OD260/OD280值也在1.8~2.0之间,能够满足SSR扩增模板的需求。说明此方法既可获得较高纯度的DNA,又可大大缩短大豆干种子中的DNA提取时间。
关键词：
大豆 DNA提取 SDS SSR
[期刊] 华北农学报
[作者]
杨清 苏光荣 韩蕾 王正良 孙启祥 彭镇华
用改进的CTAB法,在提取液中加入2%PVP(V/V)和2%β-巯基乙醇,提取到了高质量的基因组DNA,OD260/OD280在1.7～1.9之间,蛋白质、多酚类、色素、RNA等去除较彻底,适于AFLP分析。通过对版纳甜龙竹DNA提取、酶切连接、预扩增、选择性扩增等试验过程中各关键因素的比较研究,建立了优化的AFLP分子标记体系,得到了清晰的AFLP银染指纹图谱,试验结果重复性好。从64对MseI和PstI引物中筛选出8对扩增效果好的引物,利用筛选出8对引物对30份材料进行分析,共扩增出256条多态性带,获得32490个扩增位点,有13289个位点具有多态性,平均每对引物获得4061.25个扩...
[期刊] 林业科学研究
[作者]
赵敏 冯颖 和锐 陈晓鸣 冀焕红
采用CTAB法、改进SDS-蛋白酶K法、SDS-饱和氯化钠法和提取试剂盒对喙尾琵甲的肌肉、虫卵和幼虫进行DNA提取,比较了DNA的提取和保存质量,并对AFLP试验的酶切时间、预扩增产物稀释倍数和选择性扩增引物量等关键因子进行试验和优化。结果表明:4种方法对肌肉组织提取的DNA质量都较好;3种传统方法提取的DNA的保存时间长于试剂盒提取的DNA;使用EcoRⅠ/M seⅠ内切酶组合,10 UEcoRⅠ和2 UM seⅠ分两步各酶切2 h,T4连接酶3 h连接后,以20倍稀释的预扩增产物和5 ng/35 ng的E+3/M+3引物量进行选择性扩增,建立了喙尾琵甲AFLP分子标记体系。
[期刊] 林业科学研究
[作者]
周贝贝 陈凌娜 张俊佩 裴东
核桃(Juglans regia L.)营养价值高,含有丰富的脂肪酸和蛋白质[1],子叶是核桃重要的营养储存器官,作为常用的实验材料,可用来组织培养进行生根实验等相关研究[2-3]。MSAP是在AFLP基础上建立起来的在全基因组范围检测5’-CCGG位点的胞嘧啶甲基化变化的实验技术[4],具有多态性高、无需预知DNA序列的优点,但其需要提取高质量的基因组DNA,存在于DNA中的多糖等杂质会对酶切等
关键词：
核桃 子叶 DNA提取 多糖 MSAP
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
沙爱华 张端品
用水稻、玉米、棉花和油菜的干种子作材料进行了分离DNA的试验。试验结果表明,从4种作物的干种子中都能分离到质量较好的DNA,得到的DNA可以用于RAPD和SSR分析。这一方法最显著的特点是充分利用了DNA分离的原理,只保留了细胞裂解、DNA沉淀和溶解等关键步骤,而省略了一些诸如去除蛋白质及有机物的中间步骤,因而具有简便、快速等优点,特别适合于一些需要快速得到研究结果的分析,如种子纯度鉴定、分子标记辅助选择等。
关键词：
种子 DNA提取 RAPD SSR
[期刊] 华北农学报
[作者]
王铁固 陈彦惠 吴连成 库丽霞 侯本军
以金皇后玉米群体90个单株DNA和6个自交系DNA为供试材料,利用15对SSR引物,比较了同一群体 4种DNA样品处理(单株DNA样品、3个单株混合DNA样品、10个单株混合DNA样品、15个单株混合DNA样品) 的SSR遗传多态性。结果表明,利用单株DNA样品能获得等位基因数、基因频率、基因型杂合度等较全面的遗传信 息,适宜进行单个或少量群体的遗传结构研究,但试验工作量大;利用混合DNA样品所能获得的遗传信息有所减少, 比较4种DNA样品处理的检测结果发现,15个单株混合样品的检测结果误差较大,而采用3-10个单株DNA混合 的样品基本可以反映出一个群体的等位基因数目和SSR带型的差异,由于...
关键词：
SSR 玉米 群体 遗传多样性
[期刊] 华北农学报
[作者]
刘殿林 杨瑞环 哈玉洁
采用SDS法、尿素法、改良SDS法、氯化苄法和CTAB法对黄瓜的基因组DNA进行提取。结果表明,改良SDS法提取的黄瓜叶片DNA具有典型的天然DNA分子的标准紫外吸收光谱特点,其A260/A280在1 7～1 9之间,DNA的产量为450μg/g。用该法提取的黄瓜DNA适合进行RAPD分析。
关键词：
黄瓜 DNA提取方法 RAPD分析
[期刊] 世界农业
[作者]
周俊玲 张蕙杰
本文分析了世界蚕豆的生产及贸易形势和贸易格局。世界蚕豆种植主要集中在亚洲和非洲。近３０多年来，世界蚕豆的收获面积和总产量均呈下降态势，但世界蚕豆平均单产明显有所提高。世界蚕豆的主要生产国有：中国、埃塞俄比亚、澳大利亚、法国和摩洛哥等。蚕豆的世界贸易近３０多年来在波动中缓慢增长，平均贸易价格总体上涨。世界蚕豆的主要出口国是澳大利亚、法国、英国、埃塞俄比亚和中国等，主要进口国是埃及、挪威、印度尼西亚、阿拉伯联合酋长国、意大利等。
关键词：
蚕豆 世界生产 国际贸易
[期刊] 西南农业学报
[作者]
刘玉玲 张红岩 韩雪梅 周仙莉 侯万伟
【目的】寻找与蚕豆主要农艺性状紧密连锁的分子标记，挖掘农艺性状的优异等位变异与种质。【方法】以321份蚕豆种质为供试材料，调查其初荚高度、初荚节位、成荚节数、生殖节数、有效籽粒数、有效分枝、有效荚数、单荚粒数、荚长、荚宽、籽粒面积、籽粒厚、籽粒周长、籽粒长、籽粒宽、株高及百粒重。利用具有显著多态性的76对SSR标记进行基因分型，在分析群体结构的基础上，采用Tassel 2.1软件的GLM和MLM两种模型对上述17种农艺性状进行关联分析。【结果】表型性状的变异系数变幅为10.06%～51.64%，平均值为25.07%，表明供试群体具有较为丰富的表型多样性。76个标记在321份蚕豆中共检测到389个多态性位点，各位点的平均等位基因数为5.12个，变异范围为2～11个；多态性信息量（PIC）值为0.1903～0.7766，平均为0.5156，表明所选用的标记多态性较高。利用Structure 2.3.4进行群体遗传结构分析，可将321份供试材料划分为2个亚群，表明该群体结构相对单一，有利于关联分析。基于GLM模型，共检测到11个与12种农艺性状极显著（P＜0.01）关联的标记，单个标记对表型变异的解释率为0.0393～0.1101；基于MLM模型，共检测到8个与8种农艺性状极显著（P＜0.01）关联的标记，单个标记对表型变异的解释率为0.0291～0.0897。最后，基于MLM模型分析结果中极显著（P＜0.01）关联位点各等位变异的表型效应，共发掘出7个分别对成荚节数、单荚粒数、有效荚数、有效籽粒数、株高、籽粒厚、籽粒长和籽粒周长增效潜力最大的优异等位变异，并由此筛选出7份优良种质。【结论】通过关联分析挖掘了多个与蚕豆农艺性状关联的分子标记位以及优异种质，为蚕豆分子标记辅助选择育种以及亲本材料的选配奠定了理论基础。
关键词：
蚕豆 SSR标记 农艺性状 关联分析
[期刊] 西南农业学报
[作者]
刘玉玲 张红岩 韩雪梅 周仙莉 侯万伟
【目的】寻找与蚕豆主要农艺性状紧密连锁的分子标记，挖掘农艺性状的优异等位变异与种质。【方法】以321份蚕豆种质为供试材料，调查其初荚高度、初荚节位、成荚节数、生殖节数、有效籽粒数、有效分枝、有效荚数、单荚粒数、荚长、荚宽、籽粒面积、籽粒厚、籽粒周长、籽粒长、籽粒宽、株高及百粒重。利用具有显著多态性的76对SSR标记进行基因分型，在分析群体结构的基础上，采用Tassel 2.1软件的GLM和MLM两种模型对上述17种农艺性状进行关联分析。【结果】表型性状的变异系数变幅为10.06%～51.64%，平均值为25.07%，表明供试群体具有较为丰富的表型多样性。76个标记在321份蚕豆中共检测到389个多态性位点，各位点的平均等位基因数为5.12个，变异范围为2～11个；多态性信息量（PIC）值为0.1903～0.7766，平均为0.5156，表明所选用的标记多态性较高。利用Structure 2.3.4进行群体遗传结构分析，可将321份供试材料划分为2个亚群，表明该群体结构相对单一，有利于关联分析。基于GLM模型，共检测到11个与12种农艺性状极显著（P＜0.01）关联的标记，单个标记对表型变异的解释率为0.0393～0.1101；基于MLM模型，共检测到8个与8种农艺性状极显著（P＜0.01）关联的标记，单个标记对表型变异的解释率为0.0291～0.0897。最后，基于MLM模型分析结果中极显著（P＜0.01）关联位点各等位变异的表型效应，共发掘出6个分别对成荚节数、单荚粒数、有效荚数、有效籽粒数、株高、籽粒厚、籽粒长和籽粒周长增效潜力最大的优异等位变异，并由此筛选出6份优良种质。【结论】通过关联分析挖掘了多个与蚕豆农艺性状关联的分子标记位以及优异种质，为蚕豆分子标记辅助选择育种以及亲本材料的选配奠定了理论基础。
关键词：
蚕豆 SSR标记 农艺性状 关联分析
[期刊] 开发研究
[作者]
白淑萍
春蚕豆的生态位适宜度和生产潜力分析白淑萍蚕豆（Ｖｉｃｉａｆａｂａｌ）是主要的食用豆类作物之一。其籽粒营养物质丰富，蛋白质含量高达２８．２％（仅次于大豆），是一种重要的植物蛋白资源。我国是世界上蚕豆栽培面积最大，总产量最高的国家，而甘肃又是我国蚕豆的主...
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
明军 张启翔
该文使用AFLP标记法技术 ,以半同胞家系的‘早凝馨’、‘凝馨’ ,全同胞家系选育出的品种‘美人’梅、‘小美人’、‘俏美人’、‘黑美人’和朱砂型相近梅花品种‘徽州骨红’、‘舞朱砂’、‘小骨里红’共计 9个品种为样本 ,选用 7对引物组合E ACT M CAT、E GA M CTC、E ACT M CCA、E ACT M CAC、E ACT M CAG、E ACC M CAG和E ACT M CTC扩增得到 2 97个多态性位点的条带数据 ,分别选用简单匹配系数和Nei(72 )遗传距离系数 ,进行不加权成对算术平均法聚类分析 ,分别建立了聚类树 .分析结果表明 :...
关键词：
梅 AFLP DNA指纹 品种鉴定 家系
[期刊] 林业科学研究
[作者]
尤勇 洪菊生
杉木ＤＮＡ的简便提取方法＊尤勇洪菊生关键词杉木针叶ＤＮＡ巯基乙醇次生物质杉木（Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍｉａｌａｎｃｅｏｌａｔａ（Ｌａｍｂ）Ｈｏｏｋ．）是我国的特有树种，其分子生物学研究目前在国内外开展的较少，其近缘种的研究也较少。为了开展杉木分子生物学的...
关键词：
杉木针叶,DNA,巯基乙醇,次生物质
[期刊] 上海水产大学学报
[作者]
韩静 余舜武 罗利军
简单、高效的抽提DNA是进行分子生物学研究的基础。选取三种不同海藻纲中的条斑紫菜、条浒苔、钝顶螺旋藻为材料,通过采用改良的CTAB法、LiCl法及试剂盒法抽提基因组DNA并进行比较,以找出适用于各种藻类DNA提取的快速有效方法。结果表明适当提高裂解液与样品比能有效降低材料中多糖与蛋白质、酚类等杂质,提高DNA纯度和得率。经过修改后,三种方法都能有效抽提DNA,其中试剂盒法省时,所得到的DNA纯度最高,但得率较低且成本高。CTAB法与LiCl法也均能得到高质量的DNA,但LiCl法相对而言更简捷有效。此外,抽提前的材料预处理对DNA质量有明显影响。
关键词：
海藻 DNA提取 LiCl法
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