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[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 邹雪   刘起   周佳佳   吴天宇   刘露莎   高泽霞  
为探究myomaker基因在团头鲂(Megalobrama amblycephala)肌纤维发育中的调控作用,通过RTPCR鉴定其cDNA序列,采用石蜡切片和HE染色分析不同日龄团头鲂肌纤维发育特征,并采用实时荧光定量PCR技术探讨myomaker基因在团头鲂不同发育阶段及不同组织部位的时空表达模式。结果表明:团头鲂myomaker基因全长4 693 bp,包含5个外显子和4个内含子,开放阅读框为663 bp,共编码220个氨基酸,其编码蛋白为7次跨膜蛋白。氨基酸相似度比对显示myomaker基因保守性较高;系统进化树分析显示团头鲂myomaker基因与鲤鱼等鲤科鱼的myomaker基因聚为一支,具有最近的亲缘关系。石蜡切片结果显示团头鲂肌纤维直径在20 d到60 d持续递增,其中在40 d、50 d和60 d均显著递增(P<0.05),且在40 d到50 d时其肌纤维直径递增最快。不同发育阶段肌肉组织荧光定量结果显示myomaker在团头鲂出膜后15 d到30 d表达量逐渐上升,在30 d表达量最高(P<0.05),结合形态学数据,推测myomaker基因在团头鲂30 d后肌纤维的融合中发挥重要作用,从而促进肌纤维的肥大。1月龄团头鲂不同组织的myomaker荧光定量结果显示其在肌肉组织中表达量极其显著高于其它组织(P<0.0001)。这些结果表明,myomaker基因在团头鲂肌纤维肥大过程中发挥重要的调控作用。
[期刊] 水产学报  [作者] 王曦  肖康  刘文斌  戴永军  郭慧星  汪茫茫  李向飞  张定东  蒋广震  
饲料脂肪不仅影响养殖鱼类的生长与健康状况,还会通过调控肌纤维特性影响肉质。为探究不同碳链长度脂肪酸对团头鲂生长、肌纤维发育及肉质的影响,实验选取108尾初始平均体质量为(77.89±0.81) g健康团头鲂,随机分为4组,每组3重复,分别饲喂基础饲料(对照组)以及替代1.5%豆油的丁酸(BA)、辛酸(OA)、棕榈酸(PA)组饲料8周。结果显示,与对照组相比,饲料添加不同碳链长度脂肪酸对团头鲂生长无显著影响,然而可显著提升肌肉粘附性,增加肌纤维数量、较小直径(
[期刊] 中国农业科学  [作者] 束婧婷  宋迟  徐文娟  章明  单艳菊  陈文峰  宋卫涛  陶志云  李慧芳  
【目的】IGF-I-钙调磷酸酶(Ca N)-NFaT信号途径是调节肌肉生长、决定不同肌纤维类型的主要信号途径,本研究选择生长速度不同的高邮鸭和金定鸭为试验材料,首次对不同品种鸭胚胎期和出雏早期肌肉中IGF-I-Ca N-NFaT信号通路相关基因的表达规律及其与肌纤维类型的相关性进行了研究。【方法】采用实时荧光定量PCR方法研究鸭13、17、21、25、27胚龄和出雏后7日龄胰岛素样生长因子(INsulIN-lIke GRowTh FaCToRs,IGF-I),钙调磷酸酶(CalCINeuRIN,CN aα)和活化T细胞核因子(NuCleaR FaCToR oF aCTIvaTed T Cell...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 束婧婷  宋迟  徐文娟  章明  单艳菊  陈文峰  宋卫涛  陶志云  李慧芳  
【目的】IGF-I-钙调磷酸酶(Ca N)-NFAT信号途径是调节肌肉生长、决定不同肌纤维类型的主要信号途径,本研究选择生长速度不同的高邮鸭和金定鸭为试验材料,首次对不同品种鸭胚胎期和出雏早期肌肉中IGF-I-Ca N-NFAT信号通路相关基因的表达规律及其与肌纤维类型的相关性进行了研究。【方法】采用实时荧光定量PCR方法研究鸭13、17、21、25、27胚龄和出雏后7日龄胰岛素样生长因子(insulin-like growth factors,IGF-I),钙调磷酸酶(calcineurin,Cn Aα)和活化T细胞核因子(nuclear factor of activated T cell...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 孙燕勇  付绍印  何小龙  王标  段仕  刘永斌  张文广  
为了解肉用畜禽(牛、绵羊、猪和家禽等)肌纤维发育特性的最新研究现状,以"畜禽"、"肌纤维发育"和"肉品质"为关键词,对1981—2019年国内外相关研究进行了检索,分别从肌纤维特性、肌纤维生成过程、肌纤维生长发育的分子调控等方面归纳了不同畜禽的肌纤维发育特征。研究发现:不同畜禽肌纤维发育的一般过程基本相似;肌纤维发育的时间具有物种特异性;个别基因被确定具有调控肌纤维发育的主要功能;仍缺乏多物种肌纤维发育过程基因调控网络的构建与系统比较研究以及多物种肉品质鉴定的通用分子标记开发。
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 濮剑威  何珠子  邹曙明  
脊椎动物Hox族基因是一类重要的生长和发育调控基因,它编码具有螺旋—转角—螺旋结构的转录因子,能与下游靶基因特定区域结合并激活表达,从而调节脊椎动物胚胎发育过程中前后轴的形态建成。利用cDNA末端快速扩增法(RACE)克隆了团头鲂(Megalobrama amblycephala)HoxB1b基因的全长cDNA序列,并研究了该基因的表达模式。结果表明:(1)团头鲂HoxB1b基因cDNA全长为1 479 bp,其中包括一个编码306个氨基酸残基的921 bp阅读框,聚类分析结果表明,该基因与斑马鱼、红鳍东方鲀、青鳉的相似度分别为89%、45%、40%,在脊椎动物中具有一定的保守性;(2)RT-...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 朱德杰  吴亚明  陈宇龙  高泽霞  
为明确鱼类咽齿发生发育的分子机制,以我国特有的经济鱼类团头鲂(Megalobrama amblycephala)为研究对象,通过团头鲂全基因组序列Blast获得团头鲂分泌型钙结合磷蛋白(secretory calciumbinding phosphoprotein,SCPP)家族基因的cDNA序列,采用实时荧光定量的方法比较分析SCPP家族基因在团头鲂咽齿发生发育关键时期第四、第五鳃弓中的表达情况,以及在1龄团头鲂不同组织中的表达情况,筛选调控咽齿发育的关键调控基因。研究结果显示,团头鲂enam、scpp1、ambn、scpp9、odam、spp1与斑马鱼具有较高同源性,进化树中距离较近;通过比对不同脊椎动物enam与odam这2个基因编码的氨基酸序列,发现在鱼类中均存在2段氨基酸序列的缺失。1龄团头鲂不同组织的SCPP家族基因定量表达结果显示,enam、scpp1、ambn、scpp9和spp1在第五鳃弓(有咽齿)和肋骨里面有很高的表达量,与其他组织中的表达水平大多存在显著性差异(P
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 赵鸿昊  李学华  曾聪  王卫民  董在杰  高泽霞  
应用荧光定量PCR方法检测团头鲂lePtin及其相关基因—瘦素受体(lePtin ReCePtoR,lePtin-R)和瘦素受体重叠转录产物类似物1基因(lePtin ReCePtoR oveRlaPPing tRansCRiPt like-1,lePRotl-1)在胚胎发育早期及成鱼各组织的表达量。结果显示,3个基因在团头鲂成鱼所有检测组织中均有所表达,表明3个基因在团头鲂机体中具有多重生理功能。早期发育过程中的表达量结果显示lePtin-R和lePRotl-1基因在胚胎阶段的表达水平变化趋势一致,而lePtin在破膜后5d前一直处于较低并呈波动性变化;出膜后12d时lePtin-R和leP...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 陈宇龙  张丽红  周佳佳  孟佑廉  高泽霞  
为分析肌腱发育相关基因tnmd/xirp2a与团头鲂肌间骨发育之间的相关性,通过克隆获得团头鲂tnmd/xirp2a的cDNA序列,其中tnmd的cDNA全长为1 420bp,开放阅读框为906bp,共编码301个氨基酸;xirp2a的cDNA全长为11 715bp,包括开放阅读框9 522bp,编码3 174个氨基酸。系统进化研究表明,tnmd/xirp2a基因在不同脊椎动物中保守性很低,且相比哺乳类和家禽类,鱼类tnmd基因存在一段氨基酸的缺失。采用荧光定量方法比较分析tnmd/xirp2a在团头鲂成鱼不同组织及肌间骨发生发育4个关键时期的表达情况,结果显示,tnmd/xirp2a在肌肉和肌间骨中的表达量均显著高于其他组织,且肌肉中tnmd基因表达高于肌间骨(P<0.05),而xirp2a在肌间骨中的表达高于肌肉组织(P<0.05)。在肌间骨发育4个关键时期(Ⅰ:尾部尚未出现肌间骨;Ⅱ:尾部出现少量肌间骨;Ⅲ:尾部肌间骨大量出现且长度增加;Ⅳ:肌间骨从尾部到背部全部出现且形态成熟)中,tnmd在第Ⅲ时期的表达水平显著高于另外3个时期;在第Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ时期之间,xirp2a的表达水平没有显著性差异。此结果表明,tnmd基因在肌间骨的发育过程中存在潜在作用,而xirp2a基因与肌间骨的发育之间的相关性还需进一步研究。
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 张勇  王丹  赵宏臣  
研究了饲粮蛋白水平对肥育猪不同部位肌纤维发育增生的影响。采用完全随机区组设计,54头53kg的大×长生长猪随机分为3个处理(每处理3重复),饲喂等氨基酸(TDLys∶TDMet∶TDThr∶TDTrp=100∶34.6∶71.7∶19.2),等消化能(DE 3200kcal.kg-1),不同蛋白水平(CP 10%、18%和26%)的3种饲粮,饲喂期67d之后屠宰采样,测背最长肌、腰大肌、半腱肌、半膜肌、臂三头肌、臀中肌的肌纤维间距、肌束间距和肌大束间距。结果表明:饲粮蛋白水平不同,肌纤维各性状指标也不同。肌纤维间距、肌束间距均与饲粮蛋白水平呈正相关(p<0.01),而肌大束间距与饲粮蛋白水平呈...
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 张勇  王丹  赵宏臣  
研究了饲粮蛋白水平对肥育猪不同部位肌纤维发育增生的影响。采用完全随机区组设计,54头53kg大×长生长猪随机分为3个处理(每处理3个重复),饲喂等氨基酸(TDLys∶TDMet∶TDThr∶TDTrp=100∶34.6∶71.7∶19.2)、等消化能(DE 3200kcal.kg-1)和不同蛋白水平(CP 10%,18%和26%)的3种饲粮,饲喂期67d之后屠宰采样,测背最长肌、腰大肌、半腱肌、半膜肌、臂三头肌、臀中肌的肌纤维面积、直径和密度。结果表明:肌纤维横截面积、直径与饲粮蛋白水平呈显著正相关,肌纤维密度与饲粮蛋白水平呈显著负相关。饲粮蛋白水平与肌肉部位均影响肥育猪肌纤维的发育增生,二者...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 陈静  SHALABY Hany said ali  易少奎  王卫民  
利用不同亚科的雌性团头鲂(Megalobrama amblycephala)和雄性鳡(Elopichthys bambusa)进行人工杂交获得子一代杂交个体,对团头鲂、鳡及其杂交子代的形态特征进行比较和分析,并对团头鲂(♀)×鳡(♂)的线粒体全基因组序列进行扩增和分析。结果显示,在传统可量性状和框架结构中,杂交F_1的性状更加偏向于母本团头鲂。在可数性状上,杂交子代的背鳍棘数、胸鳍棘数、腹鳍棘数和臀鳍棘数与母本团头鲂及父本鳡都一致;而其余大多数性状,如背鳍鳍条数、腹鳍鳍条数、臀鳍鳍条数、侧线鳞数、侧线上鳞数、侧线下鳞数和鳔室数,杂交子代的性状更接近于母本团头鲂。杂交鱼的线粒体基因组序列全长为16 623 bp,与母本团头鲂一致,其碱基组成为31.23%A、16.19%G、24.69%T和27.90%C,且具有一定的A+T偏向性。其线粒体基因组共编码37个基因,分别为13个蛋白质编码基因、22个tRNA基因和2个rRNA基因,还有1个非编码区(D-Loop)。系统发育树结果显示,团头鲂(♀)×鳡(♂)与母本团头鲂的亲缘关系较近,与父本鳡的亲缘关系较远。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 栗艳飞   刘洋   姚文   马文强   杨晓静  
[目的]探讨母猪妊娠后期热应激对子代骨骼肌分化、发育、凋亡等的影响。[方法]选取12头预产期相似的(大白×长白)母猪,在妊娠后期(妊娠84天)随机分为热应激组(HS,28 – 32 ℃)和对照组(CON,18 – 22 ℃)。母猪分娩后,每窝取一头断奶仔猪采集背最长肌(LD),用Western blot 检测样品中相关蛋白的表达情况。[结果]在母猪妊娠后期热应激,显著升高初乳中INF-γ和COR的含量(P < 0.05);母猪妊娠后期热应激造成断奶仔猪LD中MyoD蛋白显著降低(P < 0.05),Myogenin蛋白表达显著升高(P < 0.05);母猪妊娠后期热应激显著升高了断奶仔猪LD中肌纤维类型MyHCⅡb的蛋白表达(P < 0.05),但MyHCⅡx的蛋白表达没有显著变化(P > 0.05);对糖代谢相关蛋白检测发现,母猪妊娠后期热应激显著降低了断奶仔猪LD中糖代谢相关蛋白PCK1和GLUT4的蛋白表达(P < 0.05);凋亡相关蛋白检测发现,母猪妊娠后期热应激造成断奶仔猪LD中凋亡相关因子Bax和Bcl-2蛋白表达显著升高(P < 0.05)。[结论]母猪妊娠后期热应激可以显著降低断奶仔猪的体重和LD重,可能与MyoD在断奶仔猪LD中表达降低和糖代谢水平降低有关。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 张燕洁  朱一超  郭旺珍  张天真  
【目的】克隆陆地棉纤维伸长发育相关的基因,并做初步功能验证。【方法】以陆地棉李氏超短纤维突变体Li1li1自交后代野生型li1li1和超短纤维突变体Li1li1开花后4d的胚珠纤维复合体为探针,通过基因芯片筛选优质材料7235棉纤维伸长、次生壁加厚不同发育时期混合cDNA文库,分离出两个在两种材料中差异表达的cDNA序列。【结果】测序结果表明,两个cDNA均为完整的基因序列,分别命名为GhSAMS(GenBank登录号:EF643509),GhNLP(GenBank登录号:EF643508)。RT-PCR分析表明:开花后4d,GhSAMS、GhNLP在陆地棉李氏野生型li1li1纤维中的表达量...
[期刊] 水产学报  [作者] 刘宁   关素华   王卫民   刘寒  
为了研究团头鲂嗅觉器官的发育过程和嗅觉受体基因(ORs)在嗅囊发育不同时期的组织表达模式,实验基于组织学、形态学及实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)的方法进行了探究。组织形态学结果显示,团头鲂嗅觉器官位于后背部和两侧眼睛前方,嗅囊紧贴于嗅腔底部,形状近似椭圆形,嗅基板沿着头尾方向平行排列。嗅囊在团头鲂刚孵化时出现嗅窝外围凹进的痕迹,随后凹进处长出嗅窝,并在中央出现长条形的嗅基板。随着仔鱼的生长发育,单侧嗅囊初级嗅基板由疏松逐渐排列紧密,嗅基板隆起高度、数量及嗅囊总体表面积逐渐增加,在成鱼阶段趋于稳定。qRT-PCR结果显示,代表性ORs在团头鲂发育不同时期的组织中表达模式各异,其中Beta-2、9、10、11在胚胎发育期的囊胚期、胚孔闭合期及嗅板期高表达;Beta-2、9、10、11和Epsilon-7在仔稚鱼期的3~15 dpf中微弱表达,在30~60 dpf时期高表达;Beta-2、10、11及Epsilon-6、7、10、13在幼鱼期至成鱼期嗅囊中高表达,Beta-2、10、9、11及Epsilon-7、10、13在3月龄团头鲂嗅球中高表达;Beta-2、10在幼鱼期至成鱼期脑中低表达。研究表明,团头鲂嗅觉器官的发育进程与ORs表达相关,不同发育时期ORs主要表达部位均在嗅囊中。本研究对进一步探究ORs的功能提供理论支持,也为后续深入研究鱼类嗅觉识别机制奠定了基础。
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