为探究雪茄烟叶自然晾制过程中青色斑点(简称"青斑")形成的生理机制及代谢差异,提高茄衣烟叶外观品质,改进晾制技术,以雪茄烟‘楚雪10号’品种为试验材料,利用高压液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)非靶向代谢组学技术,分析烟叶"青斑"和正常两组织部位的代谢差异。研究结果表明:"青斑"部位叶绿素和绿原酸含量显著高于正常部位,大量未分解的叶绿素和绿原酸在晾制末期沉积是"青斑"形成的生理基础;"青斑"和正常两组织部位间,酪氨酸代谢、苯丙氨酸代谢和类黄酮生物合成途径具有显著差异;绿原酸和二氢玉米素可作为"青斑"形成过程的化学标记物,晾制过程中可检测其含量高低来监测是否会出现"青斑";烟叶变黄期晾房湿度骤降且波动过大,可能是形成"青斑"的外部环境因素,建议采用湿度可控晾房晾制并适当提高变黄期湿度。

【目的】探究不同遮荫强度雪茄烟叶在晾制过程中颜色变化的差异。【方法】以川雪1号中部叶为试验材料,设置100%,85%,70%,55%和40%共5个遮荫透光处理,研究各处理雪茄烟叶晾制过程中含水率、相关酶活性、色素含量及多酚类物质含量变化对烟叶颜色的影响。【结果】(1)变黄、变褐特性以55%～70%遮荫透光处理烟叶转化更顺利。(2)55%～70%遮荫透光处理烟叶含水率显著高于其他处理,且70%遮荫透光处理烟叶失水速率适中、干燥速度适当,有利于提高颜色变化与物质转化的协调性。(3)55%～70%遮荫透光处理烟叶晾制过程中LOX和PPO活性较高,有利于酶促棕色化反应和质体色素降解。(4)55%～70%遮荫透光处理的烟叶质体色素降解量较大且降解速度快,促进了烟叶颜色的转化和品质的形成。(5)70%遮荫透光处理烟叶在晾制过程中绿原酸、芸香苷和莨菪亭含量在各阶段均维持在适宜水平,有利于烟叶颜色转化和品质形成。(6)70%遮荫透光处理的烟叶颜色均匀饱满,烟叶正反面色差值小。【结论】70%遮荫透光处理烟叶在晾制过程中变黄变褐转化顺利,失水速率协调性好,维持有较高的酶活性,促进了色素降解与多酚转化,有利于酶促棕色化反应以及晾后颜色转化,烟叶颜色多呈棕褐色和咖啡色,提升了晾制效果。

【目的】基于非靶向代谢组学技术,对3个品种雪茄烟叶发酵前后的代谢物进行鉴定与分析,为雪茄烟叶发酵工艺研究提供理论依据。【方法】选择陕西汉中烟区川雪3号(CX3)、海研103(HY103)和青雪204(QX204)3个优质雪茄烟叶品种为试验材料,采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用技术(UHPLC-QTOF-MS),结合主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)等多元统计分析方法,对不同品种雪茄烟叶发酵前后的代谢物进行代谢组学研究,筛选3个品种雪茄烟叶发酵前后的差异代谢物,并对筛选出的差异代谢物进行聚类分析、显著差异代谢物筛选和KEGG通路分析。【结果】CX3、HY103和QX204 3个品种雪茄烟叶发酵前后的代谢物相对含量存在显著差异,分别筛选出310,329和260种差异代谢物,主要为氨基酸、肽和类似物,有机酸,黄酮类化合物,脂质及生物碱。各品种中已鉴定的差异代谢物分别富集在74,74和65条KEGG通路中,主要的代谢通路为苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成,柠檬酸循环,抗坏血酸和醛糖代谢,吲哚生物碱生物合成,类黄酮生物合成,糖酵解/糖异生,甘油酯代谢,果糖和甘露糖代谢。【结论】3个品种雪茄烟叶发酵前后的代谢物存在一定差异,分别筛选鉴定了前20种差异代谢物,并获得了10条主要代谢通路。

以‘古巴7号’雪茄烟中部叶为材料，测定3种编烟密度(30、35和40片/m)下雪茄烟叶的物理特性、化学成分和中性致香物质含量。结果表明：随着编烟密度的增加，雪茄烟叶单叶质量、叶片厚度和叶质重逐渐降低，含梗率、拉力和平衡含水率烟碱含量则逐渐增加；当编烟密度为35片/m时，蛋白质含量最低，总糖和还原糖含量最高；当编烟密度从30片/m增加至35片/m时，烟叶新植二烯含量逐渐升高，当编烟密度从35片/m提高至40片/m时，其含量降低45.74%，导致烟叶的中性致香物质总量也降低；类西柏烷类降解产物也呈现相同的变化趋势。综上，编烟密度为35片/m时，雪茄烟叶的物理特性较好，化学成分较协调，中性致香物质含量较高，有利于雪茄烟叶品质的形成。

以‘古巴7号’雪茄烟中部叶为材料，测定3种编烟密度(30、35和40片/m)下雪茄烟叶的物理特性、化学成分和中性致香物质含量。结果表明：随着编烟密度的增加，雪茄烟叶单叶质量、叶片厚度和叶质重逐渐降低，含梗率、拉力和平衡含水率烟碱含量则逐渐增加；当编烟密度为35片/m时，蛋白质含量最低，总糖和还原糖含量最高；当编烟密度从30片/m增加至35片/m时，烟叶新植二烯含量逐渐升高，当编烟密度从35片/m提高至40片/m时，其含量降低45.74%，导致烟叶的中性致香物质总量也降低；类西柏烷类降解产物也呈现相同的变化趋势。综上，编烟密度为35片/m时，雪茄烟叶的物理特性较好，化学成分较协调，中性致香物质含量较高，有利于雪茄烟叶品质的形成。

为了研究不同产地和等级的雪茄烟叶中游离氨基酸含量,以什邡、万源和印尼雪茄烟叶为试验材料,采用氨基酸自动分析仪分析方法对雪茄型烟叶中游离氨基酸进行了研究。结果表明:雪茄烟叶中胱氨酸(Cys)和蛋氨酸(Met)含量最低,天门冬氨酸(Asp)和谷氨酸(Glu)含量远高于烤烟烟叶;产地相同的雪茄烟叶,通常等级越低,烟叶游离氨基酸含量越低;产地不同的雪茄烟叶,烟叶等级和氨基酸含量没有明显关系;对于印尼雪茄烟叶,氨基酸在茄芯、茄衣和茄套3种烟叶中的含量变化没有明显的规律。通过对雪茄烟叶游离氨基酸含量的研究,并结合其化学成分的含量特征,旨在为雪茄烟叶的研究提供更多的理论支持,以配合雪茄烟产品设计和开发。

为了解在四川什邡烟区留叶数和烟叶采收成熟度对雪茄烟品种ＧＨ１的影响、探寻适宜的雪茄烟叶生产方法，就留叶数和采收成熟度对其烟叶的总氮、烟碱、总灰分和钾这四种化学成分和烟叶的感官评吸质量的影响进行了分析。结果表明，留叶数对雪茄烟叶的总氮和烟碱含量的影响达显著，对灰分和钾含量影响不显著；成熟度差异对这几种成分含量的影响都不显著。留叶数和成熟度对烟叶感官评吸质量的影响均达显著，成熟度作用＞留叶数作用，由评吸结果来看，ＧＨ１适宜留叶数为１６叶，其上部叶可在近熟或其后３ ｄ内进行采收较好，而下部烟叶应在其达到近熟状态６ ｄ后采收。

【目的】明确不同光照强度对雪茄烟叶生长发育的光合特性、抗氧化特性及品质的影响。【方法】以川雪1号为试验材料，采用大田试验设置5个处理（CK:100%自然光照强度;T1:85%自然光强;T2:70%自然光强;T3:55%自然光强;T4:40%自然光强）。【结果】雪茄烟叶在旺长期至成熟期阶段，不同光照强度处理下烟叶的叶绿素类和类胡萝卜素含量均呈先升后降趋势，各处理烟叶的MDA和H_(2)O_(2)含量均呈缓慢上升趋势，各处理烟叶的SOD和POD活性呈先升后降趋势，CAT活性呈上升趋势。处理间随着光照强度降低，烟叶的光合色素含量、胞间CO_(2)浓度、水分利用效率及抗氧化酶活性提升，MDA含量、H_(2)O_(2)含量、净光合速率、气孔导度、蒸腾速率下降，但过低的光照强度环境不利于烟叶光合性能和抗氧化特性的提升。处理间随着光照强度提升，烟叶中总糖、总氮、烟碱含量呈先上升后降低趋势，氯、钾呈上升趋势，还原糖、糖碱比、氮碱比、两糖比呈下降趋势，过低的光照强度，烟叶的化学成分协调性较差，不利于烟叶品质。【结论】适度弱光（55%～70%自然光强）有利于叶片光合色素含量提升，能够促进光能吸收，维持稳定的光合特性，有利于烟叶的生长发育，同时抗氧化酶活性提升，烟叶膜脂过氧化损伤降低，抗氧化特性增强，烟叶化学成分协调性较好，有利于烟叶品质形成。

[目的]分析发酵过程中雪茄烟叶颜色参数与多酚类物质、化学成分及评吸质量的关系,为快速分析雪茄烟叶发酵过程中发酵品质提供参考。[方法]以调制后的德雪3号中部二级雪茄烟叶为试验材料,采用人工堆积法进行发酵30 d,从发酵开始每隔5 d取样1次,直至发酵结束。测定发酵过程中烟叶颜色参数(亮度值(L~*)、红度值(a~*)、黄度值(b~*)、饱和度(C)、色泽比(H)、色相角(H~0)、色差值(ΔE))、多酚类物质(莨菪亭、绿原酸、芸香苷、总酚)含量、化学成分(总糖、还原糖、总氮、蛋白质)含量及评吸质量(香气质、香气量、劲头、浓度、余味、杂气、刺激性、甜度、灰色)的变化,分析颜色参数变化与多酚类物质、化学成分及评吸质量的关系,并建立动态变化预测回归方程。[结果]随着发酵进程的推进,雪茄烟叶多酚类物质(莨菪亭、绿原酸、芸香苷、总酚)含量、化学成分(总糖、还原糖、总氮、蛋白质)含量与颜色参数L~*、a~*、b~*、C值均呈缓慢降低的变化趋势,H值呈先升高后降低的变化趋势,H~0呈先降低后升高的变化趋势,ΔE值呈缓慢上升的变化趋势。发酵25～30 d烟叶的评吸质量较好,各评吸指标较未发酵烟叶均有明显提升。相关分析表明,发酵过程中雪茄烟叶颜色参数与多酚类物质、化学成分和评吸质量达显著或极显著水平。回归分析表明,多酚类物质和化学成分对发酵过程中雪茄烟叶颜色变化有直接影响,评吸质量与颜色参数关系密切。[结论]通过量化雪茄烟叶发酵过程中颜色参数,建立发酵过程中评吸质量变化模型,提高雪茄烟叶发酵过程中的可调控性及烟叶品质。

【目的】为了研究国内外不同产地雪茄烟综合品质的差异性。【方法】分别对国外4个产地(尼加拉瓜、哥伦比亚、厄瓜多尔和多米尼加)和国内2个产地(海南和四川)雪茄烟的化学成分及致香成分进行检测和分析比较。【结果】海南雪茄烟的化学指标与国外雪茄烟有显著性差异,四川雪茄烟的化学指标值更接近于国外雪茄烟产地;厄瓜多尔雪茄烟的致香成分总量最高,海南雪茄烟的致香成分总量稍低于厄瓜多尔雪茄烟和哥伦比亚雪茄烟,明显高于尼加拉瓜雪茄烟和多米尼加雪茄烟。四川雪茄烟的致香成分总量最低。【结论】国外产地的雪茄烟中β-紫罗兰酮、巨豆三烯酮A/C、3-羟基-β-二氢大马酮、合金欢基丙酮B以及烟碱的含量相对较高,这些香气成分含量的差异,使国内雪茄烟叶在烟气浓度、丰满度、和谐性及抽吸劲头方面稍逊色于国外雪茄烟叶。

我国雪茄烟消费市场发展迅速,但却面临着市场开发困难和非法渠道冲击等问题。为此,将关系营销理论运用于雪茄烟的渠道营销将有助于解决现存问题。

【目的】揭示和明确雪茄烟品种Beinhart 1000-1抗赤星病的遗传规律。【方法】以抗病雪茄烟品种Beinhart 1000-1为父本、感病烤烟品种红花大金元为母本杂交、自交构建重组自交系群体F_(7)，对各单世代（P_(1)、P_(2)和F_(7)）的赤星病抗性采用混合遗传模型“主基因+多基因”进行遗传分析。【结果】重组自交系群体F_(7)赤星病抗性表型呈正态分布，表现典型的数量性状遗传，其最优遗传模型为4 MG-AI，受4对加性-上位性主基因控制、，第1对主基因的加性效应值最大（da=11.5371）、且主基因整体遗传效率为96.8392%。【结论】雪茄烟Beinhart 1000-1赤星病抗性遗传方式以主基因效应为主、环境效应小。因此，在烟草抗病育种过程中要重视利用主基因，应在早期世代对赤星病抗性性状进行选择。

运用超高效液相色谱–串联质谱联用技术，从烤烟品种G80不同成熟期(打顶当天及打顶后第10天、第20天、第30天)烟叶中鉴定出亲水性代谢物211种、亲脂性代谢物74种。共筛选出94个差异代谢物，包括氨基酸类、糖类及糖苷类、脂类、胺类、生物碱类、苯丙酸类及衍生物、萜类、核苷酸和其他等9大类，其中L–苯丙氨酸、DL–苯丙氨酸、DL–酪氨酸、蔗糖和甘油酸为G80烟叶成熟过程中的关键代谢物。代谢通路分析发现，G80不同成熟期烟叶差异代谢物均显著富集于苯丙氨酸代谢途径，其代谢产物木脂素、苯丙酸、黄酮类和香豆素及其衍生物等多酚类化合物在成熟后期大量积累，有助于增强烟叶的抗氧化能力和促进香气的形成。

运用超高效液相色谱–串联质谱联用技术，从烤烟品种G80不同成熟期(打顶当天及打顶后第10天、第20天、第30天)烟叶中鉴定出亲水性代谢物211种、亲脂性代谢物74种。共筛选出94个差异代谢物，包括氨基酸类、糖类及糖苷类、脂类、胺类、生物碱类、苯丙酸类及衍生物、萜类、核苷酸和其他等9大类，其中L–苯丙氨酸、DL–苯丙氨酸、DL–酪氨酸、蔗糖和甘油酸为G80烟叶成熟过程中的关键代谢物。代谢通路分析发现，G80不同成熟期烟叶差异代谢物均显著富集于苯丙氨酸代谢途径，其代谢产物木脂素、苯丙酸、黄酮类和香豆素及其衍生物等多酚类化合物在成熟后期大量积累，有助于增强烟叶的抗氧化能力和促进香气的形成。

【目的】萜类代谢物是评价胡萝卜风味品质的主要指标，对胡萝卜口感风味品质的形成具有重要作用。通过比较甜味浓烈组（-3）和苦味浓烈组（3）两组不同品种胡萝卜成熟期肉质根风味成分的代谢谱，为胡萝卜风味特征成分鉴定及优异资源的开发利用提供参考。【方法】建立高效的、具有高灵敏度和高通量的代谢组学分析平台和方法：采用UPLC-MS/MS方法对胡萝卜萜类代谢物进行分析测定，鉴定影响胡萝卜风味品质的萜类代谢物。采用OPLS-DA结果的VIP值、log2FC值筛选差异性代谢物（设置阈值：VIP>1、fold change≥2和fold change≤0.5）。【结果】利用UPLC-MS/MS技术对胡萝卜成熟期肉质根进行广泛靶向代谢组学测定，共筛选出50种显著差异的萜类代谢物，12个上调，2个下调。其中，显著上调的分别是京尼平（0.754）、粳米素B(0.936)、氧叶烯A(1.03)、乙酸香芹酯（1.04）、3-(3'-羟基丁基)-2,4,4-三甲基环己烷-2,5-二烯酮（0.662）；显著下调的是脱氢地芰普内酯（0.617）。从含量来看，苦味胡萝卜中萜类代谢物含量综合较高的分别是甲黑素甲苷A(16.98)、莪术醇（17.57）、京尼平（15.32），甜味胡萝卜中萜类代谢物含量综合较高的分别是甲黑素甲苷A(17.61)、异香附醇（16.01）、莪术醇（18.73）。根据P值来看，排名前5的分别是薇甘菊内酯（0.994）、寥二醛（0.991）、甲基(E)-5,11-二羟-4-((Z)-2-甲基丁-2-烯酰氧基）-3,10-二亚甲基-2-氧代-2,3,3a,4,5,8,9,10,11,11a-十氢环癸并[b]呋喃-6-羧酸酯（0.978）、(3R)-3-羟基-紫罗兰酮（0.974）、布卢门醇A(0.969)。采用聚类分析方法对两组胡萝卜肉质根中的差异代谢物进行分析，其中，分组3中的代谢物含量要明显高于分组-3中的代谢物含量。利用KEGG进行差异代谢物注释和富集分析。【结论】萜类代谢物是影响胡萝卜风味的主要化合物，其中，京尼平、粳米素B、氧叶烯A、乙酸香芹酯、甲黑素甲苷A、莪术醇、异香附醇、脱氢地芰普内酯、薇甘菊内酯等萜类代谢物可能是影响胡萝卜风味的关键成分。