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[期刊] 淡水渔业
[作者]
祖国掌 余为一 李槿年 李郁
从鲫鱼肌肉和脏器先后分离到四株嗜水气单胞菌Ｄｙ、ｘＡ、ｘＡ５和ｘＡ６。与南京农业大学惠赠的嗜水气单胞菌Ｊ—１株进行了系统的比较鉴定。结果表明：１．五株细菌在培养特性、生化特性和药敏特性方面，除在分解水杨素和蔗糖能力以及新生霉素和新霉素敏感性等指标外，其他均基本一致；２．Ｄｙ、ｘＡ５和ｘＡ６同Ｊ—１一样能致死小白鼠和鲢鱼，而ｘＡ却不能；３．在与兔抗Ｊ—１抗血清的凝集反应中，Ｄｙ、ｘＡ５和ｘＡ６呈强阳性反应，而ｘＡ呈弱反应。这些结果表明，从不同地区分离的四株气单胞菌在致病性和抗原结构方面均存在差异。
关键词：
嗜水气单胞菌,致病性,抗原结构
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
朱兴国 范红结 陆承平 陈怀青
以EPC细胞和HEp 2细胞为细胞模型 ,用嗜水气单胞菌 (Aeromonashydrophila ,Ah)J 1株进行粘附试验 ,同时以Ah4型菌毛的抗血清作粘附抑制试验 ,用以分析AhJ 1株的粘附素及其受体。EPC细胞粘附和粘附抑制试验证实 ,AhJ 1株粘附素受体具有甘露糖、胆固醇成分 ,有少量半乳糖成分 ,无葡萄糖成分。HEp 2细胞粘附和粘附抑制试验证实 ,与其它非菌毛粘附素如S层及外膜蛋白相比 ,Ah 4型菌毛的粘附作用较为显著。抗 4型菌毛抗体抑制细菌的粘附力达 80 %以上。抗S层、外膜蛋白抗体也能使细菌的粘附力下降 ,表明Ah的粘附作用由菌毛粘附素与非菌毛粘附素共同参与。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
陈怀青 陆承平
将含有转座子Tn5的自杀性质粒pZJ25,用滤膜接合法从大肠杆菌S 17株中转移到有S层的嗜水气单胞菌J-1株。通过卡那霉素抗性筛选出嗜水气单胞菌Tn 5转移接合体。用嗜水气单胞菌TF 7株S蛋白抗体作点印迹免疫酶分析,从转移接合体中检测到一株S蛋白阴性的菌株,命名为TM 6。经检测TM 6的生理生化特性与J-1株基本相同,也能产生HEC毒素和蛋白酶,但超薄切片中未见S层结构。用菌体的酸性甘氨酸抽提物作SDS-PAGE,缺少S蛋白相应条带。用J-1株S蛋白抗血清作免疫转印,亦为阴性结果。表明TM 6是一株S层缺失突变的嗜水气单胞菌。
关键词：
嗜水气单胞菌 S层 Tn5诱变
[期刊] 中国水产科学
[作者]
钱冬 曹铮 沈锦玉 沈智华 尹文林 吴颖蕾 张念慈
用正交试验研究了嗜水气单胞菌BSK - 10株的优化培养条件。结果表明 :葡萄糖、甘油对BSK - 10株有显著的促生长作用 ;各种无机离子中 ,HPO4 2 - 、Fe2 + 、Ca2 + 、(NH4 ) 2 SO4 、Mg2 + 、Zn2 + 、Mn2 + 对BSK - 10生长有显著促进作用 ,而Cu2 + 、Co2 + 则表现为抑制作用 ;Na2 HPO4 与各种离子间存在交互作用 ,Fe2 + 、Mg2 + 、Zn2 + 、Mn2 + 的促生长作用在Na2 HPO4 的存在时表现得极为明显 ,而 (NH4 ) 2 SO4 、Mn2 + 在Na2 HPO4存在时有轻微抑制作用 ;葡萄糖...
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
王会林 晋怀远 高晔 夏苏东 李杰
2021年，山东省临沂市一养殖场养殖的美洲鲥鱼(Alosa sapidissima)突发疾病并出现严重死亡，日死亡率高峰期达到2.5%，累积死亡率约为90%。患病鱼主要症状为体表出血、溃疡，解剖可见腹腔腹水、肝脏暗红，并伴有肠炎。组织病理学检测发现，病鱼肝脏出现弥散性坏死，嗜碱性粒细胞增多和细胞肿胀空泡变性；脾脏出现出血性贫血性坏死灶、核破裂和核固缩；肾脏淋巴细胞坏死脱落，肾小体毛细血管球萎缩，近端小管和远端小管内的细胞出现不同程度的细胞结构消失。发病鱼肉眼和显微镜观察未见明显寄生虫，利用PCR方法检测鲤疱疹病毒2型、鲈鱼蛙病毒等淡水鱼类常见病毒均为阴性。细菌分离培养结果显示，从发病鱼的肝脏、肾脏和脾脏中分离得到形态一致的优势菌，命名为AS-AH2101。经16S rRNA测序比对和生理生化鉴定，确定AS-AH2101为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)。毒力基因检测结果显示，AS-AH2101携带气溶素(aerA)、溶血素(hlyA)、丝氨酸蛋白酶(ahpA)、热稳定细胞肠毒素(ast)、热敏感细胞肠毒素(altA)和密度感应系统系统(luxS)基因。人工感染实验结果显示，AS-AH2101能引起蓝曼龙(Trichogaster trichopterus)发病死亡，半数致死量为3.23×10~(4) CFU/尾。药物敏感性研究表明，AS-AH2101对头孢拉啶、阿莫西林等4种抗生素具有耐药性，对四环素和多西环素等11种抗生素敏感。综上所述，本研究报道了我国养殖美洲鲥鱼感染嗜水气单胞菌的典型病例，为美洲鲥鱼在我国养殖过程中的疾病防控以及嗜水气单胞菌病的防治提供了参考和借鉴。
[期刊] 上海水产大学学报
[作者]
潘厚军 吴淑勤 董传甫 石存斌 叶美茜 林天龙 黄志斌
从患溃疡病的鳜肾脏中分离出一株病原细菌编号为GYK1。此株病菌人工感染鳜、银鲫、剑尾鱼,实验鱼出现出血、肌肉坏死或溃疡症状;腹腔注射攻毒,对鳜、银鲫、剑尾鱼、小鼠的半致死剂量(LD50)分别为8.33×104、1.06×105、1.26×105、1.05×106CFU/g;菌培养液上清能溶解鳜、加洲鲈、银鲫、小鼠、兔、绵羊、人O型血等的红细胞,在绵羊血平板上为β 溶血,不同代次和保存条件的细菌溶血性稳定。细菌在电镜下的形态、生化特性和ID32E系统自动鉴定的结果均符合嗜水气单胞菌的特征;PCR扩增检测到嗜水气单胞菌特异性的毒力基因气溶素基因(aerA)209bp片段,进一步说明此株病原细菌为含...
关键词：
鳜 嗜水气单胞菌 鉴定 毒力 溶血性
[期刊] 淡水渔业
[作者]
单晓枫 张洪波 郭伟生 钱爱东
用平板划线法或点种法对212株分离自养殖水体和水产动物胃肠道的细菌进行筛选,得到1株对嗜水气单胞菌(Aerom onas hydrophila)有拮抗作用的细菌MLS-7。经过生理生化的初步鉴定,该菌为粪肠球菌(Entero-coccus faecalis)。MLS-7上清液抑菌试验和共培养试验表明其对嗜水气单胞菌有较强的抑菌作用。进一步对MLS-7抑菌谱进行测定,确认其对鱼源的病原菌有一定的抑菌作用。
[期刊] 中国水产科学
[作者]
李绍戊 王荻 刘红柏 尹家胜 卢彤岩
为研究嗜水气单胞菌多重耐药菌株整合子基因盒分布及分子特征,首先采用K-B纸片扩散法检测28株鱼源嗜水气单胞菌对18种抗生素的耐药性,然后利用PCR方法检测菌株中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型整合酶基因并对其携带基因盒序列进行分析。结果表明,分离到的鱼源嗜水气单胞菌呈多重耐药性,对-内酰胺类、大环内酯类、氯霉素类和四环素类药物的耐药率超过60%,而对氟喹诺酮类药物较敏感,且菌株间耐药谱差异较大。53.57%的菌株Ⅰ类整合子阳性,21.43%的菌株Ⅱ类整合子阳性,整合子阳性菌株对多种药物的耐药率均高于阴性株,且Ⅰ类整合子阳性株多重耐药率明显高于Ⅱ类整合子阳性株,表明整合子系统在嗜水气单胞菌多重耐药性中发挥重要作用。...
[期刊] 水产学报
[作者]
吕爱军 胡秀彩 孙敬锋 YEONG Yiksung 石洪玥 李莉 孔祥会
为建立鱼源嗜水气单胞菌全菌蛋白图谱并进行质谱分析，利用双向电泳（２－ＤＥ）结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ／ＴＯＦ－ＭＳ）技术对嗜水气单胞菌的蛋白质组学进行鉴定研究。结果显示，嗜水气单胞菌２８°Ｃ培养１２ ｈ、三氯醋酸（ＴＣＡ）／丙酮沉淀法提取全菌蛋白、等电聚焦２０ ０００ Ｖｈ的２－ＤＥ图谱匹配率达８１％；采用１８ ＣＭ、ｐ ｈ ３－１０ ＩｐＧ胶条进行２－ＤＥ分析获得１４６个蛋白点，随机选取部分蛋白点进行肽质量指纹图谱（ｐＭＦ）分析，共鉴定２３个蛋白点包括膜脂蛋白、分子伴侣、３０Ｓ核糖体蛋白Ｓ１、延伸因子、细胞色素Ｃ等，其中发现烯醇化酶、甘油醛－３－磷酸脱氢酶、二氢．．．
[期刊] 水产学报
[作者]
陆宏达 金丽华
将病鳖进行细菌分离，获得的菌株经细菌学鉴定，致病菌为嗜水气单胞菌（Ａｅｒｏｍｏｎａｓｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ）。病鳖食欲减退以至不吃食，反应迟钝；颈部充血，腹甲严重充血，甚至出血、溃疡，体表可见形成的疤痕；口腔、舌尖和鼻孔充血，甚至口、鼻孔中流出血水；肝脏、肾脏、脾脏肿大，有坏死病灶。组织病理观察表明：大量细菌侵入肺、肾、脾、血液、心脏和肌肉等器官组织，造成出血以及全身性组织损害，组织细胞出现肿胀、颗粒变性、玻璃样变和坏死崩解；血管壁严重受损，内皮细胞坏死脱落。血管内以及器官组织血液中大量红细胞变形、碎裂、溶解，呈现溶血性贫血，血液中白细胞数量极少，病变区无白细胞浸润现象。病鳖由于血细胞广泛受损、...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
严亚贤 孙建和 陈怀青 陆承平
从南京某无病鱼塘水体中分离到一株革兰氏阴性、有运动力的短杆菌，定名为Ｗ－１株。其生化特性为氧化酶阳性，发酵葡萄糖产酸产气，发酵甘露醇、水杨素和阿拉伯糖，不发酵肌醇。从该菌株培养物的上清中提取的外毒素，具有细胞毒性与溶血性；用嗜水气单胞菌ＨＥＣ毒素的单抗进行检测，乳胶凝集试验及ＤｏｔＥＬＩＳＡ均呈阳性结果。电镜观察未发现该菌株有晶格样排列的Ｓ层和菌毛，与Ｊ－１株Ｓ蛋白抗血清及Ｒ菌毛抗血清作免疫转印亦为阴性结果，表明该菌株无菌毛及Ｓ层。细胞粘附试验表明，该菌株不能粘附于ＨＥｐ－２细胞。毒力试验显示，除去上清的Ｗ－１菌株对小鼠和鲫鱼的ＬＤ５０均大于１０１０，可确认其无致病力。以上结果提示：嗜水气单胞...
关键词：
嗜水气单胞菌 致病性 结构 粘附
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
范红结 陈怀青 姚火春 陆承平
将嗜水气单胞菌（Ａｅｒｏｍｏｎａｓｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ，Ａｈ）Ｊ－１菌株第５代［Ｊ－１（５）］在产毒素培养基上连续传代至第３５代［Ｊ－１（３５）］，并分别检测Ｊ－１（６）和Ｊ－１（３５）的生化特性。另取Ｊ－１（６）、Ｊ－１（１５）、Ｊ－１（２５）和Ｊ－１（３５）分别制备嗜水气单胞菌灭活疫苗，用其分别免疫鲫鱼，之后用Ａｈ强毒攻击；同时用Ｊ－１（６）经腹腔注射或浸泡各免疫组鲫鱼，测其最低免疫剂量。结果显示，从第５代传至３５代，Ａｈ菌株的培养特性和免疫原性没有显著差异；腹腔免疫和浸泡免疫的最低有效剂量分别为１×１０７ｃｆｕ／尾和５×１０７ｃｆｕ／ｍＬ。表明ＡｈＪ－１株可作为理想的疫苗生产株。
关键词：
嗜水气单胞菌 免疫原性 生化特性 稳定性
[期刊] 淡水渔业
[作者]
杨移斌 董靖 胥宁 刘永涛 杨秋红 艾晓辉
从患病的黄鳝（Ｍｏｎｏｐｔｅｒｕｓ ａｌｂｕｓ）体内分离到一株致病菌株Ｄｂ０１，对该菌株进行人工感染、生理生化鉴定及１６ｓ ｒ Ｄｎａ序列分析。结果显示：人工感染黄鳝出现与自然发病相同的症状，表明菌株Ｄｂ０１为发病黄鳝的病原菌。菌株Ｄｂ０１为革兰氏阴性杆菌，无芽孢和荚膜，在兔血平板上能形成明显的β－溶血。序列分析显示，菌株Ｄｂ０１与嗜水气单胞菌（ａｅｒｏＭｏｎａｓ ｈｙＤｒｏｐｈｉｌａ）的同源性达９９％。药敏试验结果显示，菌株Ｄｂ０１对诺氟沙星、左氧氟沙星、阿奇霉素及氟苯尼考等抗生素高度敏感，五倍子、黄柏、地榆及乌梅等中草药对菌株Ｄｂ０１抑菌作用强。
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