【目的】对日本抗性黑松体细胞胚成熟的影响因子进行研究,探究各因素在体细胞胚发生过程中的作用,为进一步提高体细胞胚发生的质量和数量提供理论依据。【方法】胚性细胞团在固体增殖培养基上继代生长10天,使用灭菌(75%乙醇擦拭、紫外灭菌30 min)的电子天平称量1 g胚性细胞团,采用50 mL无菌量筒(紫外灭菌30 min)量取30 mL培养液中于100 mL的三角瓶中,将1 g胚性细胞团转至100 mL的三角瓶中,手动搅拌至细胞团分散,置于90 r·min~(-1)摇床上,25℃黑暗培养7～8天。随后,取3 mL沉淀悬浮细胞进行继代增殖,每星期继代增殖一次至胚性细胞全部均匀散落于培养液。将继代4次的胚性细胞充分摇匀,取2 mL(鲜质量约200 mg)胚性悬浮细胞喷洒在不同组分麦芽糖(30、45、60 g·L~(-1))、脱落酸(ABA)(0、5、10、20、30、50 mg·L~(-1))、聚乙二醇(PEG8000)(0、50、75、100、125、150 g·L~(-1))、活性炭(AC)(1、2、3 g·L~(-1))、琼脂(琼脂6、8、10、12 g·L~(-1),植物凝胶2、2. 5、3、3. 5 g·L~(-1))以及麦芽糖、ABA、PEG 3因素的组合固体成熟培养基上。【结果】以#1337为材料的体细胞胚成熟发育过程中,麦芽糖45 g·L~(-1),获得的体细胞胚数量显著增多。ABA浓度为5～20 mg·L~(-1),体细胞胚数量呈显著上升趋势,ABA为20 mg·L~(-1)时,获得的体细胞胚最多。125 g·L~(-1)PEG8000为体胚发生最佳浓度; AC 2 g·L~(-1)时,胚性细胞形成结构完整、数量较多的成熟体胚;成熟培养基中添加琼脂粉,培养基不能凝固,植物凝胶更适合作为成熟培养基凝固剂。3 g·L~(-1)植物凝胶为抗性黑松体胚发育成熟的最佳浓度。在设计的9种成熟培养基组合中(胚性细胞#1337、#1537、#1637),胚性细胞产生体细胞胚最多的成熟培养基组合为麦芽糖45 g·L~(-1)、ABA 10 mg·L~(-1)、PEG8000 125 g·L~(-1)。在不同的麦芽糖、ABA和PEG组合中,不同无性系生产体细胞胚数量呈现出不同的变化趋势:胚性细胞系#1337体胚发育成熟的最佳组合为麦芽糖45 g·L~(-1)+ABA 10 mg·L~(-1)+PEG 125 g·L~(-1);#1537和#1637体胚发育成熟的最佳组合为麦芽糖30 g·L~(-1)+ABA 10 mg·L~(-1)+PEG 125 g·L~(-1);在3个无性系中PEG的极差最大,对抗性黑松体细胞胚发育成熟的影响最大。【结论】抗性黑松体胚发育成熟过程中,麦芽糖45 g·L~(-1)、ABA20～30 mg·L~(-1)、PEG8000 125 g·L~(-1)、AC 2 g·L~(-1)和植物凝胶3 g·L~(-1)对体细胞胚成熟都具有促进作用。30 g·L~(-1)麦芽糖、10 mg·L~(-1)ABA、125 g·L~(-1)PEG为抗性黑松体胚发育成熟的最佳组合。

以活性干酵母为菌种,采用摇瓶培养,通过单因素试验和正交试验设计,研究了发酵培养基中酵母粉、蛋白胨和蔗糖3种主要成分对酵母生物量及富硒性能的影响。结果表明,对酵母生物量影响最主要的营养成分是蔗糖,其次是酵母粉和蛋白胨;对酵母硒含量和硒总含量影响最主要的成分均为蛋白胨,其次为酵母粉和蔗糖。以酵母中硒总含量为指标,初步确定的富硒酵母优化培养基配方为:酵母粉15 g/L,蛋白胨10 g/L,蔗糖20 g/L,且在该营养条件下制得富硒酵母的硒含量和硒总含量分别可达1 050.00μg/g和5 510.07μg/L,与优化前(培养基配方为酵母粉10 g/L,蛋白胨10 g/L,蔗糖40 g/L)相比分别提...

木低聚糖可以从木质纤维的有控酶降解反应获得 .该文采用培养木霉菌 ,使其在最佳条件下比较专一性地合成木聚糖酶 ,这种最佳条件包括培养基成分的探索和培养条件的控制两方面 .期望用这种木聚糖酶降解木质纤维原料时 ,能尽可能多地得到木低聚糖 ,而较少出现木单糖 .首先就碳源、氮源、碳氮比等因素对木聚糖酶活性的影响进行了研究 .结果表明 ,以杨木粗木聚糖为碳源 ,以酵母浸膏为氮源 ,碳源浓度控制在 7g L左右 ,碳氮比在 7 8以上 ,所产生的木聚糖酶活性较高 ,且木聚糖酶与纤维素酶酶活的比值较高 ,即所产酶的选择性较好

本研究结果表明，采用２，４－Ｄ浸穗法结合低浓度激素培养基进行小穗培养，可以明显改善小麦和玉米杂交种颖果、幼胚及胚乳的发育状况，得胚率由２．１％提高到１２．０％；同时表明低浓度激素对杂种发育有着明显的调节作用，但２，４－Ｄ和ＧＡ优于ＫＴ。

油松(Pinus tabulaeformis)是我国特有的针叶树种,木材坚实,富含松脂,耐腐朽,是优良的建筑、电杆、枕木、矿柱等用材。油松是北方的主要造林树种之一,它分布广,适应性强,根系发达,树姿雄伟,枝叶繁茂,有良好的保持水土和美化环境的功能(徐化成,1993)。近期关于油松的研究主要有油松林水分平衡(常建国等,2013)、球花与花粉管(钮世辉等,2013;尚峰男等,2013)、光照对幼苗的影响(冯晓燕等,2013)、人工林更新(李兵兵等,2012)

以NT为基本培养基,以雷公藤不定根为材料,研究NT培养基中氮总量、硝态氮和铵态氮之比、磷酸盐、钾盐、钙盐、镁盐、铁盐浓度对雷公藤不定根生长及雷公藤甲素和总生物碱含量的影响。结果表明:适合雷公藤不定根生长的培养基中氮含量为NT培养基的1.7倍,NO-3/NH+4为9∶1,PO3-4浓度、K+浓度、Ca2+浓度、Mg2+浓度为NT培养基的2倍,Fe2+浓度不变。NT培养基中原有的Mg2+浓度、总氮浓度及其比例,1.7倍的PO3-4浓度,1.3倍的K+浓度,2/3的Ca2+浓度,1/3的Fe2+浓度比较适合雷公藤甲素的积累。而对雷公藤总生物碱的积累各成分的最佳浓度为:NT培养基中原有的PO3-4,K...

筛选试验结果表明 ,将 N6 培养基 Ca2 + 浓度从 1.13mmol/ L提高到 5 m mol/ L ,对玉米幼胚胚性愈伤组织的诱导、继代和分化具有促进作用。在一次继代过程中 ,Ca2 +浓度为 5 m mol/ L 的培养基上培养的胚性愈伤组织相对生长量比 1.13m mol/ L 的原培养基增加 0 .8倍。 Ca2 +浓度提高以后 ,在培养基中再添加钙调蛋白 (Ca M)抑制剂盐酸氯丙嗪 (CPZ) ,可抑制 Ca2 +的促进作用 ,说明钙增加后对玉米胚性愈伤组织诱导和继代的促进作用受Ca2 + / Ca M信息系统控制。用改进后的 N6 培养基 ,可提高生产上大面积推广的玉米自...

应用二次正交旋转通用组合设计,研究了培养基中蔗糖、Ca2+和硼酸3浓度对苦瓜花粉体外萌发的影响,获得了相应的数学模型,解析了各因素对苦瓜花粉萌发率的主效应和互作效应,通过模型寻优获得了适于苦瓜花粉体外萌发的最优培养基配方.结果表明,3种成分对苦瓜花粉萌发率的影响从大到小依次为蔗糖、硼酸、Ca2+.在本试验条件下,苦瓜花粉萌发率大于73%的培养基配方为:蔗糖质量浓度8.0%～8.8%,硼酸浓度1.59～1.84mmol/L,Ca2+浓度2.98～3.44mmol/L.

为探讨黄鳝卵巢发育规律,观察了实验室养殖条件下黄鳝卵巢初次性成熟过程,采用定量PCR分析了gdf 9(growth differentiation factor 9)、cyp19a1a(P-450 aromatase)、amh(anti-Müllerian hormone)和amhrII(anti-Müllerian hormone type II receptor)基因表达水平。结果显示,4至9月龄黄鳝卵巢中卵母细胞处于初级生长期,胞质中嗜碱性巴尔比尼小体数量先增后减,形状由点变为大团块状,后又缩小。10月龄时,黄鳝卵巢青春期启动,进入次级生长期;部分卵母细胞出现皮质小泡,巴尔比尼小体消失或...

同伴是影响初中生学业成绩的重要因素。国内已有研究对这一问题进行过探讨,但在解决内生性方面还有一定的不足。因此,本文利用同一班级相邻两年的初中生发育成熟度的自然变化这一随机效应来识别由于青春期发育成熟度变化带来的同伴效应,采用一阶差分和分位数回归的策略,解决了一般回归分析中存在的内生性问题。研究发现:女生发育成熟度与学生成绩为显著的负向关联,男生发育成熟度与学生成绩为显著的正向关联,这说明男女生发育成熟度对初中生学业成绩的影响具有性别差异。此外,同伴效应还具有异质性,总体来看,班级女生发育成熟度越低,越有利于学生成绩的提高;班级男生发育成熟度越高,越有利于学生成绩的提高。本研究的发现对于适龄儿童入学年龄的调整有一定的政策含义。

【目的】探讨无核君迁子Diospyros lotus果实发育成熟过程中生理指标的变化规律，为无核君迁子果实资源的进一步开发利用提供参考。【方法】以不同时期无核君迁子果实为材料，测定单宁、总酚、黄酮、花青素、糖和果胶组分以及果胶降解酶活性的变化规律，并分析其相关性。【结果】无核君迁子果实发育成熟过程中，可溶性单宁和花青素不断降低，不溶性单宁、淀粉、果糖、葡萄糖、糖酸比、水溶性果胶、离子结合果胶逐渐上升，总酚、黄酮、可滴定酸和共价结合果胶先升后降；多聚半乳糖醛酸酶和果胶裂解酶活性在果实软熟期显著上升(P<0.05)。相关性分析表明：水溶性果胶、离子结合果胶与多聚半乳糖醛酸酶、果胶裂解酶活性呈极显著正相关(P<0.01)，共价结合果胶与多聚半乳糖醛酸酶、果胶裂解酶活性呈显著负相关(P<0.05)，淀粉、果糖、葡萄糖与水溶性果胶、离子结合果胶及多聚半乳糖醛酸酶、果胶裂解酶活性呈极显著正相关(P<0.01)。【结论】无核君迁子果实发育成熟过程中，可溶性单宁逐渐下降至可食用阈值以下，多聚半乳糖醛酸酶和果胶裂解酶参与催化细胞壁果胶组分降解，进而引起无核君迁子果实果胶组分变化、可溶性糖升高以及活性成分变化。图4表2参29

以未成熟合子胚为外植体,建立黑松体细胞胚胎发生和植株再生体系。研究基本培养基、2,4-D和6-BA对胚性愈伤组织诱导的影响,探讨ABA和PEG对体细胞胚成熟及植株再生的影响。结果表明:在添加4mg·L-12,4-D+2mg·L-16-BA的DCR培养基上胚性愈伤组织诱导率为3.33%;在添加30mg·L-1ABA+25g·L-1PEG的培养基DCR上,每克愈伤组织体细胞胚数量达72个,体细胞胚的萌发率为63.8%、植株转化率为43.5%,高质量的黑松体胚能提高体胚萌发率和植株转化率,再生植株1个月移栽成活率为50%。该研究可为抗病黑松的快速大规模繁殖提供一条新途径。

以文冠果成熟胚为外植体,进行了初代培养、继代培养和生根培养研究,结果表明:初代培养诱导文冠果成熟胚形成不定芽的适宜培养基是MS+2.0mg.L-16-BA+0.1mg.L-1NAA+30g.L-1蔗糖+6g.L-1琼脂,分化率可达94.7%;继代高生长的适宜培养基是MS+0.5mg.L-16-BA+0.5mg.L-1NAA+30g.L-1蔗糖+6g.L-1琼脂,培养50d后,苗高大于0.5cm芽数量平均达11.67株;生根培养的适宜培养基是WPM+1.0mg.L-1IBA+30g.L-1蔗糖+6g.L-1琼脂,生根率为70.30%,平均根数为3.57条。并通过石蜡切片技术,观察愈伤组织诱导、愈...

以沈阳农业大学植物园内 30a生水曲柳 (Fraxinusmandshurica)为试材。分别于 2 0 0 0年 7月和 8月取水曲柳幼果 ,用 0 1%的HgCl2 进行表面消毒 ,在无菌条件下取出未成熟胚进行诱导培养。在胚成苗后进行继代培养和生根培养。培养结果表明 :在水曲柳胚的发育初期 ,进行胚培养不易成功 ;但当幼胚分化成子叶和胚根时 ,进行胚培养 ,胚的成活率和成苗率均较高。不加任何激素的WPM、MS、DKW和SH培养基都可以作为水曲柳未成熟胚培养的培养基。水曲柳组培苗继代培养的外植体分化率低 ,最高只能达到 2 12 5苗·月 - 1 (培养基为WPM +BA 1mg·L- ...

以甘蓝型油菜品种（系）和杂种Ｆ１代为材料，研究了供试材料和培养基成分对小孢子胚产量（以每花药产生的胚状体个数表示）的影响。不同材料胚产量有显著差异，变化范围为０～１２．８６。通常，杂种Ｆ１代胚产量较品种（系）高。同一材料不同单株间胚产量亦有差异。培养基成分中，大量元素以ＮＬＮ为最佳，１／２ＭＳ和１／２Ｂ５培养基上亦可形成少量胚状体；培养基的ｐＨ以５．８为佳，提高ｐＨ至６．８和７．８，显著不利于胚状体形成和发育；不同材料要求的蔗糖浓度、激素种类和浓度也不同。