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[期刊] 林业科学  [作者] 李琰  冯俊涛  王永宏  李玉平  张兴  
以MS,B5,NT,H,1/2MS,6,7-V及White为基本培养基,分别添加1.0mg·L-12,4-D和0.5mg·L-1KT,分析不同类型培养基对雷公藤愈伤组织生长及次生代谢产物含量的影响,并以NT为基本培养基进行光照条件、pH值、接种量、不同外植体以及培养时间试验,探讨雷公藤愈伤组织生长及次生代谢产物含量的最佳培养条件。结果表明:6,7-V培养基有利于愈伤组织生长和继代保存,White培养基上雷公藤内酯醇及雷公藤总生物碱含量最高,NT培养基适合进一步继代培养。pH5.8时,最有利于愈伤组织生长,pH6.7时雷公藤内酯醇的含量最高,而雷公藤总生物碱含量在pH5.2时最高;光照处理中,暗...
[期刊] 林业科学  [作者] 李琰  杨钰琪  陈培  冯俊涛  张兴  
以NT为基本培养基,以雷公藤不定根为材料,研究NT培养基中氮总量、硝态氮和铵态氮之比、磷酸盐、钾盐、钙盐、镁盐、铁盐浓度对雷公藤不定根生长及雷公藤甲素和总生物碱含量的影响。结果表明:适合雷公藤不定根生长的培养基中氮含量为NT培养基的1.7倍,NO-3/NH+4为9∶1,PO3-4浓度、K+浓度、Ca2+浓度、Mg2+浓度为NT培养基的2倍,Fe2+浓度不变。NT培养基中原有的Mg2+浓度、总氮浓度及其比例,1.7倍的PO3-4浓度,1.3倍的K+浓度,2/3的Ca2+浓度,1/3的Fe2+浓度比较适合雷公藤甲素的积累。而对雷公藤总生物碱的积累各成分的最佳浓度为:NT培养基中原有的PO3-4,K...
[期刊] 林业科学  [作者] 李琰  杨广隶  冯俊涛  黄正清  张兴  
以雷公藤根愈伤组织为材料,添加不同质量浓度的2,4-D,NAA,6-BA,KT或其组合,研究植物生长调节剂及其组合以及碳源对雷公藤愈伤组织的生长、次生代谢产物含量的影响。结果表明:2,4-D有利于雷公藤愈伤组织的生长和总生物碱的积累,6-BA对愈伤组织的生长起抑制作用,但明显促进愈伤组织中雷公藤内酯醇的形成,KT虽然对愈伤组织的生长起促进作用,但明显抑制愈伤组织中雷公藤内酯醇的形成;不同质量浓度2,4-D,NAA及与KT,6-BA组合试验表明,1.0mg·L-12,4-D+0.5mg·L-1KT明显促进愈伤组织的生长,1.0mg·L-12,4-D+2.0mg·L-1KT有利于愈伤组织中总生物碱...
[期刊] 林业科学  [作者] 李琰  温鹏飞  崔蕾  雷嘉敏  张兴  
雷公藤(Tripterygium wilfordii)不仅是一种药用植物,还是一种有毒植物,在民间作为杀虫植物,有"菜虫药"之称,其主要活性成分雷公藤生物碱和雷公藤甲素既有杀虫活性又有医用活性(李琰等,2012;Brinker et al.,2005;Liu,2011),临床上常用来治疗风湿性关节炎、肿瘤、免疫抑制性疾病(仲剑等,2009;Johnson et al.,2011;Huang et al.,2012)。雷公藤也是植物源农药的传统来源,根皮在我国民间常用来防治多种蔬菜害虫,提取物对菜青虫(Pieris rape)、小菜蛾(Plutella xylostella)等多种害虫
[期刊] 北京林业大学学报  [作者] 刘玉民  刘亚敏  马明  何丙辉  
以MS为培养基,研究了光照、温度、植物生长调节剂等条件对三角枫愈伤组织诱导生长和总黄酮含量的影响。结果表明:光照对愈伤组织中总黄酮的积累有极显著影响,对愈伤组织鲜重生长有显著影响,对愈伤组织干重生长影响较小。与暗条件相比,连续光照不利于愈伤组织形成,但有利于愈伤组织中总黄酮积累,间断性光照有利于愈伤组织形成,但不利于总黄酮积累;黑暗不利于愈伤组织中总黄酮积累。三角枫愈伤组织生长及黄酮类化合物生物积累的适宜温度为25℃,与之相比,低温(15℃)或高温(35℃)培养时愈伤组织生长及总黄酮积累均受到抑制,变温(15℃转25℃、25℃转35℃)培养减弱愈伤组织生长,不利于黄酮的积累。4种供试植物生长调...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 王晓丽   杨莉莉   何泽东   陈蒙蒙   马志卿   张斌   祝传书  
【目的】探究不同诱导子对雷公藤发状根生长及主要次生代谢产物(吉碱和次碱)含量的影响,为雷公藤次生代谢产物的开发利用及其生物合成途径解析提供理论依据。【方法】分别配制1/4 MS,1/2 MS,3/4 MS和MS 4种培养基,恒温避光培养雷公藤发状根35 d,测定雷公藤发状根干质量及雷公藤吉碱和次碱含量,筛选雷公藤发状根培养的最适培养基;以最适培养基培养雷公藤发状根,每7 d取样1次,共取样7次,测定发状根干质量,以培养时间为横坐标,发状根干质量为纵坐标绘制发状根生长曲线并确定添加诱导子的时间;提取和分离不同处理发状根及培养基中的雷公藤吉碱和次碱,并进行HPLC分析,探究不同诱导子对雷公藤发状根生长及吉碱、次碱含量变化的影响。【结果】培养35 d时,1/2 MS和MS培养基中雷公藤发状根干质量分别为0.86和0.81 g/瓶,且MS培养基中发状根的根系长势更好;MS培养基中发状根吉碱和次碱的含量均达到最高,分别为1 070.57和331.72μg/g,因此确定MS培养基为雷公藤发状根培养的最适培养基。雷公藤发状根的干质量以及吉碱和次碱含量在培养21~28 d内迅速增长,28~35 d处于稳定阶段,35 d后生长速率出现下降的趋势,因此确定雷公藤发状根培养28 d添加诱导子。诱导试验结果表明,低浓度水杨酸(SA)促进雷公藤发状根的生长,100μmol/L SA处理吉碱和次碱的总产量分别达到(1 777.09±70.02)和(592.16±85.61)μg/瓶;高浓度硝酸银(AgNO3)抑制了雷公藤发状根的生长,但显著提高了发状根中吉碱和次碱的产量, AgNO3质量浓度为50 mg/L时,吉碱和次碱的总产量分别达到(3 926.82±273.59)和(669.31±33.23)μg/瓶;5和10 g/L山梨醇对雷公藤发状根生长及吉碱和次碱含量均有促进作用,其中10 g/L山梨醇处理时吉碱总产量为(1 567.84±135.78)μg/瓶,5 g/L山梨醇处理时次碱总产量为(388.68±30.11)μg/瓶;壳聚糖对雷公藤发状根生长有抑制作用,100 mg/L壳聚糖处理的吉碱和次碱总产量分别为(1 661.62±189.33)和(361.39±33.45)μg/瓶。【结论】低浓度AgNO3、SA以及山梨醇对雷公藤发状根生长具有一定促进作用,壳聚糖对雷公藤发状根生长有抑制作用;对吉碱和次碱诱导效果最好的是50 mg/L AgNO3
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 李琰  冯俊涛  王永宏  郭小虎  祁新帅  张兴  
【目的】建立雷公藤愈伤组织诱导培养体系,为雷公藤通过组织培养生产次生代谢产物奠定基础。【方法】以雷公藤枝条扦插苗的根、幼茎、叶为外植体,研究基本培养基、激素、外植体类型对愈伤组织诱导的影响,并检测了不同外植体愈伤组织乙酸乙酯提取物的杀虫活性。【结果】MS培养基有利于雷公藤愈伤组织的诱导;雷公藤的根、茎、叶3种外植体均可用来诱导愈伤组织;供试激素中,2,4-D的诱导效果较NAA好,KT的效果优于6-BA,低质量浓度的KT与2,4-D组合能促进愈伤组织的诱导和生长;根、茎、叶3种愈伤组织提取物对粘虫幼虫均有明显的拒食活性,对粘虫幼虫的生长发育有明显的抑制作用,48 h拒食中质量浓度(AFC50)分...
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 杨小玲  侯正仿  季静  崔少杰  王罡  
以安祖花嫩叶为试材,研究安祖花品种、培养基不同组分和培养温度对叶片愈伤组织诱导率的影响。结果表明,品种是影响安祖花叶片愈伤组织诱导率的主要因素;培养基成分和培养温度影响叶片愈伤组织诱导率,当6-BA浓度为0.5mg·L-1时,嫩叶形成愈伤组织能力较强;将硝酸铵用量减少至MS配方量的1/2时,叶片愈伤组织诱导率没有变化,但当硝酸铵和氯化钙用量同时减至1/2时,叶片愈伤组织诱导率提高;采用21~26℃变温培养较恒温培养更能促进叶片愈伤组织的形成。嫩叶在改良MS(1/2硝酸铵+1/2氯化钙)+0.5mg·L-1 6-BA+0.1mg·L-1 NAA培养基中,日温26℃,夜温21℃的变温暗培养,叶片愈...
[期刊] 林业科学  [作者] 王博  范桂枝  詹亚光  
In this study,effects of the different medium,and the kinds and concentrations of plant growth regulator on callus induction,growth and triterpenoid production in birch (Betula platyphylla) stem extant culture were investigated. The results showed that calli were all obtained on IS medium supplement...
[期刊] 西南农业学报  [作者] 周倩  辜夕容  万宇轩  吴雪莲  刘飞  钱春  姚永宏  
为探讨大量元素和植物激素对无患子愈伤组织诱导和芽苗增殖的影响并优化培养基组成,试验采用正交设计研究了不同浓度的大量元素、BA和NAA对无患子茎段培养的影响,并对试验数据进行极差分析和方差分析。结果表明BA在无患子茎段愈伤组织诱导和芽苗增殖中起主要作用,其次为MS大量元素,NAA无明显作用。全量MS和2.0 mg·L-1的BA最适于无患子茎段上愈伤组织的诱导与再分化以及芽苗的增殖和伸长;MS大量元素含量降低、BA和NAA浓度增加均不利于无患子离体培养物的生长,这在愈伤组织的再分化上表现尤为显著。无患子茎段培养的最适培养基是MS+BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.01 mg·L-1,本试验中...
[期刊] 西南农业学报  [作者] 于洋  张业胜  董扬  万雯婷  李丽娟  张静  李琼  胡凤益  
相比粳稻而言,籼稻愈伤组织诱导一直没有一种通用的诱导培养基。为了找到适用于籼稻愈伤诱导的通用培养基,以明恢63、IR64、RD23三个籼稻品种的成熟胚为材料,在固定成分(300 mg/L水解酪氨酸蛋白+500 mg/L脯氨酸+250 mg/L谷氨酰胺+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂)和相同的培养条件下,以基本培养基(MB、NB、N6和CC 4种基本培养基)、2,4-D(2.0,3.0,4.0、5.0 mg/L 4种浓度)、6-BA(0,0.2,0.4,0.5 mg/L 4种浓度)为影响因素,利用正交实验设计出16种培养基组合,通过评价愈伤质量和愈伤诱导率来筛选最适合的籼稻愈伤组织诱导培养基。...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 王晓玲  彭定祥  陈小慧  
采用7种基本培养基对苎麻4种外植体愈伤诱导及分化的效应进行了研究,结果表明,MS、MSB、LS、B5、N6 5种基本培养基对苎麻愈伤诱导效果较好,出愈率为100%,愈伤量较大。Nitsch和White培养基作用效果差。不同外植体对基本培养基反应不一致,下胚轴脱分化要求较高有机成分,子叶是最易脱分化和再分化的外植体,叶对培养基中有机成分要求不高,茎要求培养基营养成分齐全,有机成分较高利于茎愈伤分化成苗。较高的总N、P、K含量对苎麻的脱分化和分化是至关重要的,而Cu、Mo、Co等微量成分并非必需。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 张素勤  邹志荣  耿广东  吴正景  
 为了完善非洲菊组培快繁体系和推动非洲菊种苗工厂化生产,本试验以非洲菊叶片为外植体,对影响非洲菊愈伤组织诱导的基本培养基、激素种类及其浓度等关键因素进行了研究。结果表明,基本培养基以MS诱导愈伤组织效果最好,诱导率可达78.3%;2,4-D比NAA和IBA能够较快地诱导叶片产生愈伤组织,其中以1.0mg/L2,4-D诱导率最高,可达100%,且形成愈伤组织多;6-BA诱导愈伤组织的效果优于KT和TDZ,2.0mg/L6-BA的诱导率为89.7%;叶片在6-BA2.5mg/L+2,4-D0.5mg/L+NAA0.4mg/L培养基上愈伤组织诱导率最高,诱导出的愈伤组织生长快,并可分化出不定芽。
[期刊] 中南林业科技大学学报  [作者] 王肖  盘鑫海  刘馨蕴  侯金波  曾艳玲  
【目的】利用楸树间接器官发生途径培养愈伤组织并诱导出芽是楸树良种繁育的高效技术方法,同时也为楸树遗传转化方面的研究提供技术参考。【方法】以楸树试管苗叶柄为外植体,采用L9(43)正交试验设计分别研究了不同基本培养基、植物生长调节剂浓度和光质等对愈伤组织诱导的影响,并对愈伤组织进行形态学和组织细胞学观察,据此筛选出适宜的诱导培养基,继而探索愈伤组织再分化的培养条件。【结果】在叶柄愈伤组织诱导过程中,基本培养基种类(MS、N6、DKW)的影响效应不显著,而6-BA浓度、NAA浓度和光质对愈伤组织的诱导均具有显著影响。极差分析结果显示,当培养条件为白光,植物生长调节剂6-BA与NAA的浓度比在10∶1时最有利于愈伤组织的诱导,即楸树叶柄诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+1.0 mg·L-1 6-BA+0.10 mg·L-1 NAA,光质为白光;对9组愈伤组织制作石蜡切片,显微观察发现蓝光照射条件下,采用DKW+3.0 mg·L-1 6-BA+0.01 mg·L-1 NAA配方诱导出的愈伤组织细胞具有明显的拟分生组织,此愈伤组织在DKW+0.2 mg·L-1 TDZ+0.01 mg·L-1 NAA配方下可以成功诱导出不定芽。【结论】1)光照条件在愈伤组织诱导过程中具有显著的影响;2)TDZ具有较高的活性,能够高效地促进楸树愈伤组织诱导不定芽生长。本研究初步建立了楸树叶柄愈伤组织诱导方法和不定芽诱导的有效培养条件,为楸树无菌苗培育及遗传转化体系建立提供技术支撑。
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 孟颢光  张朝红  王跃进  
为优化‘砀山酥梨’转基因试管苗的生根条件,解决梨试管苗生根的难题,以‘砀山酥梨’转基因试管苗作为试验材料,研究了基本培养基类型、培养方式、不同的间苯三酚(PG)浓度、不同的IBA浓度和暗培养时间对生根的影响。结果表明:采用两步生根法,试管苗在附加80 mg/L PG和20 mg/L IBA的ASH基本培养基上暗培养7d后转入附加80 mg/L PG的ASH培养基上进行光照培养,生根率达到91.7%。
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