- 年份
- 2024(5573)
- 2023(7899)
- 2022(6766)
- 2021(6097)
- 2020(5346)
- 2019(11724)
- 2018(12005)
- 2017(21739)
- 2016(12747)
- 2015(14567)
- 2014(14641)
- 2013(14129)
- 2012(13314)
- 2011(12087)
- 2010(12214)
- 2009(11678)
- 2008(11741)
- 2007(10909)
- 2006(9523)
- 2005(8987)
- 学科
- 济(41639)
- 经济(41552)
- 管理(38524)
- 业(32965)
- 企(28093)
- 企业(28093)
- 方法(16130)
- 制(15132)
- 财(14720)
- 数学(13152)
- 数学方法(12834)
- 学(12773)
- 中国(12300)
- 农(12146)
- 体(11268)
- 业经(10263)
- 银(9368)
- 银行(9314)
- 融(8937)
- 金融(8929)
- 行(8904)
- 务(8869)
- 财务(8831)
- 财务管理(8806)
- 理论(8789)
- 企业财务(8338)
- 体制(8244)
- 贸(7348)
- 贸易(7345)
- 地方(7253)
- 机构
- 大学(183451)
- 学院(182084)
- 济(67274)
- 研究(67162)
- 经济(65491)
- 管理(62776)
- 理学(52735)
- 理学院(52067)
- 管理学(50804)
- 管理学院(50477)
- 中国(50156)
- 科学(43498)
- 京(40842)
- 农(38884)
- 所(36567)
- 财(35700)
- 研究所(33093)
- 业大(31612)
- 农业(31137)
- 中心(30286)
- 江(30130)
- 财经(27010)
- 北京(25786)
- 院(24325)
- 经(24235)
- 省(23738)
- 范(23358)
- 州(23339)
- 师范(22995)
- 技术(22748)
- 基金
- 项目(120301)
- 科学(92012)
- 研究(85118)
- 基金(84447)
- 家(76132)
- 国家(75504)
- 科学基金(62211)
- 社会(51083)
- 省(48311)
- 社会科(48177)
- 社会科学(48168)
- 基金项目(43213)
- 划(41256)
- 自然(41120)
- 自然科(40133)
- 自然科学(40118)
- 教育(39952)
- 自然科学基金(39376)
- 资助(35782)
- 编号(34454)
- 成果(30461)
- 重点(28016)
- 部(26346)
- 课题(26051)
- 制(25357)
- 发(25256)
- 创(24777)
- 计划(23809)
- 创新(23398)
- 科研(23209)
共检索到286078条记录
发布时间倒序
- 发布时间倒序
- 相关度优先
文献计量分析
- 结果分析(前20)
- 结果分析(前50)
- 结果分析(前100)
- 结果分析(前200)
- 结果分析(前500)
[期刊] 水产学报
[作者]
杭楠 谢潮添 陈昌生 纪德华 徐燕
蛋白质样品的制备是双向电泳分析的关键。为探索适用于坛紫菜叶状体蛋白质双向电泳样品的制备方法,实验对3种常用植物蛋白质分离方法进行了优化和改进,并分别同3种蛋白质裂解液联用,比较了9种方法的总蛋白质得率及双向电泳图谱效果。结果发现,采用三氯乙酸/丙酮沉淀法与裂解液C(7 mol/L尿素,2 mol/L硫脲,2%CHAPS,2%TritonX-100,2%IPG Buffer pH 3～10,65 mmol/L DTT)联用的方法,坛紫菜叶状体的蛋白质得率最高,且双向电泳图谱显示此法获得的蛋白质点数最多,蛋白点形状规则,水平和垂直拖尾情况较轻,图像清晰。实验结果还发现,在进行双向电泳分析时,采用p...
关键词：
坛紫菜 蛋白质组 双向电泳 样品制备
[期刊] 水产学报
[作者]
谢潮添 梅高尚 陈昌生 纪德华
为提取高质量的坛紫菜叶状体总RNA,对常用的几种植物RNA提取方法(CTAB法、SDS法、异硫氰酸胍法)按照去除多糖、多酚的方法进行了改良,并对分离的总RNA根据吸光值、电泳图谱及RT-PCR检测等结果与两种试剂盒(离心柱试剂盒法,RNAiso法)的提取结果进行了比较。结果表明,SDS法、异硫氰酸胍法和RNAiso法3种方法提取的RNA纯度低,质量差,部分RNA已经发生了降解。而改良CTAB法和离心柱试剂盒法提取的总RNA质量可靠,完整性好,纯度高,并且成功去除了可能影响逆转录酶活性的物质,可以进一步应用于cDNA文库构建,基因表达分析等后续实验,但这两种方法各有优缺点,应根据实际情况选用合适...
关键词：
坛紫菜 叶状体 RNA提取 RT-PCR
[期刊] 华北农学报
[作者]
邵媛媛 柳展基 王龙龙 毕玉平
以花生品种鲁花14为试验材料,提取叶片可溶性蛋白进行双向电泳分析。在三氯乙酸/丙酮沉淀法的基础上,对样品抽提、样品溶解、胶条pH范围选择、蛋白上样量、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳等关键步骤进行改进,获得了蛋白点较多、重复性好的双向电泳图谱,为开展花生叶片蛋白质组研究奠定了基础。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
苏源 余萍 孔垂思 蔡翌阳 杨静 刘林 李成云
利用改进的三氯乙酸/丙酮法对5叶期玉米根、茎、叶的总蛋白质进行双向电泳获得了高分辨率的电泳图谱。在等电点4～7范围内,根、茎、叶电泳图谱上的蛋白质点数分别为1100±89、1275±72和1327±98个。3个器官蛋白质点的分布在分子量25～75 kD和等电点5～6的范围内相对集中。通过优化样品的清洗程序结合对蛋白质在丙酮水化液中的2次沉淀能够较好地除去样品中的杂质而保证电泳质量。优化后的方法可用于玉米幼苗的根、茎、叶总蛋白质双向电泳的试验研究。
关键词：
玉米 蛋白质组 双向电泳
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
马松亚 蒋维昕 屈林丰 曹雪宁 谭玲 杨梅
为了建立适用于桉树叶片蛋白质组研究的双向电泳体系，以尾叶桉Ｅｕｃａｌｙｐｔｕｓ ｕｒｏｐｈｙｌｌａｓ广林４号无性系作为试验材料，对蛋白质样品获取方法、双向电泳等电聚焦胶条ｐ ｈ范围、蛋白质上样量、胶条平衡条件以及染色方法进行了优化。结果表明：提取液＋酚抽提法最适合桉树叶蛋白质的提取，电泳图谱可检测到８５０个蛋白质点。７ ｍｏｌ／ｌ尿素＋２ ｍｏｌ／ｌ硫脲＋４％ｃｈａｐｓ＋６０ ｍｍｏｌ Ｄｔｔ １０μｌ的蛋白质干粉裂解液，裂解效果较好；使用５０ ｍｇ蛋白质干粉和６００μｌ裂解液所获得的蛋白质浓度较高，为３．９７μｇ／μｌ。使用ｐ ｈ４～７、２４ ｃｍ Ｉｐｇ胶条，蛋白质上样量为１ ２００μｇ，．．．
关键词：
桉树 叶片 蛋白质组 无性系 双向电泳
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
范吉星 邓用川 黄惜 林栖凤 罗越华
分别采用TCA-丙酮沉淀法、酚法、尿素法、周涵韬法和笔者建立的酚改良法,提取红海榄根部总蛋白质,并进行了SDS-PAGE分析和双向电泳体系的优化.结果表明,酚改良法提取红海榄根部总蛋白质的纯度最高,质量最好,为建立双向电泳分析体系提供了较为理想的蛋白样品,获得了良好的双向电泳图谱.该结果为盐生植物,尤其是盐生木本植物,建立了一套可靠的蛋白提取和双向电泳方法.
关键词：
红海榄 蛋白质 双向电泳
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
田邁 莫海波 常亚青 湛篧篧 陈百尧 伏光辉 安建
以刺参肠组织为材料,通过蛋白质提取方法、上样前处理方法、上样量以及聚焦条件的优化,建立了刺参肠组织蛋白质双向电泳技术体系。试验结果表明,采用TCA-丙酮沉淀法制备刺参肠组织蛋白质,能够得到高纯度的蛋白质提取液。刺参样品上样前不经过处理,等电聚焦电压1 000V,电流7mA,聚焦时间3h,平衡时间30min,最佳上样量25μg,pH 4~6.5、8.5cm的IPG胶条,银染能获得较好的双向电泳图谱。通过蛋白质双向电泳体系的优化,获得了刺参肠组织的蛋白质表达图谱,为进一步研究刺参差异表达蛋白的筛选及蛋白质组学研究提供技术保障。
关键词：
刺参 肠组织 蛋白质双向电泳
[期刊] 华北农学报
[作者]
张曼 羊杏平 徐锦华 刘广 姚协丰 李苹芳
为建立高效、稳定的西瓜根系蛋白质双向电泳技术体系，对西瓜根系蛋白质样品等电聚焦（ＩＥＦ）条件、样品上样量、ＩＰＧ胶条Ｐ Ｈ值范围、染色方法等参数进行优化。结果表明，采用ＴＣＡ／丙酮法提取西瓜根系总蛋白，裂解液组成为７ ｍｏｌ／ｌ ＵｒＥＡ、２ ｍｏｌ／ｌ ＴＨｏＵＩｒＥＡ、４％ＣＨＡＰＳ（ｍ／Ｖ）、１％ＣｏＣｋＴＡＩｌ（Ｖ／Ｖ）、６５ ｍｍｏｌ／ｌ ＤＴＴ、２％Ｐ Ｈ值４～７ ＩＰＧ ＢＵＦＦＥｒ，上样量为８００μＧ，Ｐ Ｈ值４～７ ＩＰＧ（１３ Ｃｍ）胶条、ＩＥＦ条件为４８ ０００ ＶＨ，分离胶浓度为１２．５％，ＣＢＢ－ｒ２５０染色时，可获得分辨率高、重复性好的双向电泳图谱，该技术条件为适合．．．
关键词：
西瓜根系 蛋白质组 双向电泳
[期刊] 浙江农林大学学报
[作者]
张小果 乔桂荣 李翠云 刘明英 蒋晶 李海营 邱文敏 卓仁英
林木抗逆机制的研究是林木抗逆育种的重要基础。为了解旱柳Salix matsudana耐盐机制,实验采用蛋白质双向电泳技术研究盐碱胁迫前后旱柳蛋白表达变化,分离鉴定旱柳耐盐相关基因,建立一套适合于旱柳根系蛋白质的双向电泳技术体系是蛋白质组学的基础。用改进的酚抽法抽提旱柳根总蛋白,此方法不仅能很好地分离蛋白,而且能有效去除样品中的盐分。通过比较分析了双向电泳不同条件对电泳结果的影响,确立了900μg.胶条-1的最佳上样量,10 min平衡时间以及10万V.h的聚焦时间的双向电泳条件。还比较了氯化钠胁迫后双向电泳图谱差异,发现了39个差异表达蛋白,其中15个下调,24个上调(11个新诱导表达),为下...
关键词：
林木育种学 旱柳 蛋白质组学 双向电泳
[期刊] 林业科学研究
[作者]
索慧英 郑密 卢晗 曲冠证 李莹
[目的]探究适用于杨树叶片蛋白质组学研究的双向电泳体系,建立杨树叶片蛋白质的双向电泳图谱。[方法]本研究以小黑杨(Populus simonii×P. nigra)叶片为材料,对小黑杨叶片双向电泳体系的2D裂解液、蛋白的纯化、IPG胶条的pH范围、蛋白上样量、等电聚焦时间和SDS(Sodium Dodecyl sulfate)平衡时间进行优化。利用优化后的双向电泳体系分别对小黑杨、大青杨和84 K杨叶片蛋白质进行双向电泳实验。[结果]采用2D裂解液Ⅱ对小黑杨叶片蛋白质进行溶解,可显著提高蛋白的溶解性,双向电泳图谱中可分辨出326个蛋白质,比采用2D裂解液Ⅰ溶解的蛋白样品多209个蛋白质。通过蛋白裂解液提取小黑杨叶片蛋白质,利用2D clean-up试剂盒法对蛋白样品进行纯化,所得的双向电泳图谱背景清晰、蛋白质的分离效果较好。小黑杨叶片蛋白质主要集中在pH 4～7内,选用24 cm、pH 4～7的线性IPG胶条进行双向电泳,可获得分离效果较好的393个蛋白质。蛋白上样量提高至1 mg时,可分辨的蛋白质的个数明显增加,由326个增加至454个。10 000V的等电聚焦时间为13 h,SDS平衡时间为40 min时可得到背景清晰、蛋白质个数多、分辨率较高的双向电泳图谱;采用优化后的双向电泳体系对小黑杨、大青杨(Populus ussuriensis Kom.)和84 K杨(Populus alba×P.glandulosa)叶片蛋白质进行双向电泳实验,分别可检测到531、828、525个蛋白质,且蛋白质分离效果好、图谱分辨率高。[结论]优化后的双向电泳体系提高了小黑杨叶片蛋白质双向电泳图谱的分辨率和重复性,采用优化后的双向电泳体系成功的建立了小黑杨、大青杨和84 K杨叶片蛋白质的双向电泳图谱,该体系适用于小黑杨、大青杨和84 K杨叶片蛋白质组学的分析,为杨树叶片蛋白质组学的研究奠定了基础。
关键词：
小黑杨 蛋白质 双向电泳 优化
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
亓庆宝 严兴洪
为了提高坛紫菜叶状体的培养效果,在海水中分别添加2%、4%、6%、8%和10%的MES培养基,配出5种不同的培养液,并分别将其标记为1MES、2MES、3MES、4MES、5MES,然后分别用它们培养坛紫菜叶状体,结果显示:在培养的前两周,5个组的叶状体生长和湿重增加无明显差异,但两周后,各组叶状体的生长开始出现显著差异,其中2MES组和1MES组的生长速度快于其它3组。培养21d后,5个试验组的叶状体平均长度依次为2MES组>1MES组>5MES组>3MES组>4MES组;叶状体湿重增加依次为2MES组>5MES组>1MES组>3MES组>4MES组;叶状体的叶绿素a(Ch1.a)的含量在2...
[期刊] 水产学报
[作者]
张元 谢潮添 陈昌生 纪德华 周巍巍
以坛紫菜耐高温品系Z-61 F4代叶状体为试验材料、野生型坛紫菜叶状体为对照,研究了高温胁迫(30℃、26℃)与正常培养温度(21℃)下,处理不同天数(0、2、4、6、8、10 d)后坛紫菜叶状体中自由基含量、过氧化氢(H2O2)含量、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化物酶(POD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性和游离脯氨酸(Pro)含量的动态变化过程。结果发现耐高温型坛紫菜对高温胁迫的生理响应过程:高温胁迫→活性氧含量上升→细胞膜氧化受损,产生过量膜脂过氧化物→细胞感受到过量的活性氧信号→抗氧化系统和渗透压调节系统共同响应,清除活性氧→自由基含量下降。同时比较两种紫菜...
关键词：
坛紫菜 高温胁迫 生理响应 抗逆性
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
张欢欢 李琳 严兴洪
为了探讨三十烷醇对坛紫菜野生型品系(WT)叶状体生长的影响作用,用1×10-7、3×10-7、5×10-7和7×10-7的三十烷醇溶液处理WT品系叶状体1 d,恢复正常条件充气培养25 d后发现:在上述浓度范围内,3×10-7组对WT品系的叶状体的促生长效果最明显,5×10-7组次之,1×10-7组处理几乎无效果,而7×10-7组对叶状体生长有一定的抑制作用。与对照组相比,3×10-7组叶状体的平均长度增加了94.92%,叶绿素a、藻红蛋白和藻蓝蛋白含量分别提高了26.00%、92.88%和84.89%。三十烷醇对WT品系叶状体生长的促进作用呈现出先增加后降低的趋势,而且这种促生长作用会持续到...
关键词：
坛紫菜 叶状体 三十烷醇 浸泡 生长
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
范海延 陈捷 张春宇 郭海 林英
为建立适于黄瓜叶片蛋白质组分析的双向电泳方法,对黄瓜叶片蛋白提取方法、裂解缓冲液、等电聚焦(IEF)参数进行研究。结果表明:丙酮法或三氯乙酸/丙酮法提取黄瓜蛋白质较好,2-DE图谱中蛋白点较多;裂解缓冲液为9.5mol·L-1尿素,2mol·L-1硫脲,1%二硫苏糖醇(DTT),2mmol·L-1三丁基磷(TBP),4%3-[3-(胆酰氨丙基)二甲铵基]丙磺酸内盐(CHAPS),0.2%两性电解质,0.002%溴酚蓝,0.25%吐温20,10%异丙醇,5%甘油,10mmol.L-1苯甲基磺酰氟(PMSF)时,电泳图谱效果最好;IEF等电聚焦条件为25000Vh时,2-DE图谱蛋白点多且清晰。
关键词：
蛋白质组 双向电泳 黄瓜
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
王立 张硕 侯喜林 李英
以不结球白菜品种‘矮脚黄’的雌蕊为材料,从蛋白质提取、IEF程序、IPG胶条pH范围和染色方法等方面进行比较,利用Tris-HCl提取方法,使用pH 4～7 IPG胶条和改进的等电聚焦程序,改良银染方法,建立了适用于不结球白菜雌蕊蛋白质的双向电泳技术体系,并使用该体系对开花前2 d的花蕾雌蕊和开花2 d后的雌蕊蛋白质进行比较分析,获得187个差异蛋白点。
关键词：
不结球白菜 雌蕊 蛋白质 双向电泳
文献操作()
导出元数据
文献计量分析
导出文件格式：WXtxt
删除
