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[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
刘金彤 蒲虹辰 叶林瑶 莫艳阳 杨红
[目的]本文旨在构建磁性纳米探针并将其应用于莠去津残留的荧光检测。[方法]通过共沉淀法合成磁性纳米材料;合成莠去津适配体及荧光素标记DNA单链形成的非完全互补DNA双链,并将其修饰于磁性材料之上,构建特异性检测莠去津残留的功能化荧光磁性探针;利用紫外、透射电镜等技术对探针进行表征分析;利用凝胶电泳技术,分析目标物莠去津与探针负载的适配体特异性结合后,释放荧光素标记DNA单链、解除材料对荧光淬灭从而恢复荧光的机制;运用荧光光谱技术,构建基于荧光信号强度变化的莠去津残留灵敏定量方法。[结果]本研究开发的荧光检测莠去津残留方法在0.01～20μg·mL~(-1)具有良好的线性关系,相关系数(R~2)可达0.998,检测限为8.17μg·L~(-1),相比于其他农药,探针对莠去津具有较高的特异选择性及抗离子干扰能力。在稻田水添加浓度范围中,莠去津的平均添加回收率为95.48%～102.03%,相对标准偏差(RSD)为2.17%～3.14%;稻田土中莠去津的加标回收率为94.79%～100.66%,RSD为3.40%～4.72%。[结论]本研究建立的基于磁性纳米探针的莠去津残留荧光定量方法简单、高效,其灵敏度和准确度均符合环境中农药残留分析要求。
关键词：
莠去津 荧光传感 磁性材料 纳米探针
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
魏松红 东琴 逄若霖 王凯莉 芈越瑶 张彤
在制备多克隆抗体的基础上,研制用于检测莠去津残留的间接竞争ELISA试剂盒。结果表明:莠去津抑制率回归曲线为y=19.762x+5.6026,相关系数R2=0.981,线性检测范围为1~5000μg·L-1,最低检测限为5.35μg·L-1,IC50为176.44μg·L-1。莠去津多克隆抗体的交叉反应率小于20%,莠去津试剂盒的添加回收率均高于75%,供试样品检测结果的批内和批间变异系数均低于10%。试剂盒在4℃或-20℃下贮存270d仍有效。
关键词：
莠去津 残留 酶联免疫吸附分析 试剂盒
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
温聪颖 杜正坤 吴玲玲
设计了"磁性荧光纳米球的制备及其对细胞的识别和捕获"综合研究型实验。通过将磁性纳米颗粒和量子点包埋进高分子球内部制得磁性荧光纳米球,进一步通过生物修饰在纳米球表面引入能特异性识别肿瘤细胞的靶向分子,从而实现对肿瘤细胞的识别和捕获。实验内容丰富,操作简便,涉及到化学制备、生物偶联、识别捕获等操作,荧光、磁性、形貌等表征技术以及生物化学实验中常见仪器的使用,能够全方位培养学生的实验技能、科研素养和创新精神。
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
陈溪 崔晗 董振霖 刘佳成 尚宝玉 那晗 张丽荣 纪明山
由于大米农残检测需求及检测项目的不断扩增,建立高效、可靠的多农残分析方法具有重要意义。为了建立一种全自动在线定量浓缩净化色谱(GPC)-液相色谱-三重四级杆线性离子阱质谱(LC-Q-TRAP/MS)法测定大米中193种农药残留量,将大米样品经乙腈超声提取,GPC全自动在线定量浓缩净化,由三重四级杆线性离子阱质谱仪定性及定量检测。试验结果表明:方法的线性关系良好,相关系数R均大于0.9904,检出限(LOD)为5μg·kg-1,定量限(LOQ)为10μg·kg-1;193种农药在添加水平为5μg·kg-1时的平均回收率范围为66.2%~124.3%,相对标准偏差(RSD)范围为3.4%~17.8...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
许朝用 刘琳 傅艺颖 白艳丽 梁建功 陈璐
在合成牛血清白蛋白（ＢＳＡ）修饰的金纳米团簇（金簇）的基础上，将荧光素异硫氰酸酯（ＦＩＴＣ）与金簇偶联，构建一种新型比率型ｐ Ｈ荧光探针。当体系ｐ Ｈ值在４．０～１０．０之间变化时，ＦＩＴＣ的荧光强度逐渐增加，而金簇的荧光强度基本保持不变。在ｐ Ｈ为５．５～８．０之间，该探针对于ｐ Ｈ具有良好的线性关系，线性方程为Ｙ＝１．７２Ｘ－８．８，相对标准偏差为０．９９４，同时该探针在ｐ Ｈ为６．０～９．０之间还具有良好的可逆性。此外，将此ｐ Ｈ荧光探针与ｐＫ１５细胞共培养，通过ＭＴＴ实验证明该比率型ｐ Ｈ荧光探针对细胞几乎没有毒性。
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
赵思思 张新宇 曲宏宇 周思彤 闫可雨 孙晶晶 袁嘉敏 张航
实验通过紫外吸收与荧光光谱法研究了AIE型荧光探针四苯基-1,3-丁二烯对Fe~(3+)检测的选择性和灵敏度，对仪器分析实验中的荧光光谱法进行了探究与改进，属于设计性实验。该实验具有条件简单温和、荧光现象明显、重复性好、可操作性强等特点。根据课程需要和学生层次，采用阶梯式、模块化方式设置了实验教学内容，旨在通过过程化学习，强化学生的基础实验操作能力及自主学习能力，使科研、教学、趣味三者相互融合。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
李林霞 崔耀文 沈建忠 冯培生 吴海霞 程林丽 张素霞
为方便检测猪肉中莫西克汀残留量,建立了高效液相色谱-荧光检测方法(HPLC-FLD)。样品采用乙腈提取,加水稀释,用三乙胺调节pH,C18固相萃取柱净化,加三氟乙酸酐和N-甲基咪唑衍生化。以乙腈/水为流动相,高效液相色谱-荧光检测法测定,选择激发波长为365nm,发射波长为475nm。在0.01～1.00μg/mL质量浓度范围内,莫西克汀的色谱峰面积与浓度呈线性相关,相关系数大于0.99;添加量为5、50和250ng/g时,平均添加回收率为92.16%～99.39%;日内变异系数为2.8%～4.1%(n=5),日间变异系数为6.4%～8.5%(n=3)。本方法的检测限为2ng/g,定量限为5n...
[期刊] 林业科学
[作者]
王明旭 朱水芳 罗宽 周李华 赵文军
以松材线虫rDNA -ITS2为靶区 ,建立松材线虫的TaqMan探针实时荧光PCR检测方法。对松材线虫大量DNA和单条线虫的检测结果表明 ,探针检测松材线虫和拟松材线虫时 ,前者产生明显的荧光信号 ,后者无荧光信号 ,表明探针具有高度的特异性 ;探针检测到最低模板浓度为 1pg·μL- 1 ,DNA测序结果与实时荧光PCR结果一致
[期刊] 中国农业科学
[作者]
王念武 王婷 沈建国 胡方平
【目的】从口岸进境番茄种子中检测番茄溃疡病菌(Clavibacter michiganensis subsp.michiganensis,CMM),一直以来都受检测周期的限制,快速、特异地从种子中检测该病原细菌需要新的方法。研究在锁式探针扩增方式上,选择连接酶依赖的PCR扩增方式,并结合实时荧光PCR技术,旨在建立番茄溃疡病菌基于锁式探针技术的实时荧光PCR快速检测方法,为口岸番茄种子快速检疫提供技术支持。【方法】根据番茄溃疡病菌的一段特异基因Pat-1序列,设计锁式探针的T1和T2臂,使之与CMM的特异性片段碱基序列互补,再按照锁式探针的设计原则设计锁式探针和扩增引物以及荧光探针。试验时,先...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
侯雪 易盛国 韩梅 杨晓凤 邱世婷
本文研究了用气相色谱-串联质谱和气相色谱检测37种农药残留的检测回收率,稳定性和定量限参数。结果表明,添加浓度在0.10 mg/kg时,2种方法得到的农药回收率在70.3%～118.8%,相对标准偏差小于20%;然而串联质谱检测法的定量限明显优于GC-FPD检测法;采用进样口程序升温模式能避免热不稳定农药在进样口的分解,适用于此类农药的准确分析。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
王彦辉 杨彩英 马永林 黄辉晔 郭成林 覃建林 马跃峰
【目的】开展广西甘蔗田间杂草马唐(Digitaria sanguinalis)对莠去津的抗药性及抗性机理的研究,为其科学防除和抗性治理提供参考。【方法】采用盆栽试验,利用整株法测定采集于广西蔗区的25个马唐种群对莠去津的抗性水平;采用生理生化和分子生物学等方法分析研究马唐抗莠去津的机理。【结果】供试马唐种群中76%对莠去津产生抗性,其中贵港1号马唐种群相对抗性水平最高,抗性指数为37.2。崇左4号为敏感品系,百色1号和柳州2号种群3 d后GSTs相对活力明显高于敏感种群;对叶绿素上的D-1蛋白的编码基因p
关键词：
马唐 莠去津 抗性 GSTs psbA
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
董国伟 刘贤进 王沫 余向阳
采用制备的兔抗血清建立了甲胺磷 (methamidophos,MTP)残留的间接竞争性ELISA方法 ,证明了抗血清的特异性较好 ,并确立了测定参数 :抗血清与包被抗原的最佳工作浓度分别为 1∶30 0 0和 1∶5 0 0 0 ;最适检测范围为 0 .0 1～ 0 .1μg/ml;批内变异系数 7.5 6 % ,批间变异系数 5 .70 %。
关键词：
残留检测 ELISA 甲胺磷
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
金射凤 周游 张家俊 隋莹 杨红
利用高效液相色谱检测,分别建立了水、土壤和小麦中同时检测阿特拉津和草萘胺残留量的前处理方法。对水样,用LC-18固相萃取小柱分离、净化和富集;对土壤样品,以丙酮与水(体积比3∶1)混合溶剂为提取剂振荡提取,再用LC-18固相萃取小柱分离和净化;对小麦样品,以丙酮与水(体积比3∶1)为提取剂振荡提取,石油醚萃取去杂,再用LC-18固相萃取小柱分离和净化。结果表明:高效液相色谱法同时检测阿特拉津和草萘胺的线性范围为0.05～8.0 mg·L-1,两种农药的相关系数(R2)均为1.000 0,最低检测质量浓度分别为0.02和0.03 mg·L-1。水样中阿特拉津和草萘胺加标平均回收率分别为96.13...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
李婧涵 董玲
为了解磁性纳米颗粒在DNA分离纯化中的应用，采用文献综述和归纳总结的方法，阐述了1997—2021年以铁氧化物为核心的磁性纳米材料的研究进展，同时比较了材料结构和表面相关活性官能团的修饰对DNA提取效率的影响。结果表明：1）应用磁性纳米颗粒的固相萃取有着安全无毒、操作简单、可重复使用、能够实现自动化与高通量操作等多种优势，提取DNA效率相比于商业化试剂盒也有优势。2）目前磁性纳米材料已有比较全面的研究。磁性纳米颗粒的尺寸、孔径大小、磁化强度及引入的活性官能团不同等性质均对DNA的提取效率有影响，改变这些性质研发新型且高效的功能化磁性纳米颗粒或改变磁性纳米材料的制备方法、所提取DNA的形态性质、溶液的pH或盐浓度等试验条件，以提高DNA与材料的解吸率，不断优化磁性分离过程，提高DNA分离效率和质量。3）发展高通量商业化的核酸提取程序，是磁性固相萃取可观的发展前景。4）磁性纳米颗粒除了在核酸提取中的应用，在其他生物医学应用中也有着广泛的研究。以上结果均表明磁性纳米材料有着极强的研究发展前景。
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
鄢志丹 韩淋旭 王俊飞
针对铁磁性材料无损检测实验平台建设需求,设计了基于磁滞回线法的铁磁性材料磁性参数检测实验装置。装置为嵌入式硬件平台,包括主控及信号发生、功放、感应信号调理等7个模块,并开发了磁性参数检测应用软件,实现了数据通信、界面显示、数据管理等多种功能,根据CR12MOV钢板磁性参数检测实验结果表明,装置可绘制磁滞回线并获得矫顽力和剩磁参数数值。该装置融合多学科特性,为无损检测专业实验室建设提供了一种有效的综合实验及实践平台。
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