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[期刊] 华北农学报
[作者]
李勇 牛永春
以小麦基因组DNA为试验材料,探索SSR扩增反应中5种反应组分(模板DNA、dNTPs、引物、Mg2+和TaqDNA聚合酶)对SSR扩增结果的影响。研究发现,引物、Mg2+和TaqDNA聚合酶对PCR扩增结果的影响最显著,其次是模板DNA,dNTP对PCR扩增结果的影响不明显。此外,借助该优化的SSR反应体系,对小麦7B染色体上的多对SSR引物进行了多态性筛选。试验结果表明,优化的SSR扩增体系结合高浓度琼脂糖凝胶能够对显性或差异显著的共显性标记进行高效分离。
关键词：
小麦 SSR 分子标记
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
王小利 张改生 陈新宏 赵继新 刘宏伟 王军卫
利用小麦种子贮藏蛋白凝胶电泳技术,对簇毛麦(Haynaldiavillosa)、滨麦(Leymusmollis)、华山新麦草(Psathyrostachyshuashanica)、大麦(Hordeumdistichom)以及黑麦(Secalecereale)的高分子量谷蛋白亚基和醇溶蛋白进行了分析。结果表明,簇毛麦、滨麦、华山新麦草、大麦的高分子量谷蛋白亚基和醇溶蛋白与普通小麦相比均有各自的特征带;利用簇毛麦和大麦的高分子量谷蛋白亚基特征带鉴定出了普通小麦中与小麦第一同源群染色体有部分同源的V1和H5附加系;利用黑麦1RS醇溶蛋白标记位点Gld1B3鉴定了1BL/1RS易位系,同时利用染色体...
[期刊] 华北农学报
[作者]
李新海 焦少杰 傅骏骅 张世煌 袁力行 李明顺
利用 35个SSR引物和 14个玉米自交系直接比较了 3%Metaphor琼脂糖凝胶和 12 %聚丙烯酰胺凝胶电泳对SSR位点多态性水平的影响。结果表明 ,两种凝胶系统检测出的等位基因数目和基因多态性水平存在显著差异 ,12 %聚丙烯酰胺凝胶在区分微小差异片段能力上明显高于 3%Metaphor琼脂糖凝胶。另一方面在两种电泳检测系统下 ,14个自交系之间的遗传相似系数相关性 (r =0 516)达到了极显著水平 (P
关键词：
玉米 SSR标记 遗传变异 多态性信息量
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
邓康胜 吕远大 陶涛 田亮亮 郭旺珍 周宝良 张天真
以棉花纤维发育相关基因GhSUS1为目标基因,从EcoTILLING技术中常用的关键酶CELⅠ的提取、活性检测、目标基因引物设计及酶切等方面入手,开展了棉花EcoTILLING技术体系的创建研究。结果表明:所提取的CELⅠ活性高,稳定性好。在42℃、酶切体系为8μL PCR扩增产物中加入2μL粗酶液,与缓冲液等量混合,酶切45 min,能有效地对单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)所在的异源双链错配位点进行酶切。对棉花GhSUS1基因设计A和D染色体亚组特异性引物进行等位基因的多态性分析,结果表明:EcoTILLING结果与测序结果一致,说明建...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
芮琪 徐朗莱
采用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDSPAGE)和梯度凝胶电泳方法 ,研究了小麦旗叶暗诱导衰老过程中内肽酶同工酶的变化。发现用SDSPAGE法几乎检测不到新的内肽酶同工酶 ;用梯度凝胶电泳法则能检测到 6种新的同工酶 ,而且在第一叶自然衰老过程中也能检测到。表明在这两种衰老过程中内肽酶酶谱变化基本相似。
[期刊] 华北农学报
[作者]
高居荣 王洪刚 刘树兵 李兴峰 孔凡晶 陈冬花
在ISTA小麦和大麦种子醇溶蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定品种的标准程序的基础上 ,对影响电泳效果的各主要因素进行逐一筛选、改进 ,尤其是实验设计的NaOH 醋酸 甘氨酸缓冲系统和先低后高再低的电泳方式使此项技术具有快速、分辨率较高、重复性较好、易剥胶、操作简单、经济实用等优点 ,适于一般实验室利用小麦种子醇溶蛋白技术对小麦进行大量的快速简捷的筛选、鉴定等初步研究。
关键词：
小麦 种子醇溶蛋白 凝胶电泳
[期刊] 华北农学报
[作者]
谢欢 杨文香 彭巧慧 赵丽娟 刘力伟 张娜 刘大群
以Thatcher及23个以Thatcher为遗传背景的小麦抗叶锈病近等基因系为材料,开展了MITE扩增体系的建立研究,获得了适合小麦MITE分子标记的扩增体系及不同引物的退火温度,所用56对引物有27对获得稳定扩增。
关键词：
小麦叶锈病 抗病基因 MITE 分子标记
[期刊] 中国农业科学
[作者]
兰海燕 李立会
随着世界各国经济贸易和农业科学技术的发展 ,特别是植物新品种保护法的实施 ,品种鉴定越来越引起人们的关注。大量证据显示 ,凝胶电泳技术在作物品种鉴定中起着举足轻重的作用。对各种凝胶电泳技术现状做了全面综述 ,包括电泳方法的发展过程、电泳方法间的比较、影响因素、应用范围、己取得的成就和未来的发展方向。随着我国植物新品种保护范围的不断扩大 ,电泳方法必将在作物品种鉴定中发挥更大的作用。
关键词：
蛋白质 凝胶电泳 作物品种鉴定 种子检验
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
陈思 曹远银 李天亚 陈靓
针对RAPD扩增技术在小麦秆锈菌遗传多样性的分析研究中重复性较低的不足,对小麦秆锈菌RAPD扩增体系进行优化。以小麦秆锈菌不同的生理小种为材料,采用L16(45)正交试验设计,考察模板DNA、Mg2+、TaqDNA聚合酶、dNTPs和随机引物浓度5个因素的影响,并对退火温度和循环次数进行优化。结果表明:小麦秆锈菌RAPD扩增的较优体系为25μL体系中含1×Buffer,40ng·μL-1模板DNA,1.5mmol·L-1Mg2+,2.0U TaqDNA聚合酶,0.25mmol·L-1dNTPs,0.40μmol·L-1随机引物;适宜的退火温度为36℃,适宜的循环次数为43次。该反应体系检测多态...
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
杨远帆 蔡慧农 李利君 倪辉 陈申如
研究了聚乙二醇法、硫酸铵法、EDTA-Na2法及尿素法提取的琼脂糖在得率和品质上的差异。结果表明,4种方法提取的琼脂糖在得率和品质方面都具有较大的差别;EDTA-Na2法琼脂糖的得率最高,为62.3%;聚乙二醇法琼脂糖中的硫酸根和灰分含量最低,分别为1.39%和0.42%;尿素法琼脂糖的结晶紫电泳性能最好,其电泳长度为8.6cm;EDTA-Na2法琼脂糖的聚乙二醇电泳性能最好,电泳长度为3.9cm。随着聚乙二醇法提取次数的增加,琼脂糖纯度和质量显著提高。用聚乙二醇法提取3次所获得的琼脂糖的各项质量指标比其他3种方法获得的琼脂糖都好。
关键词：
琼脂糖 制备方法 得率 质量
[期刊] 华北农学报
[作者]
陈景堂 池书敏 马占元 祝丽英 刘志增 孟义江 宋占权 魏俊杰
利用改进的聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对改良掖单 19( 80 0 1× 52 10 6)、原掖单 19( 4 78×52 10 6)及亲本 80 0 1、 4 78、 52 10 6种子清蛋白 (Albumin)进行了研究。改良掖单 19共分离出 18条清蛋白谱带 ,除了 7条是双亲都有的公共带外 ,其余 11条是分别来自于双亲的互补带 ,其中4条来自 80 0 1,7条来自 52 10 6,没有新生带的产生 ,在A区和B区表现双亲共显性 ,在C区表现偏父类型 ;原掖单 19共分离出 16条清蛋白谱带 ,比改良掖单 19少两条 ,在谱带分布上也存在明显差别。改良掖单 19与原掖单 19的清蛋白谱带...
[期刊] 浙江林学院学报
[作者]
黄华宏 童再康 朱玉球 高燕会 许长寿 何福基
建立具有高分辨率和稳定性的矮化杉木Cunninghamia lanceolata叶片蛋白质的双向电泳图谱,研究杉木矮化突变的机理。取同一生长环境下的野生型杉木及矮化突变型杉木新梢顶端的叶片,液氮研磨成粉末后用改良TCA-丙酮沉淀法提取总蛋白,分别用CY2和CY3标记,用DIGE技术进行分析。与野生型杉木相比,在矮化突变型杉木的叶片组织中,有14个蛋白质表达水平显著增加,另外15个蛋白质表达水平显著下降。所得的29个差异蛋白质可能与杉木矮化突变的发生有关。图3表3参9
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
曹蕾 徐波 朱万里 张国华 黄木坤 应辰哲 何水林
利用电解质梯度变性聚丙烯酰胺凝胶电泳系统对稻纵卷叶螟取食的水稻叶片进行cDNA-AFLP分析,结果表明产生的cDNA条带比普通变性聚丙烯酰胺凝胶电泳系统大约增加30%,解决了传统的聚丙烯酰胺凝胶电泳在同一块胶板中大片段DNA条带堆积而小片段DNA条带间距过大,且读带数量有限的问题..
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
王小芬 王伟东 高丽娟 崔宗均
结合笔者等多年积累的经验详细介绍环境微生物学研究中变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术应用全步骤:从环境样品中直接提取总DNA,利用5′端含GC夹子的引物PCR 16S rDNA的部分片段,将PCR产物在含有浓度线形递增的变性剂的聚丙烯酰胺凝胶中进行电泳分析,使不同来源的DNA片段在电泳胶中分离,从胶中切出分离的DNA片段测定碱基序列,进行分类分析。PCR-DGGE技术能够检测不可培养的微生物基因,而DGGE技术与克隆等其他技术结合更能发挥其分离作用。
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