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[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
张小能 杨先乐 曹海鹏 胡鲲 安健 黄志华
试验采用海藻酸钠包埋法对噬菌蛭弧菌(Bdellovibrio bacteriovorus)进行固定化,制备得到噬菌蛭弧菌颗粒。以噬菌蛭弧菌活菌数为考核指标,优化噬菌蛭弧菌固定化条件。通过单因素试验和正交试验,评价了海藻酸钠浓度、氯化钙浓度、蛭弧菌菌液与海藻酸钠胶体溶液的比例(V/V)、玉米油浓度、包埋温度、搅拌时间、搅拌速度和交联时间对噬菌蛭弧菌固定化的影响。结果表明,作为载体配方优化因素的海藻酸钠浓度和玉米油浓度对活菌数具有显著性影响,而氯化钙浓度和蛭弧菌菌液与海藻酸钠胶体溶液的比例(V/V)影响不显著;作为过程优化因素的温度和搅拌速度对活菌数具有显著性影响,而搅拌时间和交联时间影响不显著。...
关键词：
噬菌蛭弧菌 颗粒剂 制备 优化
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
张吕平 胡超群 罗鹏 沈琪
采用16S rDNA特异引物对63F和842R对蛭弧菌标准菌株Bdellovibrio bacteriovorus 109-J和实验菌株Bd-9913进行了PCR鉴定,使用Bd-9913菌株分别对3株虾类病原菌溶藻弧菌Vibrio alginolysticus LS01、HF09,副溶血弧菌V.parahaemolyticusV28以及1株大肠埃希氏菌Escherichiacoli CH-42进行裂解。结果表明,105PFU/ml的Bd-9913对于109CFU/ml的宿主菌具有较好的裂解效果。采用3.0×105PFU/ml Bd109-J和Bd-9913分别与饲料混合(v/w)后投喂3.0g...
关键词：
噬菌蛭弧菌 对虾 弧菌病 生物防治
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
舒杨 殷中琼 赵建 李平 李太强 龙兴发 朱链发
【目的】研究合欢皂苷颗粒剂对高原鼠兔的抗生育作用,确定最佳用量,为高原鼠兔种群数量的控制提供参考。【方法】用主药量为135,270和540mg/kg的合欢皂苷水溶液灌胃小鼠,进行抗小鼠生育力试验,确定效果后换算为高原鼠兔的相应剂量,制备成合欢皂苷质量分数分别为0.3%,0.6%和1.2%的颗粒剂,并进行摄食系数研究,筛选出抗生育效果与适口性均良好的剂量,研究该颗粒剂对高原鼠兔怀孕率及生殖器官临床剖检和病理学的影响。【结果】主药含量为540mg/kg的合欢皂苷抗小鼠生育效果良好,对雄性小鼠的抗生育率可达63%,对雌性小鼠的抗生育率可达70%。通过换算,合欢皂苷质量分数为1.2%的颗粒剂对高原鼠兔...
关键词：
合欢皂苷 抗生育作用 颗粒剂 高原鼠兔
[期刊] 上海水产大学学报
[作者]
邓璐 杨先乐 李圆圆 李怡 曹海鹏 胡琨
实验使用自来水双层检测法与平板计数法,研究了不同的保护液、保藏温度和保藏载体的选择对蛭弧菌长期保藏的影响,以及对优化保藏条件下的蛭弧菌复苏率和复苏蛭弧菌的噬菌能力检测,并且对保藏期限内宿主菌的存活情况与蛭弧菌的存活情况的相互影响做了首次的报道。结果表明:以1/100 NB等低营养液体为保护液、琼脂为载体、加入适量宿主菌于4℃,蛭弧菌保存可达2年以上,保存期内蛭弧菌的复苏率和出斑数目较对照组都有极其显著的提高(P
[期刊] 淡水渔业
[作者]
杨先乐 曹海鹏 钱云云
噬菌蛭弧菌(以下简称蛭弧菌)是一类专门以捕食细菌为生的寄生性细菌,具有独特的裂解细菌的生物学特性,虽然我国对蛭弧菌的研究滞后于国外,但是利用它作为养殖水体环境中的天然生物改良剂和“活性抗生素”,仍然具有广阔的发展前景。从蛭弧菌的研究历程、蛭弧菌生物学特性包括其分布、宿主范围、生活周期、保藏、噬菌条件、除菌效果、安全性等方面,剖析了研发中存在的问题,进一步提出了研究的方向。
关键词：
噬菌蛭弧菌 生物净化因子 活性抗生素
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
孙武 李宇翔 谢勇平 黄志坚 李清禄
用中药材黄柏、黄连、秦皮和白头翁提取物制备了复方鱼用中药整肠颗粒,建立了产品有效成分含量的测定方法,研究了产品的稳定性、安全性和临床应用的有效性.结果表明,利用高效液相色谱法对复方鱼用中药整肠颗粒中主要抑菌活性成分盐酸小檗碱的含量进行检测,其精密度、稳定性、重复性和加样回收率均较好.产品室温留样观察24个月,样品性状、含量等各项指标均无明显变化,稳定性良好.产品对日本鳗鱼、甲鱼、黄鳝和南美白对虾混饲喂服的安全浓度均大于3 g·kg-1;对胃肠炎常见致病菌——肠型点状气单胞菌、鳗弧菌和嗜水气单胞菌的最小抑菌浓度(MIC)均为0.625μg·mL-1,温和气单胞菌的MIC为1.25μg·mL-1....
[期刊] 水产学报
[作者]
温崇庆 薛明 张金燕 黄瑜 周世宁
通过双层平板法以不同细菌为宿主测定了8个厂家蛭弧菌类生物制剂的噬斑含量及噬斑分离物的宿主裂解范围;以3对靶向不同类群蛭弧菌类生物的特异引物对各产品及其噬斑分离物进行了PCR检测;对两株代表性蛭弧菌分离物的16S rRNA基因进行了测序,并通过构建蛭弧菌科进化树分析了它们的系统地位。结果表明,被检测的8个蛭弧菌类生物制剂中有6个质量明显不合格,仅两个样品被蛭弧菌科特异引物检测为阳性,被双层平板法证实有噬斑出现。其中一个样品JSF中存在两种形态和宿主范围不同的噬斑分离物,且不同宿主菌计数结果存在明显差异。16S rRNA基因序列分析表明这两种噬斑分离物JSF1和JSF2,分别属于蛭弧菌科的类群1(...
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
周亭 刘淑贞 杨涛瑞 陈天银 张志庆
将科研成果"金纳米颗粒的制备及性能研究"设计成综合性实验。以氯金酸为原料,利用单宁酸和柠檬酸钠还原法,通过探索和优化反应条件制备出不同粒径的金纳米颗粒(AuNPs),采用紫外光谱等进行表征,系统研究了AuNPs在不同放置时间、温度、盐浓度和pH值的条件下的稳定性能。选用在硼氢化钠(NaBH_4)的存在下,4-硝基苯酚(4-NP)被还原为4-氨基苯酚(4-AP)作为反应模型评价了AuNPs的催化活性等。该实验可帮助学生掌握纳米材料制备原理、掌握大型仪器的工作原理及操作技能,提高学生运用综合知识的能力,培养学生的科研素养。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
谢文刚
以荧光染料(联吡啶钌配合物)为核,二氧化硅为外壳制备了荧光纳米颗粒.电镜检测结果显示,合成的二氧化硅纳米颗粒粒径为(20±3)nm,分布均匀,形态规则.对荧光纳米颗粒进行生物修饰得到荧光探针,以DNA碱基配对原则为基础建立检测DNA的方法,利用激光扫描共聚焦显微镜研究玻片上的荧光信号和荧光强度.结果表明,该方法不仅可定量检测到4.4×10-8 mol/L的目标DNA3,而且可定性检测目标DNA3、单碱基错配DNA4及随机序列DNA5,为发展DNA检测技术提供了新的思路.
关键词：
荧光纳米颗粒 核酸探针 DNA检测
[期刊] 水产学报
[作者]
李宁求 余露军 付小哲 刘礼辉 林强 常藕琴 石存斌 黄志斌 吴淑勤
菌蜕具有完整细菌表面抗原结构,可诱导机体的体液和细胞免疫应答,成为疫苗制备的候选之一,为了探讨鳗鲡迟缓爱德华氏菌菌蜕疫苗的可行性,实验采用基因重组技术构建了噬菌体PhiX174裂解酶基因(Lysis E)的温控表达载体,转化迟缓爱德华氏菌,成功制备其菌蜕,并对菌蜕形态、溶菌动力学、裂解效率以及制备条件等进行了研究。结果表明,细菌菌蜕表面形成溶菌孔道,细胞因内容物流失而发生明显的皱缩;构建的迟缓爱德华氏菌诱导后1 h开始裂解,5 h后裂解基本完成,裂解效率为99.99%,冷冻干燥后重悬涂布平板,未检出活菌,电镜观察表明冻干前后细胞形态未见明显变化;构建的迟缓爱德华氏菌分别在OD600值为0.4和...
关键词：
鳗鲡 迟缓爱德华氏菌 菌蜕 条件优化
[期刊] 华北农学报
[作者]
刘祥
为构建水产致病菌溶藻弧菌附着定植因子ACFA原核表达载体,优化ACFA蛋白的诱导表达条件,制备ACFA蛋白小鼠多克隆抗体。通过分子克隆获得ACFA蛋白的表达菌株,利用切胶纯化获得ACFA蛋白,免疫小鼠制备多克隆抗体,采用ELISA法检测抗体滴度为1∶3 200倍,Western-Blotting法检测抗血清特异性较好。通过正交试验,获得ACFA菌株的最佳表达条件为:诱导时菌液OD600值0.5,加IPTG终浓度0.3 mmol/L,诱导时间8 h,诱导温度32℃;最佳培养条件为:葡萄糖浓度0,转速230 r/min,装液量50 m L。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
刘祥
Ｏｍｐ Ｕ蛋白为溶藻弧菌主要外膜蛋白，具有很好的免疫原性，在疫苗上有很好的应用前景。本试验通过分子克隆获得Ｏｍｐ Ｕ蛋白的表达菌株，利用切胶纯化获得Ｏｍｐ Ｕ蛋白，免疫小鼠制备多克隆抗体，采用ＥＬＩＳＡ法检测抗体滴度为１∶３２００倍，ＷＥＳｔＥｒｎＢＬＯｔｔＩｎｇ法检测抗血清特异性较好。通过正交试验，获得Ｏｍｐ Ｕ菌株的最佳表达条件为：诱导时菌液ＯＤ６００值１，加Ｉｐｔｇ终浓度０．１ｍｍＯＬ／Ｌ，诱导时间８ ｈ，温度３２℃；最佳培养条件为：葡萄糖浓度０．４％，转速２３０ ｒ／ｍＩｎ，装液量５０ ｍ Ｌ。为Ｏｍｐ Ｕ工业发酵、蛋白功能与疫苗开发研究奠定基础。
[期刊] 林业科学
[作者]
石东霞 蒋忠荣 殷中琼 杨帆 贾仁勇 颜其贵 贺常亮 徐娇
鼠害一直影响我国林业的发展,传统的灭鼠药物由于对环境的破坏过大且有长期毒副残留的危害,因而现有灭鼠制剂已逐渐开始向天然灭鼠剂转变,其中通过抗生育机制控制害鼠的繁殖力度是一
关键词：
小鼠 印楝油颗粒剂 摄食系数 抗生育作用
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
杨玉成 田勇 乔健 赵立红 胡永峰 金继昌 董长贵
为评价中药“病毒克”颗粒剂体外抗新城疫病毒(NDV)的活性,采用细胞培养技术,通过细胞病变抑制法和MTT比色法检测“病毒克”颗粒剂在鸡胚成纤维细胞(CEF)中对新城疫病毒增殖的影响。结果表明“病毒克”颗粒剂对CEF的半数中毒质量浓度(TC50)为61.35 mg/mL,抗NDV的半数有效质量浓度(EC50)为3.2 mg/mL,治疗指数(TI)为19.2,“病毒克”颗粒剂对新城疫病毒具有直接灭活作用和阻断其感染CEF的作用,并存在明显的量效关系(P
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