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[期刊] 淡水渔业  [作者] 赵建培  史维舟  陈昌福  
在草鱼免疫反应中莨菪佐剂性的初步观察赵建培(福州市郊区水产技术推广站,福州350011)史维舟,陈昌福(华中农业大学水产学院,武昌430070)已有研究报道指出,英若具有增强鱼类免疫力的作用[1]。但是,关于度著究竟是如何作用于鱼类的免疫系统,即为什...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 陈昌福  李静  木南田理一  
将莨菪碱添加在酚灭活的柱状嗜纤维菌和菌体脂多糖疫苗中,分别口服免疫接种草鱼后,通过检测血液中吞噬细胞的吞噬活性、血清中凝集抗体效价和活菌攻毒等方法,探讨了莨菪碱在草鱼口服免疫中的佐剂性。结果表明,用添加莨菪碱的疫苗免疫接种草鱼后,受免鱼体血液中吞噬细胞的吞噬活性、血清中凝集抗体效价和活菌攻毒后的免疫保护率,都明显地高于未添加莨菪碱疫苗的免疫组。从而证明了莨菪碱在草鱼口服免疫中具有良好的佐剂性。
[期刊] 淡水渔业  [作者] 何福林  
本文探讨了疫苗接种的三种方法 :注射、口服和浸泡 ,分析小结了三种不同方法的免疫保护率 ,确定了疫苗接种的最佳免疫方法注射
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 陈昌福  李静  
用酚灭活的柱状嗜纤维菌对草鱼雌亲鱼每月注射1次,连续注射7次。通过检测草鱼雌亲鱼血液中吞噬细胞的吞噬活性、血清中凝集抗体效价、受精卵和鱼苗中凝集抗体效价,首先证明了草鱼雌亲鱼对免疫原能产生较强的免疫应答,其凝集抗体可以通过受精卵而传递给仔代,而且这种凝集抗体能在孵化后的鱼苗体内持续存在27d以上。然而,用活菌对174日龄的鱼种攻毒的试验结果表明,免疫组与对照不存在显著差异。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 陈昌福  陈晓辉  楠田理一  
从甘草中提取的甘草素 (Gly)添加在翘嘴鳜细菌性败血症的 2种疫苗 ,即福尔马林灭活嗜水气单胞菌 (FKC)和菌体脂多糖 (LPS)中 ,经添加Gly的疫苗接种后 ,受免翘嘴鳜头肾中白细胞的吞噬活性和经活菌攻毒后的免疫保护率显著高于未添加Gly疫苗的免疫组 (t测验 ,P 0 .0 5)
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 史维舟  陈昌福  纪国良  邹华君  
将点状气单胞菌用福尔马林、苯酚以及加热来灭活后,给草鱼注射接种,通过测定免疫鱼血清凝集抗体效价、血液中吞噬细胞的吞噬活性和强毒攻击的免疫保护力,证实了3种方法灭活的菌苗对草鱼均具有较强的免疫原性,并以苯酚灭活菌苗的免疫保护力最强。
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 李云岗  田夫林  周开锋  高凤山  李新生  马慧玲  夏春  
为研究猪IL-2真核表达质粒对乳酸杆菌载体口蹄疫VP1 DNA疫苗(Lactobacillus acidophilusSFMD-1)猪体免疫的分子佐剂效应,通过RT-PCR方法从猪的肠系膜淋巴结克隆猪IL-2基因,基于pRc/CMV2载体,构建编码猪IL-2的真核表达质粒pCSIL2,以RT-PCR方法分析了该质粒转染PK15细胞以后的mRNA表达。结果显示预期的429 bp IL-2带仅出现在pCSIL2转染细胞。试验猪单独免疫L.acidophilusSFMD-1或者联合免疫pCSIL2质粒,后者能够增强FMDV-VP1特异的T细胞和B细胞反应,免疫后5周,单独免疫组和联合免疫组的抗体水平...
[期刊] 渔业科学进展  [作者] 邓楠楠  王印庚  张正  曲江波  廖梅杰  张辰仓  王忠华  
用福尔马林灭活哈维氏弧菌、鳗弧菌、迟钝爱德华氏菌、大菱鲆弧菌和溶藻胶弧菌制备成五联灭活疫苗,添加黄芪多糖作为佐剂。分别用添加黄芪多糖佐剂组和无佐剂组对大菱鲆进行腹腔注射,在第7、14、21、28、35、42、56天采取血样并检测抗体效价、溶菌酶活力和SOD活力,第56天进行人工攻毒实验,测定免疫保护力。结果表明,黄芪多糖佐剂组(免疫组2)和无佐剂组(免疫组1)两组的溶菌酶活力和SOD活力都在第28天达到最高值,且黄芪多糖佐剂组显著高于无佐剂组(P<0.05)。两个免疫组抗体效价也都在第28天达到最大值,但黄芪多糖佐剂组要显著高于无佐剂组(P<0.05),其中免疫组2的哈维氏弧菌、鳗弧菌、迟钝爱...
[期刊] 水产学报  [作者] 李亚男  唐美珍  卢志杰  林蠡  秦真东  
为了初步阐明草鱼哺乳动物STE20样蛋白激酶2基因(mammalian sterile 20-like kinase 2, mst2)在机体免疫中的作用机制,实验采用RNA-Seq技术对干扰mst2后经脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)应激的草鱼肾细胞系(Ctenopharyngodon idella kidney cell lines,CIK)进行了转录组测序与验证分析。测序原始数据经De novo拼接与组装后共获得22 374个独立功能基因(unigenes),其中已知功能基因为21 199个,预测的新基因为1 175个。干扰mst2后经LPS应激的unigenes表达差异分析表明,对照组与实验组之间共存在38个差异基因(differentially expressed genes,DEGs),其中上调基因16个,下调基因22个。利用实时荧光定量PCR技术(quantitative real-time PCR, qRT-PCR)对38个DEGs的RNASeq结果进行验证,结果显示,qRT-PCR和RNA-Seq分析一致,说明RNA-Seq分析结果可靠。采用RNA干扰技术干扰mst2后经LPS处理,CIK细胞转录组中DEGs参与免疫代谢的途径主要有MAPK信号通路、内吞作用途径、自噬途径和细胞因子受体相互作用途径。凋亡相关基因检测结果显示,干扰mst2并经LPS处理后,促凋亡基因(fas、bad1、bad2、caspase-3、caspase-8和caspase-9)转录水平上调,抗凋亡基因(bcl2)转录水平下调,证明干扰mst2后经LPS处理会诱发细胞发生凋亡。综上所述,mst2可通过调控凋亡相关过程参与机体免疫反应。本研究结果初步阐明了草鱼mst2参与机体免疫应答的分子机理,可为草鱼细菌性疾病防控提供一定的基础理论参考。
[期刊] 淡水渔业  [作者] 张梁  沈建忠  
用添加蛭弧菌的饲料喂养草鱼,36 d后检查草鱼的各项免疫指标。结果表明:脾脏和胸腺的免疫器官指数逐渐升高,头肾的免疫器官指数起初升高然后下降,血液中的NBT阳性细胞数量逐渐增加,血清抗菌活性与溶菌酶活性逐渐升高;用温和气单胞菌疫苗免疫后,草鱼的免疫应答水平明显提高,免疫力增强。饲料中蛭弧菌的适宜的添加剂量为5g/kg。
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 刘峰  李家乐  
草鱼是我国主要养殖鱼类之一,但其病害较多。作为机体免疫的重要组成部分,草鱼免疫因子日益受到研究者的重视。已研究的草鱼免疫因子主要有免疫球蛋白、主要组织相容性复合物、干扰素及相关因子、肿瘤坏死相关因子、补体、趋化因子受体、凝集素、转化生长因子等;草鱼抗菌肽、转铁蛋白、正五聚体蛋白、天然抗体等免疫因子尚未见报道。草鱼中已发现的免疫球蛋白为IgM,主要在头肾、中肾和脾中表达;组成MHCⅠ复合体的MHCⅠ蛋白及β2微球蛋白具有人同源蛋白相似的结构;在干扰素及相关因子中,已研究的主要有干扰素、Mx蛋白、PKP蛋白等,病毒可诱导草鱼头肾、脾、外周血及胸腺细胞中的干扰素表达;已研究的草鱼肿瘤坏死相关因子主要...
[期刊] 水产学报  [作者] 雷雪彬  常藕琴  石存斌  付小哲  王亚军  吴淑勤  
为研究草鱼头肾的组织发生发育,应用组织学技术,对1~103 dph(day post hatching)的草鱼头肾进行观察分析,描述了头肾的组织结构变化及免疫球蛋白M(IgM)阳性细胞及过碘酸雪夫氏(PAS)阳性细胞的发生和分布。结果显示,6 dph,出现头肾原基,原基中原肾管分化形成的肾小管之间出现散在的干细胞。7 dph至16 dph,造血干细胞逐渐分化成不同类型的细胞,免疫细胞数量逐渐增加;17 dph至103 dph,肾小管逐渐退化至完全消失,网状内皮系统支持下的淋巴造血组织构成头肾的主要部分。40 dph肾上腺细胞团开始出现。65 dph与成鱼头肾的组织结构接近,作为淋巴—肾上腺组织...
[期刊] 水产学报  [作者] 任燕  时云朵  石存斌  吴淑勤  
为研究蓖麻油聚乙二醇单酯葡萄糖苷(CPMG)在细菌灭活疫苗浸泡免疫中的佐剂作用,将CPMG和嗜水气单胞菌灭活疫苗联合施用,二次浸泡免疫异育银鲫后饲养在室内玻璃缸中,用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测加强免疫后2、4、7、11、14和21 d脾脏中Ig M、IL-1β、C3、C-凝集素和溶菌酶的m RNA表达量,首次免疫30 d后用同源菌株活菌攻击实验鱼;同时,用含CPMG、山莨菪碱复合佐剂的灭活疫苗浸泡免疫异育银鲫一次后饲养在池塘网箱中,定期抽取血液检测血清抗体效价并用同源菌株人工感染实验鱼。结果显
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 唐泰山  郭爱珍  陆承平  
用大肠杆菌DNA作为鸡新城疫灭活苗的佐剂接种 15日龄雏鸡 ,以鸡新城疫油乳剂灭活苗为对照 ,用血凝抑制实验检测病毒特异性血凝抑制抗体。结果表明 ,大肠杆菌DNA及油乳剂两种佐剂均能增强特异性血凝抑制抗体的效价 ,二者组间抗体滴度差异不显著 ,但大肠杆菌DNA佐剂组雏鸡的体重明显高于油乳佐剂组 (P
[期刊] 中国农业科学  [作者] 夏庆祥  张德庆  吴家强  牛星  王小龙  牛钟相  
【目的】构建猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5基因C3d-P28分子佐剂重组质粒,探明C3d-P28分子佐剂的免疫增强效果。【方法】用大肠杆菌疫苗对健康猪进行免疫激活,提取猪肝脏总RNA,RT-PCR克隆C3d-P28并连接至pUC19载体,构建pUC19-P28.n(2、4、6)串联体,然后分别将P28.n(2、4、6)连接至真核表达载体pcDNA3.1构建成pcDNA3.1-P28.n(2、4、6)。RT-PCR扩增PRRSV GP5基因,分别定向克隆至pcDNA3.1-P28.n(2、4、6)中,构建pcDNA3.1-GP5-P28.n(2、4、6)重组质粒;提取重组质粒进行双酶...
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