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[期刊] 林业科学研究  [作者] 李正红  孙振元  刘秀贤  彭镇华  
用纤维素酶、果胶酶、甘露醇的混合酶液提取地锦和五叶地锦无菌苗幼叶、五叶地锦胚乳愈伤组织及地锦幼胚愈伤组织的原生质体,对影响原生质体提取得率及活力因素进行分析,对不同材料原生质体得率进行比较,对提取的原生质体进行液体浅层、固液结合及固体等方式培养,对原生质体形成的愈伤组织以MS和改良B5培养基附加不同浓度NAA、6 BA、2,4 D、PEG、KT、ZT等进行分化培养。试验结果表明:纤维素酶对原生质体提取得率有极显著影响,适宜地锦幼叶原生质体提取的酶液组合为:纤维素酶0.5%、果胶酶0.3%、甘露醇0.6mol·L-1、酶解8h;不同材料原生质体提取得率有显著差异;仅五叶地锦胚乳愈伤组织来源的原生...
[期刊] 林业科学研究  [作者] 尹凌波  陈颖  孙振元  杨学军  赵梁军  
以五叶地锦(Parthenocissus quinquefolia)子叶柄、下胚轴、叶片为外植体进行离体培养,以1/2 MS、B5和Heller为基本培养基,附加不同浓度的细胞分裂素(6-BA,KT,TDZ)及生长素(NAA)诱导下胚轴直接再生不定芽。实验结果表明,暗处理30 d,靠近下胚轴的子叶柄接种在1/2 MS+0.3 mg.L-16-BA培养基上,其不定芽分化率最高达64.67%;下胚轴接种在1/2 MS+2.0 mg.L-1KT+0.05 mg.L-1NAA和Heller+0.5 mg.L-1BA+0.1 mg.L-1NAA培养基上,其不定芽分化率接近,达到24%左右;无菌苗的叶片接...
[期刊] 水产学报  [作者] 谢恩义  马家海  
为了开发礁膜人工育苗的新技术,以4%果胶酶和2%纤维素酶的甘露醇溶液,分离酶解经无菌处理的礁膜叶状体,在40mmol·L~(-1)CaCl_2,0.7mol·L~(-1)甘露醇,pH5.5,温度28℃,摇床速度50r·min~(-1)旋转振荡3h的条件下,1.0g湿重礁膜可获原生质体约2×10~6个。原生质体分离后依次用比重为1.030、1.026、1.022的消毒海水(添加N、P、Fe~(2+)、IAA、KB、Vit C)培养,2d后已形成明显的再生细胞壁,3~4d后细胞开始分裂,8d后形成由4~8个细胞组成的细胞团,以后原生质有不同的发育形态,较常见的是形成由一共同胶质膜包被的类似亲本的叶...
[期刊] 华北农学报  [作者] 吕复兵  张献龙  刘金兰  
以陆地棉品种“珂字201”为材料,比较了IAA+KT和2,4-D+KT在愈伤诱导和悬浮培养中的效应,结果表明,愈伤组织诱导中,IAA和2,4-D表现为正效应,且2,4-D的效应强于IAA;KT表现为负效应;胚性愈伤悬浮培养中,3种激素都表现出负效应。以胚性细胞悬浮系为材料进行了原生质体的分离和培养试验,分离原生质体的最佳酶组合为纤维素酶(OnozukaR10)3%+果胶酶(Pectinase)1.5%,原生质体培养的最佳激素组合为IAA0.5mg/L+KT0.1mg/L,适当提高原生质体密度有利于原生质体培养。光照,温度等物理因素对原生质体培养也有明显影响。原生质体再生的愈伤组织直接在无激素的...
[期刊] 华北农学报  [作者] 周延清  苑保军  张根发  卢龙斗  
用决明(CasiaobtusifoliaL.)子叶和下胚轴为材料,游离和培养原生质体。结果表明,15日龄无菌苗的子叶和下胚轴比较适于游离原生质体,每1g材料的原生质体产量高达1.6×104个;PectolyaseY-23是分离原生质体所必需的;用含2,4-D0.4mg/L(以下单位同),NAA1.0与KT0.1的KM8P漂浮培养利于原生质体的分裂。培养4d后,原生质体开始分裂,15d后其植板率约为19.2%,30d形成了细胞团或小愈伤组织。增殖愈伤组织在分化培养基上培养,可分化出芽。芽在生根培养基上培养14d生根,从而再生决明小植株。
[期刊] 林业科学研究  [作者] 付彦荣  孙振元  赵梁军  韩益  
将地锦和五叶地锦杂交,未能获得杂交种。对人工辅助自交和杂交后,花粉萌发和花粉管生长情况进行了荧光显微观测。观察发现:人工辅助自交后,花粉粒可在各自柱头表面正常萌发,花粉管可伸入花柱内。将地锦和五叶地锦杂交时,多数花粉粒不能在柱头表面萌发,或者花粉管呈卷曲、先端膨大、破裂等异常现象。授粉后2~48h的花柱中,未观察到花粉管。由此推断,地锦和五叶地锦之间的不亲和发生在柱头表面。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 孙玉强  
根据增加棉花基因库多样性的迫切需要,棉花改良计划正在转向于多种分子育种技术的应用和资源的利用。丰富的棉花野生种(Gossypiumspp.)是栽培棉遗传改良重要的种质资源和更新资源,并成为宝贵的遗传资源库,野生棉研究利用对栽培棉的遗传改良有着重大的现实和理论意义及潜在的应用
[期刊] 林业科学研究  [作者] 阙国宁  诸葛强  
以牡竹属黄竹(DendrocalamusmembranceusMunro)的竹节及无菌苗根颈为外植体,培养于含有5mg/L2,4-D、0.2mg/LKT和200mg/LLH的MS培养基上诱导愈伤组织,然后移至相同成份或不同浓度2,4-D的液体培养基中,进行悬浮培养,以建立分散性良好的悬浮细胞系。利用悬浮细胞和无菌苗叶片经酶解获大量原生质体,其产量分别约为每克鲜重2.5×105个和5×105个,活力均可达80%。
[期刊] 水产学报  [作者] 王素娟  孙云龙  马凌波  何培民  
本研究多次获得原生质体,明确了酶解原生质体的内在因素与外在条件,诸如酶溶剂的种类及浓度,酶及组成,酶解温度及pH,采种藻时间及取用部位。分离的原生质体经初步培养,发现少数2分裂,最好的有成6分裂的细胞团,但尚未成株。研究结果为扩大培养打下了良好的基础。此外,还报道了用海洋细菌酶解的试验及意义
[期刊] 华北农学报  [作者] 史宝胜  孟建朝  刘冬云  刘栋  吴雪梅  
为明确秋季不同叶色五叶地锦叶片的生理差异,以秋季同一植株上红色、中间色、绿色三种颜色的五叶地锦叶片为试材,测定了叶片中色素物质含量、酶活性以及叶片可溶性内含物的含量,结果表明:在红色叶片中,叶绿素含量较低,PAL、POD酶活性较高,花青素苷/叶绿素的比值较大,从而使R/G的值增大,叶色显现红色;而在绿色叶片中,叶绿素含量较高,PAL、POD酶活性较小,花青素苷/叶绿素的比值较低,R/G的值降低,叶片显现绿色。通过可溶性内含物测定可知,在红色叶片中的可溶性糖和蛋白质含量相对较高,与花青素苷/叶绿素的比值达到显著相关水平,表明这些内含物的积累有利于花色素苷的合成。
[期刊] 浙江林学院学报  [作者] 魏永胜  芦新建  赵廷宁  周心澄  王堃  
研究攀缘植物对墙体的降温作用及生理学机制,为垂直绿化的植物选择及生态效应的定量化研究提供依据,以不同朝向的五叶地锦Parthenocissus quinquefolia为材料,对墙体温度,蒸腾速率,冠层温度,叶片对入射光的反射、透射及以叶绿素荧光参数表示的潜在光能利用能力等指标进行分析。结果表明,不同朝向的五叶地锦对墙体的降温效果存在显著差异,东、南、西、北4个朝向日平均降温值依次为(5.4±0.61),(3.3±0.48),(3.1±0.47)和(0.48±0.07)℃。降温值除受墙体温度(r=0.8794)影响外,和蒸腾速率(r=0.7703)、冠层温度(r=0.6458)和透射率(r=0...
[期刊] 林业科学  [作者] 刘会超  孙振元  彭镇华  
用不同浓度的NaCl处理五叶地锦扦插苗 ,研究了盐胁迫对五叶地锦生长及生理特性的影响。结果表明 :小于 5 0mmol·L- 1 的NaCl处理 ,对五叶地锦生长及生理特性没有明显的影响 ;等于或大于 10 0mmol·L- 1 的NaCl处理 ,对五叶地锦的生长有明显的抑制作用 ,而且光合速率、蒸腾速率、气孔导度等生理指标值急剧降低 ,膜相对透性、MDA含量等指标明显增高。由此可以认为 ,10 0mmol·L- 1 NaCl是五叶地锦盐胁迫伤害的阈值。NaCl胁迫下光合作用的下降与膜的伤害、细胞内K+ 、Ca2 + 、Na+ 3种离子平衡关系破坏及糖的反馈性抑制有关 ,而与气孔导度和胞间CO...
[期刊] 林业科学研究  [作者] 武菊英  王庆海  孙振元  江国铿  
通过田间试验评价了火烧、修剪和化学药剂处理对五叶地锦生长的影响。结果表明:返青前火烧、修剪以及快速生长期喷施除草剂对五叶地锦的扩展蔓延均有明显的抑制作用。火烧后30~60d内覆盖度平均比对照降低36 2%;齐根修剪和留茬20、40cm的修剪50d后的覆盖率分别只有对照的61 8%、73 3%和78 1%。100g·L-1的草甘膦1500g·hm-2或草甘膦750g·hm-2和100g·L-1的森草净75g·hm-2(混用),50d后的抑制率为24%~38%;250g·kg-1的多效唑120g·hm-2和330g·L-1的除草通990mL·hm-2单用或混用均不能有效抑制五叶地锦的快速生长。因此...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 陈文品  吴琴生  刘大钧  M G K Jones  
本试验研究了影响黑麦草悬浮细胞生长以及原生质体分离和培养的部分因素.结果表明:黑麦草悬浮细胞继代培养时的接种量对悬浮细胞的生长速度影响较大,其与培养基的比例为1∶20时,生长速度较快;当悬浮细胞与酶液的比例为2~3∶10时,每 ml 酶液原生质体产量最高;原生质体培养基中用葡萄糖代替蔗糖和甘露醇作碳源或渗透压稳定剂进时,原生质体的植板率较高。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 朱根发  葛台明  余毓君  
用缩短继代间隔的方法,从小麦35816幼穗愈伤组织中筛选到由小颗粒组成的松脆型胚性愈伤组织,并建立了胚性细胞悬浮系。从中分离的原生质体培养在经高压灭菌的改良MS或改良N6培养基中,得到了大量的再生愈伤组织和胚状体。经直接分化或增殖后分化均得到再生植株。生长迅速的再生愈伤组织具有较高的植株再生能力;将再生细胞团增殖后分化能明显提高植株再生率和再生植株数。随着悬浮培养时间的增加,原生质体培养中直接胚胎发生途径将减少。
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